源自桿菌屬微生物的還原劑及其用途制造技術

本發(fā)明專利技術的課題在于提供對食用肉的顯色有效的還原劑及其用途。本發(fā)明專利技術提供一種含有源自桿菌屬微生物的血紅素還原酶的還原劑。優(yōu)選使用枯草芽孢桿菌、解淀粉芽孢桿菌、納豆菌、蘇云金芽孢桿菌或蕈狀芽胞桿菌的菌體粉碎物。

【技術實現(xiàn)步驟摘要】
【國外來華專利技術】
本專利技術涉及源自桿菌屬微生物的還原劑及其用途。本專利技術的還原劑在改善食用肉或食用肉加工品的色調的目的方面特別有用。本申請主張于2010年5月12日申請的日本專利申請第2010-109779號的優(yōu)選權，通過參照引用該專利申請的全部內容。
技術介紹
食用肉的顏色是消費者評價肉質時的重要因素。若為鮮紅色，則判斷是優(yōu)質的食用肉，若為褐色，則被看作是不新鮮等，肉色對消費者對于食用肉的購買意愿、評價造成很大的影響。而且，食用肉的色調反映肉中存在的肌紅蛋白衍生物的比例。若此肌紅蛋白被氧化，則成為高鐵肌紅蛋白，色調變化為褐色，成為使食用肉制品的經(jīng)濟價值顯著下降的主要·原因。為了防止食用肉的褐變，在火腿、香腸等畜肉加工品中，一般使用硝酸鹽、亞硝酸鹽顯色劑。但是，硝酸鹽、亞硝酸鹽由于具有引起高鐵血紅蛋白血癥的急性毒性，所以使用量被限制成以殘存亞硝酸根計成為70ppm以下。另外，亞硝酸被指出與仲胺反應而形成作為致癌性物質的亞硝胺的可能性。因此，從安全性的觀點出發(fā)，進行了替代硝酸鹽、亞硝酸鹽顯色劑的具有顯色效果的物質、顯色方法的探索。例如發(fā)現(xiàn)了通過添加棉子糖而防止褐變的方法(參照專利文獻I)、通過添加金針菇提取物而防止褐變的方法(參照專利文獻2)、利用蔬菜類中含有的成分而顯色的方法(參照專利文獻3)。但是,在專利文獻I的方法或專利文獻2的方法中顯色效果不足，在專利文獻3的方法中利用蔬菜類中含有的硝酸鹽，安全性存在問題。另一方面，還提出了通過將肌紅蛋白中的鐵置換為鋅來形成肌紅蛋白鋅原卟啉IX絡合物而維持食用肉的色調的方法(專利文獻4)、利用亞鐵螯合酶或酵母促進肌紅蛋白鋅原卟啉IX絡合物的生成而保持食用肉的鮮紅色的方法(專利文獻5、6)。在這些方法中，無法作用于已經(jīng)生成的高鐵肌紅蛋白，顯色乃至色調維持效果有限。專利文獻專利文獻I :日本特開2003-18976號公報專利文獻2 日本特開2008-228702號公報專利文獻3 日本特開2009-165445號公報專利文獻4 :日本特開2006-56908號公報專利文獻5 :日本特開2005-87058號公報專利文獻6 :日本特開2006-61016號公報
技術實現(xiàn)思路
本專利技術以提供對食用肉或食用肉加工品的色調改善有效的還原劑及其用途(不使用亞硝酸鹽等顯色劑的色調改善方法等)為課題。本專利技術人為了找出改善食用肉色調的物質而以桿菌屬微生物為中心實施了篩選。篩選的結果確定了產(chǎn)生食用肉顯色效果高的物質的微生物株。進一步進行研究的結果明確了被期待高有用性的該物質對高鐵肌紅蛋白顯示還原活性。即，發(fā)現(xiàn)桿菌屬微生物產(chǎn)生通過高鐵肌紅蛋白還原活性而促進食用肉顯色的物質。該物質是對血紅素顯示還原作用的物質，不限于食用肉的顯色，在血紅素或血紅素蛋白的還原有效乃至必要的其它用途方面也可利用。例如，在還原具有與高鐵肌紅蛋白類似的結構的高鐵血紅蛋白等的目的下可利用該物質。進一步的研究結果判明了源自桿菌屬微生物的上述物質(顯示還原作用的物質)為二氫硫辛酰胺脫氫酶和硝基還原酶。本專利技術是基于上述結果而完成的，其如下所示。 一種還原劑，含有源自桿菌屬微生物的血紅素還原酶。 根據(jù)中記載的還原劑，其特征在于，所述血紅素為高鐵肌紅蛋白的血紅素。根據(jù)中記載的還原劑，其特征在于，所述血紅素為高鐵血紅蛋白的血紅素。根據(jù) 中任一項記載的還原劑，其特征在于，由桿菌屬微生物的菌體粉碎物構成。根據(jù) 中任一項記載的還原劑，其中，所述桿菌屬微生物為選自枯草芽孢桿菌、解淀粉芽孢桿菌、納豆菌、蘇云金芽孢桿菌、及蕈狀芽胞桿菌中的微生物。根據(jù)中記載的還原劑，其中，所述血紅素還原酶為二氫硫辛酰胺脫氫酶或硝基還原酶。