【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
本申請(qǐng)涉及智能醫(yī)療領(lǐng)域，具體涉及一種基于內(nèi)皮細(xì)胞檢測(cè)補(bǔ)體系統(tǒng)反應(yīng)程度的方法、設(shè)備、程序產(chǎn)品及計(jì)算機(jī)存儲(chǔ)介質(zhì)。
技術(shù)介紹
1、補(bǔ)體反應(yīng)是一種酶級(jí)聯(lián)反應(yīng)，是血液和細(xì)胞表面蛋白質(zhì)的集合。補(bǔ)體系統(tǒng)由30種不同的蛋白質(zhì)組成，包括血清蛋白、漿膜蛋白和細(xì)胞膜受體，這些蛋白質(zhì)在先天免疫系統(tǒng)中扮演重要角色。補(bǔ)體系統(tǒng)具有四大功能，包括溶解感染性生物體、激活炎癥、調(diào)理和免疫清除。補(bǔ)體被認(rèn)為在先天免疫(非特異性免疫，innate?immune?system)中發(fā)揮主要作用，即針對(duì)入侵的病原體產(chǎn)生快速且強(qiáng)大的反應(yīng)。然而，近期的研究表明，補(bǔ)體在t細(xì)胞和b細(xì)胞參與的適應(yīng)性免疫(adaptive?immune?systems)中也發(fā)揮著重要作用。補(bǔ)體系統(tǒng)不但參與先天免疫和適應(yīng)性免疫，還與組織再生、腫瘤生長(zhǎng)等有關(guān)。其中，補(bǔ)體激活途徑的途徑中：c5b可與c6穩(wěn)定結(jié)合為c5b6，后者自發(fā)與c7結(jié)合成c5b-7，該復(fù)合物中的c7初步插入靶細(xì)胞膜脂質(zhì)雙分子層，繼而c8于插入膜上的c5b-7高親和力結(jié)合，形成穩(wěn)定的、深插入細(xì)胞膜的c5b-8，該復(fù)合物可c9分子結(jié)合為c5b-9，此即膜攻擊復(fù)合物(mac)。可以直接攻擊細(xì)胞膜，導(dǎo)致細(xì)胞崩解，從而導(dǎo)致?lián)p傷。同時(shí)補(bǔ)體通路上可以釋放出c3a、c5a等炎癥介質(zhì)，可以介導(dǎo)炎癥。補(bǔ)體的過度激活或者失調(diào)，可以導(dǎo)致組織的損傷和炎癥。如補(bǔ)體過度激活發(fā)生在循環(huán)中，可以攻擊紅細(xì)胞，患者可以表現(xiàn)為低補(bǔ)體血癥，表現(xiàn)為陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥；如果補(bǔ)體的過度激活發(fā)生組織局部，如補(bǔ)體終末產(chǎn)物攻擊內(nèi)皮細(xì)胞，就會(huì)導(dǎo)致相應(yīng)器官損傷，如血栓性微血管病(tma)，
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
1、針對(duì)上述問題，在診斷補(bǔ)體相關(guān)疾病，已經(jīng)尋找用藥指征時(shí)，應(yīng)針對(duì)上述補(bǔ)體局部活化的程度，而非整個(gè)補(bǔ)體系統(tǒng)，于是本專利技術(shù)提出一種基于內(nèi)皮細(xì)胞檢測(cè)補(bǔ)體系統(tǒng)反應(yīng)程度的方法，包括：
2、s1:獲取檢測(cè)對(duì)象的血清；
3、s2:獲取人內(nèi)皮細(xì)胞并將檢測(cè)對(duì)象的血清、人內(nèi)皮細(xì)胞加至人內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基中培養(yǎng)得到培養(yǎng)后的內(nèi)皮細(xì)胞；
4、s3:對(duì)所述培養(yǎng)后的內(nèi)皮細(xì)胞中加入一抗進(jìn)行孵育得到一抗孵育產(chǎn)物，所述一抗為內(nèi)皮細(xì)胞上與補(bǔ)體反應(yīng)相關(guān)的蛋白的一抗；
5、s4:將所述一抗孵育產(chǎn)物中加入二抗進(jìn)行孵育得到二抗孵育產(chǎn)物；
6、s5:所述二抗孵育產(chǎn)物通過流式細(xì)胞儀或者電子顯微鏡檢測(cè)得到熒光強(qiáng)度，基于所述熒光強(qiáng)度得到補(bǔ)體反應(yīng)水平。
