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    一種甘丙肽在制備抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖的試劑中的應(yīng)用制造技術(shù)

    技術(shù)編號(hào):15668719 閱讀:168 留言:0更新日期:2017-06-22 11:10
    本發(fā)明專利技術(shù)公開了一種甘丙肽在制備抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖的試劑中的應(yīng)用,所述試劑中具有甘丙肽作為有效成分,該試劑通過甘丙肽與甘丙肽受體結(jié)合對膠質(zhì)瘤細(xì)胞進(jìn)行作用,并對細(xì)胞系的增殖進(jìn)行抑制。本發(fā)明專利技術(shù)從臨床上提供了甘丙肽作為試劑抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖的支持,同時(shí),該試劑可進(jìn)一步制備成靜脈注射針劑,一方面易于臨床上的操作和使用,另一方面也能方便于患者術(shù)后自行注射和進(jìn)行輔助康復(fù)治療。

    An application in the preparation of galanin inhibition reagent on proliferation of glioma cells in

    The invention discloses a reagent used in the preparation of galanin inhibits the proliferation of glioma cells in which, as an effective ingredient of the galanin reagent, the reagent by galanin and galanin receptor binding effects on glioma cells, and the cells proliferation inhibition. The present invention provides clinically galanin as reagents inhibit the proliferation of glioma cells, at the same time, the agent can be further prepared into intravenous injection, on the one hand is easy to use in clinical practice, on the other hand can also facilitate the postoperative adjuvant therapy and self injection.

