一種富微量元素低氘水提取小分子菌菇多糖的方法技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)提供了一種富微量元素低氘水提取小分子菌菇多糖的方法，利用冰川水低氘的特性，作為提取溶劑，由于冰川水富含微量元素，有利于菌菇多糖的溶解和提取。提取過程中，加熱低氘水，配合微波提取，有利于提高多糖的提取效率，多糖的提取率更高。在提取后，先反復(fù)凍融，除去蛋白質(zhì)和其他雜質(zhì)，再利用胰蛋白酶進一步除去蛋白質(zhì)，提高多糖的獲得率，而且，最后醇沉降一次，即可高效率的除去蛋白質(zhì)。最后，加入三氟乙酸，將菌菇多糖切割為小分子多糖，有利于人體吸收，提高其保健價值。具有抑制癌細胞，降血脂、降血糖等作用。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明專利技術(shù)提供的方法，多糖提取率高，雜質(zhì)少，而且，多糖分子小，有利于人體吸收。

A Method for Extracting Polysaccharide from Mushroom with Microelement Rich and Low Deuterium Water

The invention provides a method for extracting small molecular mushroom polysaccharides from low-deuterium water rich in trace elements. The low-deuterium characteristic of glacial water is used as extracting solvent. Because glacial water is rich in trace elements, it is beneficial to the dissolution and extraction of mushroom polysaccharides. In the extraction process, heating low deuterium water and microwave assisted extraction can improve the extraction efficiency of polysaccharides, and the extraction rate of polysaccharides is higher. After extraction, the protein and other impurities were removed by repeated freezing and thawing, and then the protein was further removed by trypsinase to improve the yield of polysaccharides. Moreover, the protein could be efficiently removed by alcohol precipitation once at last. Finally, adding trifluoroacetic acid, the mushroom polysaccharide was cut into small molecular polysaccharides, which was conducive to human absorption and improved its health value. It can inhibit cancer cells, reduce blood lipid and blood sugar. Compared with the prior art, the method provided by the invention has the advantages of high extraction rate of polysaccharide, less impurities, and small polysaccharide molecule, which is beneficial to human absorption.