7、所述內(nèi)皮細(xì)胞包括下列的一種或幾種：人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞、人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞、人真皮血管內(nèi)皮細(xì)胞。
8、所述補(bǔ)體反應(yīng)相關(guān)的蛋白的一抗包括下列的一種或幾種：c5b-9、c5b-8、c3、c4d、c5a，所述二抗選自與一抗相結(jié)合并被流式細(xì)胞儀檢測(cè)到信號(hào)的二抗，包括下列的一種或幾種：af647-lgg、別藻青蛋-lgg、cy5-lgg。
9、所述s2還包括對(duì)所述內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)4-8代。
10、所述s2還包括添加二磷酸腺苷至人內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基中。
11、本專利技術(shù)的目的在于提供一種基于內(nèi)皮細(xì)胞檢測(cè)補(bǔ)體系統(tǒng)反應(yīng)程度的系統(tǒng)，包括：
12、獲取單元:獲取檢測(cè)對(duì)象的血清；
13、提取單元:獲取人內(nèi)皮細(xì)胞并將檢測(cè)對(duì)象的血清、人內(nèi)皮細(xì)胞加至人內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基中培養(yǎng)得到培養(yǎng)后的內(nèi)皮細(xì)胞；
14、一次孵育單元:對(duì)所述培養(yǎng)后的內(nèi)皮細(xì)胞中加入一抗進(jìn)行孵育得到一抗孵育產(chǎn)物，所述一抗為內(nèi)皮細(xì)胞上與補(bǔ)體反應(yīng)相關(guān)的蛋白的一抗；
15、二次孵育單元:將所述一抗孵育產(chǎn)物中加入二抗進(jìn)行孵育得到二抗孵育產(chǎn)物；
16、檢測(cè)單元:所述二抗孵育產(chǎn)物通過流式細(xì)胞儀或者電子顯微鏡檢測(cè)得到熒光強(qiáng)度，基于所述熒光強(qiáng)度得到補(bǔ)體反應(yīng)水平。
17、本專利技術(shù)的目的在于提供一種計(jì)算機(jī)程序產(chǎn)品，其包括計(jì)算機(jī)程序或指令，所述計(jì)算機(jī)程序或指令被處理器執(zhí)行實(shí)現(xiàn)上述基于內(nèi)皮細(xì)胞檢測(cè)補(bǔ)體系統(tǒng)反應(yīng)程度的方法。
18、本專利技術(shù)的目的在于提供一種計(jì)算機(jī)設(shè)備，包括：
19、存儲(chǔ)器和處理器，所述存儲(chǔ)器用于存儲(chǔ)程序指令；所述處理器用于調(diào)用程序指令，當(dāng)程序指令被執(zhí)行時(shí)實(shí)現(xiàn)上述的基于內(nèi)皮細(xì)胞檢測(cè)補(bǔ)體系統(tǒng)反應(yīng)程度的方法。
20、本專利技術(shù)的目的在于提供一種計(jì)算機(jī)可讀存儲(chǔ)介質(zhì)，其上有計(jì)算機(jī)程序，包括：
21、所述計(jì)算機(jī)程序被處理器執(zhí)行時(shí)實(shí)現(xiàn)上述的基于內(nèi)皮細(xì)胞檢測(cè)補(bǔ)體系統(tǒng)反應(yīng)程度的方法。
22、本專利技術(shù)的目的在于提供一種mdt決策方法，所述方法執(zhí)行實(shí)現(xiàn)上述的基于內(nèi)皮細(xì)胞檢測(cè)補(bǔ)體系統(tǒng)反應(yīng)程度的方法得到內(nèi)皮細(xì)胞中的補(bǔ)體反應(yīng)水平，當(dāng)判定患者補(bǔ)體反應(yīng)水平異常時(shí)，給予待測(cè)者用藥方案中加入推薦抑制補(bǔ)體活化的藥物。
23、所述抑制補(bǔ)體活化的藥物為針對(duì)補(bǔ)體通路活化程度大于正常程度時(shí)進(jìn)行抑制的藥物。
24、進(jìn)一步，當(dāng)判定待測(cè)者c5b-9或者c5b-8補(bǔ)體反應(yīng)水平異常時(shí)，推薦給予待測(cè)者補(bǔ)體抑制劑，所述補(bǔ)體抑制劑包括下列的一種或幾種：c5單抗、b因子抑制劑、c3抑制劑、d因子抑制劑。
