【技術實現步驟摘要】
本申請涉及生物醫學體外檢測，尤其是涉及一種電發光膠體金檢測試紙條、制備方法及檢測方法。
技術介紹
1、體外醫學診斷（ivd）是通過對人體樣本比如血液、體液、組織等進行檢測而獲取臨床診斷信息，進而篩查疾病或機體功能風險評估的產品和服務技術。當前，臨床診斷信息中，80%左右來自體外診斷技術，而其費用占醫療費用不到20%，已成為人類疾病預防、診斷、治療的重要組成部分。其中，免疫膠體金層析法是一種常用的免疫分析方法，主要以膠體金作為示蹤標志物。該技術操作簡單、可家庭自檢且檢測速度快等優勢，現已成廣泛應用的ivd檢測手段。然而，隨著生物醫學的進步和人們對健康生活的更高要求，傳統膠體金檢測技術難以滿足人體樣本中痕量標志物的精準檢測，比如因“血腦屏障”所致的帕金森標志物-突觸蛋白、半胱氨酸和刺突蛋白等，而且一些針對靈敏度提升的設計存在生產/使用成本高、操作復雜等問題。
2、為此，提出本專利技術。
技術實現思路
1、鑒于
技術介紹
中存在的問題，本申請提供一種電發光膠體金檢測試紙條、制備方法及檢測方法，該電發光膠體金檢測試紙條能夠高效、快速、超靈敏的對樣本中痕量標志物進行檢測。
2、根據本專利技術的一個方面，提供一種電發光膠體金檢測試紙條，包括基板、樣品墊、納米金膠條帶、親水性虹吸膜、吸水墊和導電板；所述樣品墊、納米金膠條帶、親水性虹吸膜和吸水墊按樣品層析方向依次連接的設置于所述基板上，所述導電板設于所述親水性虹吸膜與所述基板之間；所述納米金膠條帶中含有多抗與聯吡啶釕修飾膠體金
3、通過使用本技術方案中的電發光膠體金檢測試紙條，基于電化學發光（ecl）技術，在納米金膠條帶中設置多抗與聯吡啶釕修飾膠體金，這些金顆粒因表面等離子體共振（spr）效應而具有優異的光/電活性，從而在樣品墊上滴加樣本稀釋液后，基于虹吸作用發生層析，帶動膠體金區域遷移，再配合將導電板外接電化學設備，通過電化學設備施加電壓，利用發光物質在電極上通過電化學反應形成激發狀態，然后返回基態時形成光輻射，即可根據檢測帶和質控帶的顯色結果實現對樣本中痕量標志物進行檢測，不僅高效、快速，而且靈敏度超高，兼具ecl和膠體金兩種技術的優勢。
4、在本專利技術的一些實施方式中，所述導電板遠離所述樣品墊的一端從所述親水性虹吸膜與所述基板之間延伸出設定長度。
5、在本專利技術的一些實施方式中，所述含有多抗與聯吡啶釕修飾膠體金的納米金膠條帶的制備包括以下步驟：
6、取氯金酸溶液，加熱煮沸，然后快速加入檸檬酸鈉溶液，繼續加熱，之后自然冷卻，獲得納米膠體金；
7、將制得的膠體金離心分離，然后用甲醇洗滌，再用巰基丙酸或巰基丙胺溶液分散，混合攪拌，再離心洗滌，之后與羧基化ru(bpy)32+和多克隆抗體混合反應，低溫存放，真空干燥后，獲得多抗與聯吡啶釕標記的膠體金；
8、將制得的多抗與聯吡啶釕修飾膠體金再分散至去離子水中，濃縮富集在親水性纖維膜表面，獲得所述納米金膠條帶。
9、在本專利技術的一些實施方式中，所述導電板的制備包括以下步驟：
10、以醋酸纖維板為基底材料，將導電小分子于醋酸纖維板上進行電沉積反應，然后進行活化，再經超聲洗滌后，獲得活化導電聚合底板；
11、在靠近所述導電聚合底板的一端處，以不導電塑料模具粘合在導電聚合底板表面，插入石墨烯溶液中，以循環伏安法沉積；然后再進行活化、超聲洗滌后，真空干燥處理，獲得所述導電板。
12、在本專利技術的一些實施方式中，所述電沉積反應采用計時電流法或循環伏安法；
