一種水產養殖益生菌CW9活菌干粉制劑，以體積計的4份發酵液離心后去上清液，加入1份保護劑，將菌泥重新懸浮，噴霧干燥，得到水產養殖益生菌CW9活菌干粉制劑；所述的保護劑按照以下質量比配制：明膠0.1-0.2份，脫脂奶粉20-30份，吐溫-80?1-3份，司班-60?1-3份，水100份。本發明專利技術提供的一種水產養殖益生菌CW9活菌干粉制劑及制備方法，噴霧干燥每千克的成本僅為凍干的1/6；且噴霧干燥粉末運輸成本低；能長期穩定儲存，采用優化的保護劑有效地提高了干粉制劑中益生菌CW9的存活率，可以達到56.5％。且實驗結果表明，貯存6個月之后仍然有20％的存活率。
【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及一種用于水產養殖益生菌CW9的活菌干粉制劑，本專利技術還涉及該干粉制劑的制備方法。
技術介紹
中國專利201010572426. 6，公開號CN 102485884A公開了ー種節桿菌CW9及其用途，該菌可用于提高海水甲殼類幼體的變態率與存活率。對多種甲殼類動物幼體具有益生作用，其生產和儲運方法簡單，使用方法簡便；該益生菌只在甲殼類動物蚤狀一期投放，即可提聞和穩定幼體后期的變態率，從而大幅度提聞苗種廣量?，F有技術中益生菌制劑的制備エ藝較多，但都不適合甲殼類水產養殖動物幼體的使用。例如，有內服的益生菌制劑是固態發酵后単獨或與飼料混合后干燥、粉碎，這樣的產品顆粒太大，對于濾食的甲殼類水產養殖動物幼體，無法取食?；蛘呤嵌喾N益生菌制成片劑潑灑到水體中，又或者更多的是用于調節水質。有的則是將發酵液直接包裝成水劑，或離心后做成濃縮的水劑。無論哪種水劑，都不便于運輸，且保藏周期短，保藏過程死亡率很高并且容易感染雜菌。實驗室規?？梢杂靡杂美鋬龈稍锏姆椒ㄉa菌劑，但凍干菌粉有很多不利，凍干耗時，價格昂貴，冷凍濃縮轉化和儲藏費用高，解凍過程菌種存貨量減少。水產養殖益生菌CW9已于2010年10月8日交中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(CGMCC)保藏，保藏編號為CGMCC NO. 4197。
技術實現思路
本專利技術所要解決的技術問題是提供ー種水產養殖益生菌CW9活菌干粉制劑及制備方法，可以有效提高活菌干粉制劑的存活率。為解決上述技術問題，本專利技術所采用的技術方案是ー種水產養殖益生菌CW9活菌干粉制劑以體積計的4份發酵液離心后去上清液，沉淀的菌泥加入I份保護劑，重新懸浮，噴霧干燥，得到水產養殖益生菌CW9活菌干粉制劑；所述的保護劑按照以下質量比配制明月交O. 1-0. 2份，脫脂奶粉20-30份，吐溫-80ト3份，司班-60ト3份，水100份。優化的方案中，所述的保護劑按照以下質量比配制明膠O. 15份，脫脂奶粉25份，吐溫-80 3份，司班-60 2份，水100份。優化的方案中，所述的保護劑按照以下質量比配制明膠O. I份，脫脂奶粉25份，吐溫-80 2份，司班-60 2份，水100份。優化的方案中，所述的保護劑按照以下質量比配制明膠O. 2份，脫脂奶粉20份，吐溫-80 3份，司班-60 2份，水100份。優化的方案中，所述的保護劑按照以下質量比配制明膠O. I份，脫脂奶粉30份，吐溫-80 3份，司班-60 3份，水100份。4一種制備上述制劑的制備方法，包括以下步驟一、制備發酵液；ニ、制備保護劑，所述的保護劑按照以下質量比配制明月交O. 1-0. 2份，脫脂奶粉20-30份，吐溫-80ト3份，司班-60ト3份，水100份，保護劑的配制方法為攪拌混合；三、以體積計的4份發酵液,7000rpm離心8min后去上清液,沉淀的菌泥加入I份保護劑，重新懸浮；四、噴霧干燥，入口溫度100°C，出口溫度65°C，流量為300_400ml/h，收集噴霧干燥后的干粉菌劑；通過上述步驟，得到水產養殖益生菌CW9活菌干粉制劑。步驟一中，發酵培養基為葡萄糖8g/L，蛋白胨5g/L，酵母膏3g/L，氯化鈉2g/L，pH7. 0,115°C滅菌20min，種子培養基與發酵培養基相同；擴大培養，用隔夜培養的斜面接種250ml搖瓶，內置IOOml種子培養基，37°C，搖床180轉/分鐘，培養23小時；發酵，接種量3%，通氣比I O. 8，攪拌轉速300轉/分鐘，37°C，培養18小時。步驟ニ中，優化的方案為，所述的保護劑按照以下質量比配制明膠O. 