一種體外細胞共培養裝置制造方法及圖紙

本實用新型專利技術公開了一種體外細胞共培養裝置，包括培養皿，其特征在于，所述培養皿上表面具有至少一個培養孔，培養孔內采用縱橫設置的半透膜分隔成為若干大小相同的培養區間，所述半透膜為孔徑大小3-8?m的聚碳酸酯膜。還包括分支滴管系統，所述分支滴管系統設置在培養皿上方，分支滴管系統包括位于上方的總管、位于下方的若干分管和連接于兩者之間的過渡部分，所述若干分管對應位于培養皿的各培養區間上方，所述過渡部分內具有連通于總管和各分管之間的通道且通道內設置有親水性材料。本實用新型專利技術具有培養液交流更充分，可以實現多個細胞共培養，細胞換液更加方便的優點。（*該技術在2022年保護過期，可自由使用*）

【技術實現步驟摘要】

本技術屬于體外細胞培養領域，具體涉及一種體外細胞共培養裝置。
技術介紹
體外細胞共培養(cell co-culture):是將兩種細胞(可以來自同一種組織，也可以來自不同的組織)混合共同培養，從而使其中一種細胞的形態和功能穩定表達，并維持較長時間。該技術能模擬體內生成的微環境，便于更好地觀察細胞與細胞、細胞與培養環境之間的相互作用以及探討藥物的作用機制和可能作用的靶點，填補了單層細胞培養和整體動物實驗的鴻溝。體外細胞共培養，主要通過兩種方法建立直接共培養體系和間接共培養體系。直·接共培養體系，是將2種或2種以上的細胞同時接種于同一培養體系中，不同類型的細胞直接接觸，由于不同的細胞生長在同一細胞容器中，無法分離各種細胞用于下一步研究，限制了其應用。間接共培養體系，即將2種或2種以上的細胞分別接種于不同的載體上，然后將不同的載體置于同一培養環境中，使不同種類的細胞共處于同一種培養體系中而不直接接觸，可以分別收取不同種類的細胞用于下一步研究，彌補了直接共培養體系的不足。本實驗新型主要是基于第二種方式設計一種合理方便的細胞共培養裝置。目前已有商品化的用于間接共培養的共培養體系，如美國康寧(corning)公司生產各種規格的共培養體系(又稱transwell培養皿),而美國millipore公司則生產可適用于國內外各家培養皿生產公司的懸掛式小室，組裝成為共培養體系，這些商品化的共培養體系操作簡單，目前在研究中得到廣泛應用。其基本方法是設置一類有通透性的杯狀裝置，杯子底層放一張有通透性的膜，一般常用的是聚碳酸酯膜，孔徑大小有O. I 12. OMm.將Transwell小室放入培養板中，細胞A種在上室內，下層種植細胞B，其培養液中的成分可以影響到上室內的細胞，從而可以研究細胞B分泌或代謝產生的物質對細胞A的影響。但這種現有共培養體系存在以下不足1)培養小室僅底面有膜，允許進入的下層細胞培養液有限，不利于上下兩層細胞的信號分子充分交流；2)培養小室數量多，對單獨的培養小室進行細胞換液時操作不方便，工作量大；3)只能對兩種細胞進行共培養，不能共培養多種細胞。
技術實現思路
針對上述問題和不足，本技術所要解決的技術問題是怎樣提供一種培養液交流更充分，可以實現多個細胞共培養，細胞換液更加方便的體外細胞共培養裝置。為了解決上述問題，本技術采用了以下的技術方案。一種體外細胞共培養裝置，包括培養皿，其特征在于，所述培養皿上表面具有至少一個培養孔，培養孔內采用縱橫設置的半透膜分隔成為若干大小相同的培養區間，所述半透膜為孔徑大小3-8Mm的聚碳酸酯膜。本裝置中，采用了孔徑大小的聚碳酸酯膜作為半透膜，該膜能夠允許細胞的分泌產物通過，阻止細胞通過。本裝置用于共培養細胞時，可以指定不相鄰的培養區間培養以一種細胞，指定其他區間培養另一種或幾種細胞，這樣就增加了不同細胞的培養液的交換接觸面積，增加信號分子交流，使得交流更充分。