13、優選地，所述循環伏安法電壓范圍為0~1.0?v，掃速為10~50?mv˙s-1，所述計時電流法電壓為0.5~1.0?v。
14、在本專利技術的一些實施方式中，所述電沉積反應的電沉積溶液為磷酸緩沖液。
15、在本專利技術的一些實施方式中，所述塑料模具為三孔結構，所述三孔結構的中間孔洞為工作電極位置，所述三孔結構的左右兩側孔洞分別為對電極和參比電極位置。
16、在本專利技術的一些實施方式中，所述檢測帶為單克隆抗體或適配體修飾帶；所述質控帶為兔抗人多克隆抗體修飾質控帶；
17、優選地，所述單克隆抗體或適配體修飾帶和兔抗人多克隆抗體修飾質控帶均為親水性虹吸膜，并用包埋或共價鍵交聯法固定抗體或適配體。
18、根據本專利技術的另一方面，提供一種使用上述電發光膠體金檢測試紙條進行檢測的方法，包括以下步驟：取待測樣本在緩沖液中稀釋，充分混合后，滴加在樣品墊上，基于虹吸作用發生層析，帶動膠體金區域遷移，然后將導電板連接至電化學設備，施加電壓后進行檢測。
19、在本專利技術的一些實施方式中，所述電化學設備施加的電壓為0~1.0?v。
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1.一種電發光膠體金檢測試紙條，其特征在于，
2.根據權利要求1所述的電發光膠體金檢測試紙條，其特征在于，所述導電板遠離所述樣品墊的一端從所述親水性虹吸膜與所述基板之間延伸出設定長度。
3.根據權利要求1所述的電發光膠體金檢測試紙條，其特征在于，所述含有多抗與聯吡啶釕修飾膠體金的納米金膠條帶的制備包括以下步驟：
4.根據權利要求1所述的電發光膠體金檢測試紙條，其特征在于，所述導電板的制備包括以下步驟：
5.根據權利要求4所述的電發光膠體金檢測試紙條，其特征在于，所述電沉積反應采用計時電流法或循環伏安法；
6.根據權利要求4所述的電發光膠體金檢測試紙條，其特征在于，所述電沉積反應的電沉積溶液為磷酸緩沖液。
7.根據權利要求4所述的電發光膠體金檢測試紙條，其特征在于，所述塑料模具為三孔結構，所述三孔結構的中間孔洞為工作電極位置，所述三孔結構的左右兩側孔洞分別為對電極和參比電極位置。
8.根據權利要求1所述的電發光膠體金檢測試紙條，其特征在于，所述檢測帶為單克隆抗體或適配體修飾帶；所述質控帶為兔抗人多克
9.一種使用如權利要求1-8任一項所述電發光膠體金檢測試紙條進行檢測的方法，其特征在于，包括以下步驟：
10.?根據權利要求9所述的方法，其特征在于，所述電化學設備施加的電壓為0~1.0?V。
...【技術特征摘要】
1.一種電發光膠體金檢測試紙條，其特征在于，
2.根據權利要求1所述的電發光膠體金檢測試紙條，其特征在于，所述導電板遠離所述樣品墊的一端從所述親水性虹吸膜與所述基板之間延伸出設定長度。
3.根據權利要求1所述的電發光膠體金檢測試紙條，其特征在于，所述含有多抗與聯吡啶釕修飾膠體金的納米金膠條帶的制備包括以下步驟：
4.根據權利要求1所述的電發光膠體金檢測試紙條，其特征在于，所述導電板的制備包括以下步驟：
5.根據權利要求4所述的電發光膠體金檢測試紙條，其特征在于，所述電沉積反應采用計時電流法或循環伏安法；
6.根據權利要求4所述的電發光膠體金檢測試紙條...
【專利技術屬性】
技術研發人員：袁培新，馮九菊，宋沛，何一平，張國旗，王愛軍，
申請(專利權)人：浙江師范大學，
類型：發明
國別省市：
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