【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】
一種富微量元素低氘水提取小分子菌菇多糖的方法
本專利技術(shù)屬于菌菇多糖的提取領(lǐng)域，具體涉及一種富微量元素低氘水提取小分子菌菇多糖的方法。
技術(shù)介紹
自然界里存在的水一般由2個氫原子和1個氧原子組成，但氫原子有質(zhì)量不同的3個同位素，原子量分別為1，2，3的氫(H)、氘(D,重氫)、氚(超重氫)。氘含量較低的為低氘水。自然界的水中，重氫的含量約為150ppm，天然低氘水(冰川水)的氘含量在130ppm-145ppm之間。由D代替H結(jié)合的水就是重水。地球上一切自然水體中都含有氫的同位素氘，氘會抑制細胞的生長，使DNA遺傳信息產(chǎn)生扭曲或斷裂，進入生命體后很難代謝出去。高含量的氘對生命體的代謝、遺傳、酶素等都有不良影響，是一種導致生物衰老、病變、癌變及至死亡。國內(nèi)外研究表明，低氘水對人體健康有諸多好處，更有益于生命體的生存和繁衍，對于人類的健康具有重要意義。氘對生命體的生存和繁衍有害，而含氘量偏低的低氘水，具有特殊的分子結(jié)構(gòu)，分子因直徑比普通水小一半，進入生命體后具有吸收快、滲透力高、溶解力強的特點，能有效代謝生命體的物質(zhì)，吸納有益營養(yǎng)，排除有害物質(zhì)。這些情況對動物如此，對植物如此，對人類也是如此。因此，含氘量偏高的重水被稱做“死亡之水”，而含氘量較低的低氘水則被稱做“生命之水”。菌菇多糖是提高人體免疫力的首先營養(yǎng)品。其有較強的抗癌活性，尤其是胃癌和腹水癌，能抑制腫瘤細胞的生長，對致癌物質(zhì)有吸收、排泄的作用；能降血糖、血脂、膽固醇，改善糖尿病和動脈硬化。大分子的菌菇多糖分子量大，還含有可溶性纖維素等，人體難吸收，消化利用率低。
技術(shù)實現(xiàn)思路
本專利技術(shù)的目的在于提供一種富微量元素低氘水提取小分子菌菇多糖的方法，利用低氘水作為提取劑，利用微波提取的方法，經(jīng)過分解、去除雜質(zhì)后，得到小分子菌菇多糖，多糖提取率高，雜質(zhì)少，保健價值更高，更容易被人體吸收。本專利技術(shù)具體技術(shù)方案如下：本專利技術(shù)提供的一種富微量元素低氘水提取小分子菌菇多糖的方法，包括以下步驟：1)將菌菇切碎過篩后，置于低氘水中浸泡，然后加熱至85-95℃，微波提取；2)將步驟1)提取體系離心，收集提取液，反復(fù)凍融，離心后，收集上層清液；3)向步驟2)得到的上層清液中加入碳酸氫鈉，調(diào)節(jié)pH至6-7，然后，加入胰蛋白酶，水浴加熱至35-37℃，反應(yīng)0.5-1h；然后加熱使酶失活，離心，過濾，收集濾液，得到多糖粗提取液；4)將步驟3)制備的多糖粗提取液減壓濃縮后，加入無水乙醇沉降，離心，過濾，收集沉淀；5)沉淀加入低氘水溶解后，加入三氟乙酸，加熱水解，40-60℃真空回收三氟乙酸，得到小分子多糖提取液；6)將小分子多糖提取液濃縮，真空干燥，得小分子菌菇多糖。進一步的，步驟1)中所述過篩是指過80-200目篩。步驟1)中所述菌菇選自靈芝、猴頭菇或香菇。步驟1)中所述浸泡是指置于10-15倍低氘水中浸泡2-5h；步驟1)中所述微波提取，是指微波功率400-500W條件下，微波提取1-2h。步驟1)所述低氘水選自冰川水，或者，將冰川水利用公開號101481088A，申請?zhí)枮?00910046130.8，申請名稱為“一種超輕水的制備裝置及超輕水的制備方法”公開的方法制備得2-60ppm的低氘水。步驟2)中所述反復(fù)凍融是指：收集提取液后，待提取液冷卻至室溫后，置于-18～-20℃條件下冷凍4-8h后，置于室溫下溶解，然后離心，收集上層清液，再置于-18～-20℃條件下冷凍4-8h后，置于室溫下溶解，然后離心，收集上層清液，重復(fù)3-5次。步驟3)中胰蛋白酶的加入量為上清液質(zhì)量的3-8％。步驟3)中所述加熱使酶失活是指加熱至90-95℃，保溫1-2h。步驟4)中所述減壓濃縮是指濃縮至原來體積的1/4-1/3。步驟4)中所述加入無水乙醇沉降具體為：加入濃縮液體積2-5倍的乙醇，靜置4-8h，離心，收集沉淀。步驟5)所述低氘水選自冰川水，或者，將冰川水利用公開號101481088A，申請?zhí)枮?00910046130.8，申請名稱為“一種超輕水的制備裝置及超輕水的制備方法”公開的方法制備得2-60ppm的低氘水。步驟5)中沉淀加入5-10倍質(zhì)量的低氘水溶解。步驟5)中三氟乙酸的用量為處理的溶液的質(zhì)量的1-2％。步驟5)中所述加熱水解是指加熱至80-95℃條件下，水解15-25min。本專利技術(shù)中，利用冰川水低氘的特性，作為提取溶劑，或者，利用冰川水制備氘含量更低的低氘水，由于冰川水富含微量元素，有利于菌菇多糖的溶解和提取。提取過程中，加熱低氘水，配合微波提取，有利于提高多糖的提取效率，多糖的提取率更高。在提取后，先反復(fù)凍融，除去蛋白質(zhì)和其他雜質(zhì)，再利用胰蛋白酶進一步除去蛋白質(zhì)，提高多糖的獲得率，而且，最后醇沉降一次，即可高效率的除去蛋白質(zhì)。最后，加入三氟乙酸，將菌菇多糖切割為小分子多糖，有利于人體吸收，提高其保健價值。具有抑制癌細胞，降血脂、降血糖等作用。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本專利技術(shù)提供的方法，多糖提取率高，雜質(zhì)少，而且，多糖分子小，有利于人體吸收。具體實施方式實施例1一種富微量元素低氘水提取小分子菌菇多糖的方法，包括以下步驟：1)將干香菇切碎過100目篩后，置于12倍質(zhì)量的冰川水(低氘水)中浸泡5h，然后加熱至90℃，微波功率500W條件下，微波提取1h。2)將步驟1)提取體系離心，收集提取液，置于-18℃條件下冷凍8h后，置于室溫下溶解，然后離心，收集上層清液，再置于-18℃條件下冷凍6h后，置于室溫下溶解，然后離心，收集上層清液，再置于-18℃條件下冷凍4h后，置于室溫下溶解，然后離心，收集上層清液，；3)向步驟2)得到的上層清液中加入碳酸氫鈉，調(diào)節(jié)pH至7，然后，加入上清液質(zhì)量的4％的胰蛋白酶，水浴加熱至37℃，反應(yīng)0.6h；然后加熱至92℃，保溫1.5h使酶失活，離心，過濾，收集濾液，得到多糖粗提取液；4)將步驟3)制備的多糖粗提取液減壓濃縮至原來體積的1/3后，加入濃縮液體積3倍的乙醇沉降，靜置8h，離心，過濾，收集沉淀；5)沉淀加入8倍質(zhì)量的冰川水溶解后，加入溶液質(zhì)量1.5％的三氟乙酸，85℃條件下加熱水解20min，60℃真空回收三氟乙酸，得到小分子多糖提取液；6)將小分子多糖提取液濃縮，真空干燥，得小分子菌菇多糖。香菇多糖提取率19.23％。實施例2利用冰川水，按照公開號101481088A，申請?zhí)枮?00910046130.8，申請名稱為“一種超輕水的制備裝置及超輕水的制備方法”公開的方法制備得氘豐度35ppm的低氘水。一種富微量元素低氘水提取小分子菌菇多糖的方法，包括以下步驟：1)將干香菇切碎過200目篩后，置于12倍質(zhì)量的氘豐度35ppm的低氘水中浸泡4h，然后加熱至95℃，微波功率450W條件下，微波提取2h。2)將步驟1)提取體系離心，收集提取液，置于-20℃條件下冷凍5h后，置于室溫下溶解，然后離心，收集上層清液，再置于-20℃條件下冷凍6h后，置于室溫下溶解，然后離心，收集上層清液，再置于-20℃條件下冷凍4h后，置于室溫下溶解，然后離心，收集上層清液，再置于-20℃條件下冷凍6h后，置于室溫下溶解，然后離心，收集上層清液，最后，再置于-20℃條件下冷凍6h后，置于室溫下溶解，然后離心，收集上層清液；3)向步驟2)得到的上層清液中加入碳酸氫鈉，調(diào)節(jié)pH至7，然后，加入本文檔來自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護點】
1.一種富微量元素低氘水提取小分子菌菇多糖的方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟：1)將菌菇切碎過篩后，置于低氘水中浸泡，然后加熱至85?95℃，微波提取；2)將步驟1)提取體系離心，收集提取液，反復(fù)凍融，離心后，收集上層清液；3)向步驟2)得到的上層清液中加入碳酸氫鈉，調(diào)節(jié)pH至6?7，然后，加入胰蛋白酶，水浴加熱至35?37℃，反應(yīng)0.5?1h；然后加熱使酶失活，離心，過濾，收集濾液，得到多糖粗提取液；4)將步驟3)制備的多糖粗提取液減壓濃縮后，加入無水乙醇沉降，離心，過濾，收集沉淀；5)沉淀加入低氘水溶解后，加入三氟乙酸，加熱水解，40?60℃真空回收三氟乙酸，得到小分子多糖提取液；6)將小分子多糖提取液濃縮，真空干燥，得小分子菌菇多糖。

