一種復合三文魚皮膠原蛋白靜電紡絲膜及其制備方法技術

本發明專利技術公開了一種復合三文魚皮膠原蛋白靜電紡絲膜及其制備方法，包括三文魚皮預處理、制備三文魚皮膠原蛋白液、靜電紡絲制備致密層、致密層的交聯、制備疏松層、干燥滅菌等步驟。該復合三文魚皮膠原蛋白靜電紡絲膜機械強度好，質地柔軟，能與傷口緊密貼合，能夠促進血管新生和肉芽組織生長，加速膠原沉積，可明顯提高傷口愈合率，并且減少傷口色素沉積和疤痕的產生。的產生。的產生。

【技術實現步驟摘要】
一種復合三文魚皮膠原蛋白靜電紡絲膜及其制備方法


[0001]本專利技術屬于生物材料領域，具體是一種復合三文魚皮膠原蛋白靜電紡絲膜及其制備方法。

技術介紹

[0002]膠原蛋白(collagen)是一種在動物體中含量最高、分布最為廣泛的具有纖維狀結構的蛋白質，在動物體中，約占體內所有蛋白質的25％至40％，每個膠原分子是由三條α－肽鏈以平行、右手螺旋形式纏繞成草繩狀的三股螺旋結構，分子質量約為300ku。在膠原蛋白中甘氨酸、賴氨酸、脯氨酸、羥脯氨酸等氨基酸的含量非常豐富，其中羥脯氨酸是膠原蛋白的特有氨基酸。對于魚類而言，膠原蛋白主要存在于魚皮、魚鱗、魚骨等部位，其中魚皮中的膠原含量豐富，最高可占其蛋白質總量的80％多。在我省沿海地區每年加工出口的三文魚片已形成一定的規模，將三文魚加工成生魚片時，必須去除魚皮，由此可產生大量的魚皮、鰭、頭等下腳料，目前這些下腳料主要用作飼料，未進行深度的開發利用，產生的經濟效益有限。所以，從三文魚皮中提取膠原蛋白，能變廢為寶，增加附加值。膠原蛋白具有很強的生物活性及生物功能，能參與細胞的遷移、分化和增殖，使骨、腱、軟骨和皮膚具有一定的機械強度。因其弱的抗原性和良好的生物相容性可作為生物醫藥材料的基礎材料。
[0003]本專利技術以三文魚皮為基礎材料提取三文魚皮膠原蛋白液，制備一種復合三文魚皮膠原蛋白靜電紡絲膜，提高傷口愈合率，減少傷口色素沉積和疤痕的產生。