25、所述c5單抗包括依庫(kù)珠單抗(eculiumab)、crovalimab、piasky、ravulizumab；所述b因子抑制劑包括iptacopan、ntq5082；所述c3抑制劑包括pegcetagoplan、empaveli；所述d因子抑制劑包括danicopan。
26、本專利技術(shù)的目的在于提供一種計(jì)算機(jī)程序產(chǎn)品，其包括計(jì)算機(jī)程序或指令，所述計(jì)算機(jī)程序或指令被處理器執(zhí)行實(shí)現(xiàn)上述mdt決策的方法。
27、本專利技術(shù)的目的在于提供一種mdt決策設(shè)備，包括：
28、存儲(chǔ)器和處理器，所述存儲(chǔ)器用于存儲(chǔ)程序指令；所述處理器用于調(diào)用程序指令，當(dāng)程序指令被執(zhí)行時(shí)實(shí)現(xiàn)上述的mdt決策方法。
29、本專利技術(shù)的目的在于提供一種計(jì)算機(jī)可讀存儲(chǔ)介質(zhì)，其上有計(jì)算機(jī)程序，包括：
30、所述計(jì)算機(jī)程序被處理器執(zhí)行時(shí)實(shí)現(xiàn)上述的mdt決策方法。
31、本專利技術(shù)的優(yōu)勢(shì)：
32、1.提出一種無創(chuàng)的體外檢測(cè)組織補(bǔ)體反應(yīng)的方法，通過該方法能夠直觀準(zhǔn)確的檢測(cè)患者組織局部是否發(fā)生補(bǔ)體激活，進(jìn)而能夠及時(shí)給予患者進(jìn)行針對(duì)性治療。
33、2.提出mdt決策方法，基于補(bǔ)體反應(yīng)對(duì)患者進(jìn)行分型，并根據(jù)分型結(jié)果給予患者用藥指導(dǎo)，在使用藥物中反復(fù)測(cè)定補(bǔ)體激活反應(yīng)，調(diào)整用藥劑量，避免用藥過量或過少的問題。
34、3.對(duì)于疑似tma腎損傷的患者進(jìn)行補(bǔ)體反應(yīng)檢測(cè)，能夠準(zhǔn)確判斷患者是否發(fā)生血栓性微血管類的血管病變，避免進(jìn)行腎臟穿刺，降低檢查難度，減少患者的檢查痛苦。
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1.一種基于內(nèi)皮細(xì)胞檢測(cè)補(bǔ)體系統(tǒng)反應(yīng)程度的方法，其特征在于，所述方法包括：
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于內(nèi)皮細(xì)胞檢測(cè)補(bǔ)體系統(tǒng)反應(yīng)程度的方法，其特征在于，所述內(nèi)皮細(xì)胞包括下列的一種或幾種：人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞、人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞、人真皮血管內(nèi)皮細(xì)胞。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于內(nèi)皮細(xì)胞檢測(cè)補(bǔ)體系統(tǒng)反應(yīng)程度的方法，其特征在于，所述補(bǔ)體反應(yīng)相關(guān)的蛋白的一抗包括下列的一種或幾種：C5b-9、C5b-8、C3、C4d、C5a，所述二抗選自與一抗相結(jié)合并被流式細(xì)胞儀檢測(cè)到信號(hào)的二抗，包括下列的一種或幾種：AF647-lgG、別藻青蛋-lgG、Cy5-lgG。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于內(nèi)皮細(xì)胞檢測(cè)補(bǔ)體系統(tǒng)反應(yīng)程度的方法，其特征在于，所述S2還包括添加二磷酸腺苷至人內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基。
5.一種MDT決策方法，其特征在于，包括：
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的MDT決策方法，其特征在于，所述抑制補(bǔ)體活化的藥物為針對(duì)補(bǔ)體通路活化程度大于正常程度時(shí)進(jìn)行抑制的藥物；