【技術(shù)特征摘要】
1.一種富微量元素低氘水提取小分子菌菇多糖的方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟：1)將菌菇切碎過篩后，置于低氘水中浸泡，然后加熱至85-95℃，微波提取；2)將步驟1)提取體系離心，收集提取液，反復(fù)凍融，離心后，收集上層清液；3)向步驟2)得到的上層清液中加入碳酸氫鈉，調(diào)節(jié)pH至6-7，然后，加入胰蛋白酶，水浴加熱至35-37℃，反應(yīng)0.5-1h；然后加熱使酶失活，離心，過濾，收集濾液，得到多糖粗提取液；4)將步驟3)制備的多糖粗提取液減壓濃縮后，加入無水乙醇沉降，離心，過濾，收集沉淀；5)沉淀加入低氘水溶解后，加入三氟乙酸，加熱水解，40-60℃真空回收三氟乙酸，得到小分子多糖提取液；6)將小分子多糖提取液濃縮，真空干燥，得小分子菌菇多糖。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟1)中所述菌菇選自靈芝、猴頭菇或香菇。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟1)中所述浸泡是指置于10-15倍低氘水中浸泡2-5h。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟1)...

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：張斌，徐偉，凌中鑫，
申請(專利權(quán))人：安徽國科生物科技有限公司，
類型：發(fā)明
國別省市：安徽,34