    【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
    一種甘丙肽在制備抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖的試劑中的應(yīng)用
    本專利技術(shù)屬于醫(yī)療
    ,具體來說,涉及一種甘丙肽及其受體在抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞的增殖中的用途。
    技術(shù)介紹
    甘丙肽(galanin):是由29個(gè)氨基酸組成的神經(jīng)肽,廣泛分布于中樞和外周神經(jīng)系統(tǒng)中;膠質(zhì)瘤(glioma):常見的惡性中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤之一,膠質(zhì)瘤細(xì)胞則是由人體膠質(zhì)瘤病理組織體外培養(yǎng)的細(xì)胞系,用于基礎(chǔ)科研研究使用;細(xì)胞增殖(cellproliferation):細(xì)胞以分裂的方式進(jìn)行增殖并產(chǎn)生新的細(xì)胞,是生命體的重要生命特征。而腫瘤細(xì)胞的增殖則是指細(xì)胞在致癌因素的作用下,基因發(fā)生改變,從而導(dǎo)致異常持續(xù)的分裂增殖。甘丙肽是由29~30個(gè)氨基酸組成的神經(jīng)肽,能廣泛分布于中樞和外周神經(jīng)系統(tǒng),并且更有研究提示甘丙肽也存在于神經(jīng)內(nèi)分泌的組織中(Giaidetal.,1991)。在后續(xù)對甘丙肽的研究中發(fā)現(xiàn),其參與了多種重要的生理、行為以及認(rèn)知過程當(dāng)中。除此之外,更有研究提示甘丙肽與多種疾病有密切的關(guān)系,例如癲癇、抑郁癥、阿爾茨海默病和癌癥。其中,甘丙肽與腫瘤發(fā)生、增殖以及凋亡的關(guān)系越來越引起關(guān)注。早期研究就已經(jīng)發(fā)現(xiàn),甘丙肽和其三種受體亞型廣泛表達(dá)于多種人類腫瘤細(xì)胞系,包括神經(jīng)母細(xì)胞瘤、肺癌細(xì)胞系以及大腸癌等。在深入研究后發(fā)現(xiàn),越來越多的數(shù)據(jù)顯示甘丙肽在多種神經(jīng)內(nèi)分泌相關(guān)腫瘤的病理過程中起到了負(fù)調(diào)節(jié)的作用,這也提示甘丙肽及其受體可能具有抑癌的功能。甘丙肽通過其三種G蛋白偶聯(lián)受體亞型廣泛參與和調(diào)控多種類型的生理過程中,分別被克隆和命名為甘丙肽1型受體(GalR1),甘丙肽2型受體(GalR2)和甘丙肽3型受體(GalR3)。每種甘丙肽受體亞型均展現(xiàn)出了不同的生理藥理特性,并且三種受體亞型分別介導(dǎo)多種不同的下游信號(hào)通路。GalR1和GalR3主要與Gi/o蛋白受體亞型偶聯(lián),通過激活腺苷酸環(huán)化酶引起細(xì)胞膜上電流的超極化和膜上鉀離子通道的開放。與GalR1和GalR3受體亞型不同的是,GalR2下游信號(hào)通路的激活主要是通過與Gq/11蛋白受體亞型偶聯(lián)后,使細(xì)胞內(nèi)的三磷酸腺苷聚集,細(xì)胞內(nèi)鈣離子的釋放以及下游信號(hào)通路的開放。膠質(zhì)瘤作為人類最為常見的惡性中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤之一,其較高的致死率一直排在顱腦疾病的前列。由于腦膠質(zhì)瘤具有較強(qiáng)的增殖、侵襲以及對藥物耐受的能力,而且預(yù)后效果一直極其不佳,臨床上一直沒有較為有效的治療方法。因此,研究探索一種新的抑癌藥物對于人腦膠質(zhì)瘤在臨床上的治療尤為緊要。
    技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
    本專利技術(shù)所要解決的技術(shù)問題是提供一種甘丙肽在制備抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖的試劑中的應(yīng)用,由此解決現(xiàn)有臨床無甘丙肽是否能調(diào)節(jié)膠質(zhì)瘤的增殖研究的空白。本專利技術(shù)解決上述技術(shù)問題所采取的技術(shù)方案如下:一種甘丙肽在制備抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖的試劑中的應(yīng)用,所述試劑中具有甘丙肽作為有效成分,該試劑通過甘丙肽與甘丙肽受體結(jié)合對膠質(zhì)瘤細(xì)胞進(jìn)行作用,并對細(xì)胞系的增殖進(jìn)行抑制。進(jìn)一步地,優(yōu)選的是,所述膠質(zhì)瘤細(xì)胞選擇人源U251或者T98G瘤細(xì)胞。進(jìn)一步地,優(yōu)選的是,將甘丙肽和生理鹽水混合并制成試劑。進(jìn)一步地,優(yōu)選的是,所述試劑中,所述甘丙肽的濃度為100nM-1000nM。進(jìn)一步地,優(yōu)選的是,所述試劑被制備成靜脈注射針劑。進(jìn)一步地,優(yōu)選的是,所述試劑中,所述甘丙肽的濃度為100nM。進(jìn)一步地,優(yōu)選的是,所述甘丙肽通過甘丙肽1型受體(GalR1)來介導(dǎo),并對膠質(zhì)瘤細(xì)胞進(jìn)行作用。進(jìn)一步地,優(yōu)選的是,將甘丙肽和培養(yǎng)基混合并制成試劑。一種制備抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖的試劑,所述試劑中具有甘丙肽作為有效成分,該試劑通過甘丙肽與甘丙肽受體結(jié)合對膠質(zhì)瘤細(xì)胞進(jìn)行作用,并對細(xì)胞系的增殖進(jìn)行抑制。本專利技術(shù)采取了上述方案以后,從臨床上提供了甘丙肽作為試劑抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖的支持,同時(shí),該試劑可進(jìn)一步制備成靜脈注射針劑,一方面易于臨床上的操作和使用,另一方面也能方便于患者術(shù)后自行注射和進(jìn)行輔助康復(fù)治療。本專利技術(shù)的其它特征和優(yōu)點(diǎn)將在隨后的說明書中闡述,并且,部分地從說明書中變得顯而易見,或者通過實(shí)施本專利技術(shù)而了解。本專利技術(shù)的目的和其他優(yōu)點(diǎn)可通過在所寫的說明書、權(quán)利要求書、以及附圖中所特別指出的結(jié)構(gòu)來實(shí)現(xiàn)和獲得。附圖說明下面結(jié)合附圖對本專利技術(shù)進(jìn)行詳細(xì)的描述,以使得本專利技術(shù)的上述優(yōu)點(diǎn)更加明確。其中,圖1a是甘丙肽及其三個(gè)受體在人源U251膠質(zhì)瘤細(xì)胞中的mRNA表達(dá)水平示意圖;圖1b是甘丙肽及其三個(gè)受體在人源T98G膠質(zhì)瘤細(xì)胞中的mRNA表達(dá)水平示意圖;圖2a-圖2f是實(shí)驗(yàn)中甘丙肽對人源U251和T98G膠質(zhì)瘤細(xì)胞系的增殖起抑制作用的實(shí)驗(yàn)測試示意圖;圖3a-圖3d是實(shí)驗(yàn)中甘丙肽抑制人源U251和T98G膠質(zhì)瘤細(xì)胞的克隆形成的測試示意圖;圖4a-圖4b是實(shí)驗(yàn)中甘丙肽對細(xì)胞周期發(fā)揮有效的阻滯作用示意圖;圖5a-圖5h是甘丙肽在裸鼠的腫瘤種植模型實(shí)驗(yàn)中顯著抑制腫瘤的增殖示意圖。具體實(shí)施方式以下將結(jié)合附圖及實(shí)施例來詳細(xì)說明本專利技術(shù)的實(shí)施方式,借此對本專利技術(shù)如何應(yīng)用技術(shù)手段來解決技術(shù)問題,并達(dá)成技術(shù)效果的實(shí)現(xiàn)過程能充分理解并據(jù)以實(shí)施。需要說明的是,只要不構(gòu)成沖突,本專利技術(shù)中的各個(gè)實(shí)施例以及各實(shí)施例中的各個(gè)特征可以相互結(jié)合,所形成的技術(shù)方案均在本專利技術(shù)的保護(hù)范圍之內(nèi)。具體來說,隨著甘丙肽的研究,人民逐漸發(fā)現(xiàn)細(xì)胞生長因子,并且發(fā)現(xiàn)其對膠質(zhì)瘤具有顯著的抑癌作用。并且,更有研究提示神經(jīng)肽也能作用到膠質(zhì)瘤并具有抑制其增殖的功能。由于調(diào)節(jié)膠質(zhì)瘤的增殖對臨床上抑制腫瘤生長起到了至關(guān)重要的作用,因此,研究甘丙肽是否能調(diào)節(jié)膠質(zhì)瘤的增殖具有重要的臨床意義。值得關(guān)注的是,早期就有研究提示甘丙肽及其三種受體亞型均有表達(dá)于人腦膠質(zhì)瘤病理組織當(dāng)中,但是其是否在人源膠質(zhì)瘤細(xì)胞系中表達(dá)和發(fā)揮調(diào)節(jié)作用一直很少關(guān)注。近幾年研究發(fā)現(xiàn)甘丙肽通過GalR1在口腔鱗狀細(xì)胞癌中發(fā)揮了抑制其腫瘤增殖的作用,更有研究深入探究了甘丙肽及其受體亞型的抑癌功能主要是通過介導(dǎo)MAPK信號(hào)通路而作用的。因此,基于上述的研究基礎(chǔ),對于探究甘丙肽及其受體對腫瘤的增殖是否起抑制作用具有重要的基礎(chǔ)和臨床意義。并且,由于甘丙肽對人源膠質(zhì)瘤細(xì)胞系的增殖和凋亡是否也有一定的調(diào)節(jié)作用一直少有關(guān)注和研究。因此,研究其對膠質(zhì)瘤細(xì)胞系是否也能發(fā)揮抑癌作用顯得尤為重要。為此,提供了一種甘丙肽在制備抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖的試劑中的應(yīng)用,所述試劑中具有甘丙肽作為有效成分,該試劑通過甘丙肽或者甘丙肽受體對膠質(zhì)瘤細(xì)胞進(jìn)行作用,并對細(xì)胞系的增殖進(jìn)行抑制。進(jìn)一步地,優(yōu)選的是,所述膠質(zhì)瘤細(xì)胞選擇人源U251或者T98G瘤細(xì)胞。進(jìn)一步地,優(yōu)選的是,將甘丙肽和生理鹽水混合并制成試劑。進(jìn)一步地,優(yōu)選的是,所述試劑中,所述甘丙肽的濃度為100nM-1000nM。進(jìn)一步地,優(yōu)選的是,所述試劑被制備成靜脈注射針劑。進(jìn)一步地,優(yōu)選的是,所述試劑中,所述甘丙肽的濃度為100nM。進(jìn)一步地,優(yōu)選的是,所述甘丙肽通過甘丙肽1型受體(GalR1)來介導(dǎo),并對膠質(zhì)瘤細(xì)胞進(jìn)行作用。進(jìn)一步地,優(yōu)選的是,將甘丙肽和培養(yǎng)基混合并制成試劑。本專利技術(shù)采取了上述方案以后,從臨床上提供了甘丙肽作為試劑抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖的支持,同時(shí),該試劑可進(jìn)一步制備成靜脈注射針劑,一方面易于臨床上的操作和使用,另一方面也能方便于患者術(shù)后自行注射和進(jìn)行輔助康復(fù)治療。具體來說,在本專利中,通過實(shí)時(shí)定量PCR檢測到甘丙肽及其三個(gè)受本文檔來自技高網(wǎng)
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    一種甘丙肽在制備抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖的試劑中的應(yīng)用