作為優化，還包括分支滴管系統，所述分支滴管系統設置在培養皿上方，分支滴管系統包括位于上方的總管、位于下方的若干分管和連接于兩者之間的過渡部分，所述若干分管對應位于培養皿的各培養區間上方，所述過渡部分內具有連通于總管和各分管之間的通道且通道內設置有親水性材料。分支滴管系統在使用時，將總管上端連接膠皮套進行吸液，再連接換液槍的槍頭可進行換液。分管的數目和位置可以進一步根據該種細胞在分塊培養皿上接種的位置確定，以方便同種細胞同時換液。同時，過渡部分設置了親水性材料，可以使得總管流下的液體能均勻流到各分管，以保證添加培養液時液體均勻到達各培養區間。 本裝置的培養孔內具有多個相鄰的培養區間，故使用時，也可共培養多種細胞。由于每個培養孔上每個培養區間與周圍的多個培養區間有細胞液交流，若在其周圍接種多種細胞，就可以研究多種細胞的共同作用對某種細胞的影響。綜上所述，本技術具有以下優點1)不同細胞的培養液接觸面積比現有裝置提高80%，保證了共培養的細胞充分交流；2)用配套的分支滴管為細胞換液，減少了換液的工作量，十分方便，不易污染；3)不僅可以共培養兩種細胞，也可根據需要進行多種細胞的共培養。說明書附圖圖I為本技術培養皿部分具體實施時的結構示意圖。圖2為本技術分支滴管系統部分具體實施時的結構示意圖。具體實施方式以下結合附圖和具體實施方式對本專利技術做進一步說明。具體實施時，如圖I和圖2所示，一種體外細胞共培養裝置，包括培養皿1，所述培養皿I上表面具有至少一個培養孔2,培養孔2內米用縱橫設置的半透膜3分隔成為若干大小相同的培養區間4，所述半透膜3為孔徑大小3-8Mm的聚碳酸酯膜。具體實施時，本裝置還包括分支滴管系統，所述分支滴管系統設置在培養皿I上方，分支滴管系統包括位于上方的總管5、位于下方的若干分管6和連接于兩者之間的過渡部分7，所述若干分管6對應位于培養皿的各培養區間上方，所述過渡部分7內具有連通于總管和各分管之間的通道且通道內設置有親水性材料。下面以共培養兩種細胞(骨髓間充質干細胞、成骨細胞)為例，對本裝置使用方式做進一步說明共培養裝置的培養皿設計為含6個邊長為39cm的正方形孔為培養孔，每個正方形孔用半透膜隔成3X3的培養區間，所用膜為聚碳酸酯膜，孔徑3 。設計兩種分支滴管分別用于骨髓間充質干細胞和成骨細胞換液，分管位置與兩種細胞的培養區間對應。本共培養實驗為了研究成骨細胞分泌的細胞因子對骨髓間充質干細胞的影響，以下對這兩種細胞的共培養進行說明。首先同時對兩種細胞單獨培養，各傳代3 4次后，接種到上述分塊培養皿上，并使相鄰的培養區間接種不同種細胞。每隔一天為細胞換液，骨髓間充質干細胞和成骨細胞可以分別采用單獨設計的分支滴管換液。用分支滴管吸取細胞廢液時，先將其上部的總管連上膠頭，再將分管伸入對應的培養區間吸取；滴加緩沖液或新鮮培養液時，則先用槍吸取緩沖液或培養液，再連接到干凈的分支滴管總管上滴加。由于分隔膜的存在，兩種細胞不能直接接觸，但培養液可以相互交流，故可以研究排除直接接觸外成骨細胞對骨髓間充質干細胞的影響。培養一段時間后，觀察骨髓間充質干細胞的生長情況，與單獨培養時比較，分析結果。·本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種體外細胞共培養裝置，包括培養皿，其特征在于，所述培養皿上表面具有至少一個培養孔，培養孔內采用縱橫設置的半透膜分隔成為若干大小相同的培養區間，所述半透膜為孔徑大小3?8μm的聚碳酸酯膜。

【技術特征摘要】
1.一種體外細胞共培養裝置，包括培養皿，其特征在于，所述培養皿上表面具有至少一個培養孔，培養孔內采用縱橫設置的半透膜分隔成為若干大小相同的培養區間，所述半透膜為孔徑大小3-8Mffl的聚碳酸酯膜。2.如權利要求I所述的體外細胞共培養裝置，其特征在于...

【專利技術屬性】
技術研發人員：楊元凱，芮珍梅，
申請(專利權)人：重慶大學，
類型：實用新型
國別省市：