少棘蜈蚣多肽毒素mu-SLPTX-Ssm6a及其基因和應用制造技術

本發明專利技術涉及一種少棘蜈蚣多肽毒素mu-SLPTX-Ssm6a及其基因和應用，屬于生物醫學技術領域。少棘蜈蚣多肽毒素mu-SLPTX-Ssm6a，由SEQ?ID?NO:1所示的氨基酸序列組成。編碼少棘蜈蚣多肽毒素mu-SLPTX-Ssm6a的基因，由SEQ?ID?NO:1所示的核苷酸序列組成。少棘蜈蚣多肽毒素mu-SLPTX-Ssm6a是一種鈉通道抑制劑，在制備鎮痛藥物中的應用。本發明專利技術的少棘蜈蚣多肽毒素mu-SLPTX-Ssm6a，對大鼠背根神經節上的鈉離子通道電流有非常顯著的抑制作用，是一種鈉通道抑制劑；該毒素能夠選擇性的作用鈉離子通道亞型Nav1.7，小鼠的鎮痛模型表明該多肽具有良好的鎮痛效果，能夠在制備鎮痛藥物中應用。

【技術實現步驟摘要】

本專利技術涉及一種少棘蜈蚣多肽毒素mu-SLPTX-Ssm6a及其基因和應用，屬于生物醫學

技術介紹
電壓門控鈉通道廣泛分布于肌肉、神經元、腺體、心肌的可興奮性組織中，是一種重要的跨膜結構蛋白，其活動與細胞的興奮、收縮、分泌和突觸傳遞等特異性功能密切相關。鈉通道亞型一個引人注目的重要功能就是與傷害性感受傳遞、神經性疼痛的過程有關。 除河豚毒素不敏感型鈉通道Navl. 8和I. 9是這一過程重要參與者外，Navl. 7也是其中關鍵因素之一。在小直徑外周感覺神經元上，Navl. 7能設定Navl. 8和Navl. 9激活開放的閾值。在致炎疼痛模式動物中，發現Navl. 7表達水平被明顯上調。與紅斑狼瘡相關的Navl. 7 突變體激活被易化，與陣發性極端疼痛障礙相關的Navl. 7突變體的失活時間被延長。特別是,當Navl. 7不能產生功能時,患者會失去感受痛覺的能力，但對溫覺、壓覺等其它功能表現正常。因此，針對鈉通道的特異阻斷劑具有十分重要的鎮痛藥物的應用前景。蜈蚣是一種傳統中藥，性溫，味辛，有毒。具有息風鎮痙、攻毒散結、通絡止痛之功能。蜈蚣毒腺中含有豐富的多肽成分，目前已經證實了這些多肽成分多為神經毒素。多肽能夠選擇性的抑制鈉通道，鉀通道或是鈣離子通道，因此蜈蚣毒液中的成分具有廣泛的應用前途，如開發成為鎮痛藥物、及治療自身免疫疾病藥物。
技術實現思路
本專利技術的目的在于提供一種少棘蜈蚣多肽毒素mu-SLPTX_Ssm6a及其基因和應用。本專利技術提供的少棘蜈蚣多肽毒素mu-SLPTX_Ssm6a，是從少棘蜈蚣粗毒中通過分子篩和反向高效液相色譜分離純化得到，其氨基酸序列(SEQ ID NO: I)為ADNKCENSLRREIACG QCRDKVKTDGYFYECCTSDSTFKKCQDLLH,該多肽包括46個氨基酸殘基分子量為5318. 97，等電點為6. 76，分子內含有三對二硫鍵排列方式為C1-C5、C2-C6和C3-C4。少棘蜈蚣多肽毒素mu-SLPTX_Ssm6a的基因克隆包括少棘蜈蚣毒腺總RNA提取，mRNA純化，mRNA反轉錄及cDNA文庫構建，設計引物，利用PCR方法篩選少棘蜈蚣鈣離子通道激活劑多肽基因。擴增引物長度為17個核苷酸，其序列為5 ’ -GCGAAAAATGGAAATCT-3 ’，PCR另一擴增引物為CL0NTECH公司 SMART TM cDNA Library Construction Kit 中的 3’ PCR Primer 引物，其序列為 5 ' ATTCTACAGGCCGAGGCGGCCGACATG 3丨。所獲陽性單克隆進行基因核苷酸序列測定。基因測序結果表明編碼少棘蜈蚣鈣離子通道激活劑的基因(SEQ ID N0:2)由426 個核苷酸組成，自5’端至3’端序列基因序列包括了信號肽、前體肽和成熟肽，其中下劃線部分為成熟肽。本文檔來自技高網...

【技術保護點】
少棘蜈蚣多肽毒素mu?SLPTX?Ssm6a，其特征在于由SEQ?ID?NO:1所示的氨基酸序列組成。

【技術特征摘要】
1.少棘蜈蚣多肽毒素mu-SLPTX-Ssm6a，其特征在于由SEQID NO: I所示的氨基酸序列組成。2.編碼少棘蜈蚣多肽毒素mu-SLPTX-Ssm6a的基因...

【專利技術屬性】
技術研發人員：賴仞，容明強，楊仕隆，肖瑤，康迪，
申請(專利權)人：中國科學院昆明動物研究所，
類型：發明
國別省市：