    【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
    一種甘丙肽在制備抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖的試劑中的應(yīng)用,其特征在于,所述試劑中具有甘丙肽作為有效成分,該試劑通過甘丙肽與甘丙肽受體結(jié)合對膠質(zhì)瘤細(xì)胞進(jìn)行作用,并對細(xì)胞系的增殖進(jìn)行抑制。

    【技術(shù)特征摘要】
    1.一種甘丙肽在制備抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖的試劑中的應(yīng)用,其特征在于,所述試劑中具有甘丙肽作為有效成分,該試劑通過甘丙肽與甘丙肽受體結(jié)合對膠質(zhì)瘤細(xì)胞進(jìn)行作用,并對細(xì)胞系的增殖進(jìn)行抑制。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的甘丙肽在制備抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖的試劑中的應(yīng)用,其特征在于,所述膠質(zhì)瘤細(xì)胞選擇人源U251或者T98G瘤細(xì)胞。3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的甘丙肽在制備抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖的試劑中的應(yīng)用,其特征在于,將甘丙肽和生理鹽水混合并制成試劑。4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的甘丙肽在制備抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖的試劑中的應(yīng)用,其特征在于,所述試劑中,所述甘丙肽的濃度為100nM-1000nM。5.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的甘丙肽在制備抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞...

    【專利技術(shù)屬性】
    技術(shù)研發(fā)人員:徐志卿梅竹
    申請(專利權(quán))人:北京腦重大疾病研究院
    類型:發(fā)明
    國別省市:北京,11

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