技術實現思路

[0004]本專利技術的目的是提供一種復合三文魚皮膠原蛋白靜電紡絲膜及其制備方法，該方法制備的靜電紡絲膜具有優異的生物相容性和機械性能，具體技術方案如下描述。
[0005]一種復合三文魚皮膠原蛋白靜電紡絲膜及其制備方法，具體包括以下步驟：
[0006]1.三文魚皮預處理：脫黑皮、脫脂、脫色；
[0007]2.制備三文魚皮膠原蛋白液：超聲、酶法處理、過濾、冷凍干燥；
[0008]3.制備致密層：將步驟2中膠原蛋白沉淀配置成溶液液移至靜電紡絲注射泵中，靜電紡絲形成致密層；
[0009]4.致密層的交聯：將致密層用戊二醛溶液交聯；
[0010]5.制備疏松層：步驟2中膠原蛋白沉淀配置膠原蛋白溶液均勻的涂覆在交聯后的致密層上，冷凍干燥、滅菌；
[0011]進一步地，步驟1所述去黑皮是用0.1％
?
5％乙酸溶液浸泡魚皮2
?
8min，再將黑色魚皮刮去。
[0012]進一步地，步驟1所述脫脂是魚皮與異丙醇按照料液比1：20的比例攪拌處理。
[0013]進一步地，步驟1所述脫色是用2％
?
10％的雙氧水溶液攪拌處理。
[0014]進一步地，步驟2所述超聲是按照1：20的液料比，將魚皮置于醋酸溶液中超聲，超聲功率為200
?
600W，超聲時間為10
?
30min；
[0015]進一步地，步驟2所述酶法處理是用質量為魚皮干重的2％
?
6％的胃蛋白酶攪拌處理。
[0016]進一步地，步驟2所述過濾是用濾袋
?
筒式過濾系統。
[0017]進一步地，步驟3中推進器的推進速度為5
?
15mL/h；
[0018]進一步地，步驟3所述紡絲電壓為10
?
30kV；
[0019]進一步地，步驟3所述紡織采用的不銹鋼滾軸的接收距離為6
?
30cm；
[0020]進一步地，步驟3所述紡織采用的不銹鋼滾軸的轉動速度為500
?
1000rmp；
[0021]進一步地，步驟3所述紡絲時間為2
?
10h。
[0022]進一步地，步驟4所述戊二醛的濃度為2％
?
20％。
[0023]進一步地，步驟5所述冷凍干燥是在真空冷凍干燥機內進行真空冷凍干燥。
[0024]進一步地，步驟5所述滅菌是通過Co
?
60γ射線輻照滅菌，輻照劑量為10
?
25KGy。
[0025]與現有技術相比，本專利技術的有益技術效果如下：
[0026]該復合三文魚皮膠原蛋白靜電紡絲膜包括兩部分，致密層是通過將膠原蛋白液通過靜電紡絲形成的膜，疏松層是將從魚皮中提取的膠原蛋白液涂覆在致密層上，通過其自組裝形成一層膠原海綿，機械強度好，質地柔軟，能與傷口緊密貼合，能夠促進血管新生和肉芽組織生長，加速膠原沉積，可明顯提高傷口愈合率，并且減少傷口色素沉積和疤痕的產生。
附圖說明
[0027]圖1復合靜電紡絲膜的掃描電鏡觀察(左為凍干膜，右為靜電紡絲膜)
[0028]圖2復合靜電紡絲膜的體外降解曲線
[0029]圖3受試品對小鼠體重的影響
具體實施方式
[0030]以下結合實施例對本專利技術作進一步詳細描述：
[0031]實施例1復合三文魚皮膠原蛋白靜電紡絲膜的制備
[0032]1、三文魚皮預處理
[0033]取冷凍儲存的三文魚皮,化凍后刮去魚鱗，用5℃的純化水沖洗3遍至表面無明顯雜質，用0.3％的乙酸溶液浸泡魚皮4min，用5℃純化水沖洗掉殘留乙酸，用刀將黑色魚皮刮去，將魚皮依次置于4L 10％異丙醇溶液和5％的雙氧水溶液攪拌處理后切成5mm
×
5mm的形狀、洗凈，40目紗布瀝干，稱重為200.21g。
[0034]2、制備膠原蛋白液
[0035]將預處理后的魚皮置于在4L 0.5mol/L的醋酸溶液中超聲，超聲功率為200W，超聲時間為10min，超聲結束后將液體倒出，稱取4g胃蛋白酶加入到溶液中攪拌，攪拌結束后，將膠液分別通過5微米的濾袋過濾、0.45微米的筒式過濾系統進行精過濾獲得膠原蛋白液，用200目濾袋8000r離心10min得到膠原蛋白沉淀，然后在真空冷凍干燥機內真空冷凍24h得到膠原蛋白沉淀(干基)。
[0036]3、制備致密層
[0037]配置1.5％濃度的膠原蛋白溶液，靜置、脫泡，然后分次裝入10mL靜電紡絲注射器，
注射泵控制溶液流速為5mL/h左右，電壓設定在25kV，針頭與收集板的距離為20cm，紡織采用的不銹鋼滾軸的接收距離為6
?
30cm，不銹鋼滾軸的轉動速度為1000rmp，紡絲2h，形成致密層。
[0038]4、致密層的交聯
[0039]將致密層置于5mL 8％的戊二醛溶液中交聯2h，用5℃純化水洗滌5遍。
[0040]5、制備疏松層
[0041]配置1％濃度的膠原蛋白溶液，靜置、脫泡、加堿中和pH至7，將制備的膠原蛋白液均勻的涂覆在交聯后的致密層上靜置30min，通過膠原自組裝形成疏松層結構，獲得三文魚皮膠原蛋白靜電紡絲膜，置于真空冷凍干燥機內進行真空冷凍干燥，通過Co
?
60γ射線輻照滅菌，滅菌劑量為15KGy，封裝保存。
[0042]實施例2復合靜電紡絲膜的掃本文檔來自技高網...

【技術保護點】

【技術特征摘要】
1.一種復合三文魚皮膠原蛋白靜電紡絲膜及其制備方法，其特征在于，方法包括以下步驟：步驟1.三文魚皮預處理：脫黑皮、脫脂、脫色；步驟2.制備三文魚皮膠原蛋白：超聲、酶法處理、過濾、冷凍干燥；步驟3.制備致密層：將步驟2中膠原蛋白配置成溶液移至靜電紡絲注射泵中，靜電紡絲形成致密層；步驟4.致密層的交聯：將致密層用戊二醛溶液交聯；步驟5.制備疏松層：步驟2中膠原蛋白配置成膠原蛋白溶液均勻的涂覆在交聯后的致密層上，冷凍干燥、滅菌。2.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟1所述去黑皮是用0.1％
?
5％乙酸溶液浸泡魚皮2
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8min，再將黑色魚皮刮去；所述脫脂是魚皮與異丙醇按照料液比1：20的比例攪拌處理。3.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟1所述脫色是用2％
?
10％的雙氧水溶液攪拌處理。4.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟2所述超聲是按照1：20的液料比，將魚皮置于醋酸溶液中超聲，超聲功率為200
?
600W，超聲時間為10
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30min；所述酶法處理是用質量...

【專利技術屬性】
技術研發人員：鄧付敏，
申請(專利權)人：煙臺海昊生物技術有限公司，
類型：發明
國別省市：