15份，脫脂奶粉25份，吐溫-80 3份，司班-60 2份，水100份。干粉制劑活化時，干粉制劑與活化液質量體積比I : 10g/ml，活化液中糖的質量-體積濃度20-60g/L，活化溫度32-42 °C。優化的方案中，干粉制劑活化時，干粉制劑與活化液質量體積比I : 10g/ml，即I克干粉制劑需要10毫升活化液進行活化，活化液中糖的質量-體積濃度為40g/L，活化溫度37。。。一種用于水產養殖益生菌CW9活菌干粉制劑的保護劑按照以下質量比配制明月交O. 1-0. 2份，脫脂奶粉20-30份，吐溫-80ト3份，司班-60ト3份，水100份。本專利技術提供的ー種水產養殖益生菌CW9活菌干粉制劑及制備方法，噴霧干燥每千克的成本僅為凍干的1/6 ;且噴霧干燥粉末運輸成本低；能長期穩定儲存，采用優化的保護劑有效地提高了干粉制劑中益生菌CW9的存活率，可以達到56. 5%。且實驗結果表明，貯存6個月之后仍然有20%的存活率。附圖說明下面結合附圖和實施例對本專利技術作進ー步說明圖I為本專利技術產品的貯存效果曲線圖。具體實施方式實施例I : ー種水產養殖益生菌CW9活菌干粉制劑，以體積計的4份發酵液離心后去上清液，沉淀的菌泥加入I份保護劑，重新懸浮，噴霧干燥，得到水產養殖益生菌CW9活菌干粉制劑；所述的保護劑按照以下質量比配制明月交O. 1-0. 2份，脫脂奶粉20-30份，吐溫-80ト3份，司班-60ト3份，水100份。作為對比，試驗選用了較多的保護劑進行篩選，選用的保護劑有甘油(4%，6%，8% )、海藻糖(3%，5%，7% )、脫脂奶粉(10%，15%，20%，25%，30% )、吐溫-80 (O. 5%,2%, 3. 5%)、蔗糖(5%，10%，15%)、司班-60 (O. 5%, 2%, 3. 5%)、L_谷氨酸鈉(1%，2%，3% )、明膠)(以上保護劑都是質量分數)。取400ml發酵液，7000rpm離心8min后去上清液，加入IOOml保護劑水溶液將菌泥重新懸浮，取IOml于無菌試管中，65°C水浴保溫30s，測活菌數，計算存活率。發酵液濃度為5X 109cfu/ml，保溫前總菌數2. OX IO12個。以10_7平板計數菌落，計數按5%的誤差計算，具體數據見表I。表I單因素保護劑保溫實驗本文檔來自技高網...
【技術保護點】
一種水產養殖益生菌CW9活菌干粉制劑，其特征是：以體積計的4份發酵液離心后去上清液，沉淀的菌泥加入1份保護劑，重新懸浮，噴霧干燥，得到水產養殖益生菌CW9活菌干粉制劑；所述的保護劑按照以下質量比配制：明膠0.1？0.2份，脫脂奶粉20？30份，吐溫？80？1？3份，司班？60？1？3份，水100份。
【技術特征摘要】
1.ー種水產養殖益生菌CW9活菌干粉制劑，其特征是 以體積計的4份發酵液離心后去上清液，沉淀的菌泥加入I份保護劑，重新懸浮，噴霧干燥，得到水產養殖益生菌CW9活菌干粉制劑； 所述的保護劑按照以下質量比配制 明膠O. 1-0. 2份，脫脂奶粉20-30份，吐溫-80 1-3份，司班-60 1-3份，水100份。2.根據權利要求I所述的ー種水產養殖益生菌CW9活菌干粉制劑，其特征是優化的方案中，所述的保護劑按照以下質量比配制 明膠O. 15份，脫脂奶粉25份，吐溫-80 3份，司班-60 2份，水100份。3.根據權利要求I所述的ー種水產養殖益生菌CW9活菌干粉制劑，其特征是優化的方案中，所述的保護劑按照以下質量比配制 明膠O. I份，脫脂奶粉25份，吐溫-80 2份，司班-60 2份，水100份。4.根據權利要求I所述的ー種水產養殖益生菌CW9活菌干粉制劑，其特征是優化的方案中，所述的保護劑按照以下質量比配制 明膠O. 2份，脫脂奶粉20份，吐溫-80 3份，司班-60 2份，水100份。5.根據權利要求I所述的ー種水產養殖益生菌CW9活菌干粉制劑，其特征是優化的方案中，所述的保護劑按照以下質量比配制 明膠O. 15份，脫脂奶粉25份，吐溫-80 3份，司班-60 I份，水100份。6.ー種制備權利要求1-5任ー項所述制劑的制備方法，其特征是包括以下步驟 一、制備發酵液； ニ、制備保護劑，所述的保護劑按照以下質量比配制 明膠O. 1-0. 2份，脫脂奶粉20-3...
【專利技術屬性】
技術研發人員：朱明，夏振強，
申請(專利權)人：淮海工學院，
類型：發明
國別省市：
還沒有人留言評論。發表了對其他瀏覽者有用的留言會獲得科技券。