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的MDT決策方法，其特征在于，所述C5單抗包括依庫(kù)珠
8.一種計(jì)算機(jī)程序產(chǎn)品，其包括計(jì)算機(jī)程序或指令，其特征在于，所述計(jì)算機(jī)程序或指令被處理器執(zhí)行實(shí)現(xiàn)權(quán)利要求1-4任意一項(xiàng)所述的基于內(nèi)皮細(xì)胞檢測(cè)補(bǔ)體系統(tǒng)反應(yīng)程度的方法，或執(zhí)行實(shí)現(xiàn)權(quán)利要求5所述的MDT決策方法。
9.一種計(jì)算機(jī)設(shè)備，包括存儲(chǔ)器、處理器及存儲(chǔ)在存儲(chǔ)器上的計(jì)算機(jī)程序或指令，其特征在于，所述處理器用于調(diào)用計(jì)算機(jī)程序或指令，當(dāng)程序指令被執(zhí)行時(shí)實(shí)現(xiàn)權(quán)利要求1-4任意一項(xiàng)所述的基于內(nèi)皮細(xì)胞檢測(cè)補(bǔ)體系統(tǒng)反應(yīng)程度的方法，或執(zhí)行實(shí)現(xiàn)權(quán)利要求5所述的MDT決策方法。
10.一種計(jì)算機(jī)可讀存儲(chǔ)介質(zhì)，其上存儲(chǔ)有計(jì)算機(jī)程序或指令，其特征在于，所述計(jì)算機(jī)程序被處理器執(zhí)行時(shí)實(shí)現(xiàn)權(quán)利要求1-4任意一項(xiàng)所述的基于內(nèi)皮細(xì)胞檢測(cè)補(bǔ)體系統(tǒng)反應(yīng)程度的方法，或執(zhí)行實(shí)現(xiàn)權(quán)利要求5所述的MDT決策方法。
...【技術(shù)特征摘要】
1.一種基于內(nèi)皮細(xì)胞檢測(cè)補(bǔ)體系統(tǒng)反應(yīng)程度的方法，其特征在于，所述方法包括：
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于內(nèi)皮細(xì)胞檢測(cè)補(bǔ)體系統(tǒng)反應(yīng)程度的方法，其特征在于，所述內(nèi)皮細(xì)胞包括下列的一種或幾種：人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞、人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞、人真皮血管內(nèi)皮細(xì)胞。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于內(nèi)皮細(xì)胞檢測(cè)補(bǔ)體系統(tǒng)反應(yīng)程度的方法，其特征在于，所述補(bǔ)體反應(yīng)相關(guān)的蛋白的一抗包括下列的一種或幾種：c5b-9、c5b-8、c3、c4d、c5a，所述二抗選自與一抗相結(jié)合并被流式細(xì)胞儀檢測(cè)到信號(hào)的二抗，包括下列的一種或幾種：af647-lgg、別藻青蛋-lgg、cy5-lgg。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于內(nèi)皮細(xì)胞檢測(cè)補(bǔ)體系統(tǒng)反應(yīng)程度的方法，其特征在于，所述s2還包括添加二磷酸腺苷至人內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基。
5.一種mdt決策方法，其特征在于，包括：
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的mdt決策方法，其特征在于，所述抑制補(bǔ)體活化的藥物為針對(duì)補(bǔ)體通路活化程度大于正常程度...
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：譚穎，譚萌，趙明輝，
申請(qǐng)(專利權(quán))人：北京大學(xué)第一醫(yī)院北京大學(xué)第一臨床醫(yī)學(xué)院，
類型：發(fā)明
國(guó)別省市：
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