根據(jù)中記載的還原劑，其中，作為所述血紅素還原酶，含有二氫硫辛酰胺脫氫酶和硝基還原酶。根據(jù)或中記載的還原劑，其中，所述二氫硫辛酰胺脫氫酶的氨基酸序列含有序列號3的氨基酸序列，所述硝基還原酶的氨基酸序列含有序列號12的氨基酸序列。根據(jù) 的任一項中記載的還原劑，其中，所述二氫硫辛酰胺脫氫酶和所述硝基還原酶為重組蛋白質。 一種色調改善劑，由 中任一項記載的還原劑構成。 一種色調改善劑，是將 中任一項記載的還原劑與顯示將肌紅蛋白的血紅素基中的鐵置換成鋅的作用的物質組合而成的。根據(jù)中記載的色調改善劑，其中，所述物質為亞鐵螯合酶。根據(jù) 中任一項記載的色調改善劑,其中,所述色調改善劑用于改善食用肉或食用肉加工品的色調。 一種食用肉或食用肉加工品用的色調改善劑，含有二氫硫辛酰胺脫氫酶和/或硝基還原酶。根據(jù) 中任一項記載的色調改善劑,其中,所述色調改善劑通過顯色作用、顯色促進作用和/或防褪色作用來改善色調。 一種醫(yī)藥品，其特征在于，含有 中任一項記載的還原劑。根據(jù)中記載的醫(yī)藥品，其中，所述醫(yī)藥品是口服給藥制劑。根據(jù)中記載的醫(yī)藥品，其中，所述醫(yī)藥品是非口服給藥制劑。 一種還原劑的制造方法，所述制造方法包括以下步驟(I)和(2)(I)將產(chǎn)生血紅素還原酶的桿菌屬微生物在產(chǎn)生該酶的條件下培養(yǎng)的步驟；(2)從培養(yǎng)產(chǎn)物回收所述酶的步驟。根據(jù)中記載的制造方法，其中，所述步驟(2)由以下步驟構成(2-1)從培養(yǎng)產(chǎn)物收集菌體的步驟；(2-2)制備菌體粉碎物的步驟。 根據(jù)或中記載的制造方法，其特征在于，所述血紅素為高鐵肌紅蛋白的血紅素。根據(jù)或中記載的制造方法，其特征在于，所述血紅素為高鐵血紅蛋白的血紅素。根據(jù) 中任一項記載的制造方法，其中，所述桿菌屬微生物為選自枯草芽孢桿菌、解淀粉芽孢桿菌、納豆菌、蘇云金芽孢桿菌、及蕈狀芽胞桿菌中的微生物。 一種色調改善方法,其特征在于,使 中任一項記載的色調改善劑作用于食用肉或食用肉加工品。 一種色調改善方法，其特征在于，使選自枯草芽孢桿菌、解淀粉芽孢桿菌、納豆菌、蘇云金芽孢桿菌、及蕈狀芽胞桿菌中的桿菌屬微生物的菌體粉碎物作用于食用肉或食用肉加工品。 一種使用了 中任一項所述的還原劑的預防或治療方法，預防或治療血液循環(huán)障礙、低氧癥或血氧減少狀態(tài)，伴有血液循環(huán)障礙、低氧癥及血氧減少狀態(tài)中的一種以上的病理乃至癥狀的疾病，或由血液循環(huán)障礙、低氧癥及血氧減少狀態(tài)中的一種以上的病理乃至癥狀所引起的疾病。附圖說明示出將桿菌屬菌體粉碎提取物或其加熱處理物添加于豬腿肉凍干粉末中而成的溶液的吸收光譜的圖。示出將桿菌屬菌體粉碎提取物添加于豬腿肉凍干粉末中而成的溶液在保存中的580nm下吸光度(A58tl)經(jīng)時變化的圖。示出桿菌屬菌體粉碎提取物凍干粉末中的高鐵肌紅蛋白還原酶活性的圖。示出高鐵肌紅蛋白還原酶純化過程中的通過DEAE色譜法得到的溶出圖和高鐵肌紅蛋白還原酶活性的圖。示出高鐵肌紅蛋白還原酶純化過程中的通過羥基磷灰石色譜法得到的溶出圖和高鐵肌紅蛋白還原酶活性的圖。示出高鐵肌紅蛋白還原酶純化過程中的通過凝膠過濾色譜法得到的溶出圖和高鐵肌紅蛋白還原酶活性的圖。示出以比活性高的凝膠過濾組分為試樣的SDS-PAGE結果的圖。比較在各純化階段得到的試樣的比活性的圖。示出使用了純化酶(二氫硫辛酰胺脫氫酶DLD)的食用肉顯色試驗結果的圖。對酶量不同的試樣進行比較。示出使用了純化酶(DLD)的食用肉顯色試驗結果的圖。按照NADH的有無進行比較。示出純化酶(DLD)的速率法分析結果(底物飽和曲線)的圖。示出純化酶(DLD)的速率法分析結果(/f標繪)的圖。示出純化酶(DLD本文檔來自技高網(wǎng)...

【技術保護點】

【技術特征摘要】
【國外來華專利技術】...

【專利技術屬性】
技術研發(fā)人員：奧田啟太，山口莊太郎，
申請(專利權)人：天野酶株式會社，
類型：
國別省市：