本發明專利技術提供一種細胞培養容器，其能夠防止來自細胞培養空間外的含有微生物的粒子的侵入和防止來自細胞培養空間的漏液，從而能夠安全、安心地制作再生組織。本發明專利技術的細胞培養容器是安裝于細胞培養裝置并保持和培養細胞的細胞培養容器，其特征在于，具備：保持培養液的培養液保持部；用于供給、排出上述培養液的突起結構部；以及從上述突起結構部連通至上述培養液保持部的培養液流路。
【技術實現步驟摘要】
【國外來華專利技術】
本專利技術涉及細胞培養容器和使用該細胞培養容器的細胞培養裝置。
技術介紹
在使用自身的細胞或他人的細胞來進行疾病的治療的再生醫療中，通常將從生命體采集的細胞進行培養使細胞的數量增加、或者以適當的形狀使其形成組織后用于治療。 關于用于治療的細胞的培養，需要在稱為細胞加工設施(Cell Processing Center :CPC)的細胞培養用潔凈室中依據GMP (Good Manufacturing Practice :生產質量管理規范)來進行。這里的技術問題在于由于細胞培養是通過技術人員的手進行的，因此制備一名患者用的細胞都要花費很多的勞力和成本；以及存在由手動操作引起的生物學污染的風險。作為解決這些技術問題的手段，開發出了在封閉體系中將細胞培養工序自動化的裝置。該裝置通過使用無需打開和關閉培養容器的蓋子的操作的封閉體系培養容器，實現了細胞培養工序的自動化和生物學污染風險的降低。另外，對于細胞來說，有在增殖過程中需要稱為飼養細胞的營養細胞的細胞種和不需要營養細胞的細胞種。再生醫療中受到矚目的ES (Embryonic Stem :胚胎干)細胞、 iPS (Induced Pluripotent Stem :誘導多功能干)細胞及皮膚上皮細胞、角膜上皮細胞、口腔粘膜上皮細胞等細胞種通常需要飼養細胞。在將培養后的細胞用于治療的情況下，飼養細胞和用于治療的細胞優選以分離的狀態進行培養。即，優選在具有雙層培養層的細胞培養容器中進行細胞培養。然而，迄今為止所開發的封閉體系的細胞培養裝置是對應于培養層為單層的細胞培養容器的裝置構成，因此難以進行雙層培養。作為解決該技術問題的手段，提出了專利文獻1、2中所示的培養裝置。如果是這樣的裝置構成，則通過使用例如專利文獻3、4中所示的具有雙層培養層的細胞培養容器， 即可將ES細胞、iPS細胞、皮膚上皮細胞、角膜上皮細胞、口腔粘膜上皮細胞等細胞種在封閉體系內進行自動培養。現有技術文獻專利文獻專利文獻I :日本特開2006-149237號公報專利文獻2 :日本特開2008-271915號公報專利文獻3 :日本特開2008-271912號公報專利文獻4 :日本特開2008-271911號公報
技術實現思路
專利技術要解決的技術問題但是，當使用專利文獻3、4中所示的具有雙層培養層的細胞培養容器進行自動培養時，存在以下所述的技術問題。在使用專利文獻3中記載的封閉體系培養容器來自動地進行送廢液的情況下，例如在專利文獻1、2中記載了下述方法將裝置接頭處具備的培養液供給機構與細胞培養容器具備的彈性構件連接來進行培養液的送廢液(參照專利文獻I的權利要求I、專利文獻2 的權利要求I)。在這些方法中存在以下技術問題從因送廢液管通過彈性構件的狹縫而產生的通氣口發生漏液，經由通氣口混入來自細胞培養空間外的含有微生物的粒子。另外，用專利文獻3中記載的封閉體系培養容器進行培養后，需要進行下述操作 從培養裝置取出細胞培養容器，在即將使用細胞前將細胞培養容器內的培養液排出至安全柜內來回收細胞。要從細胞培養容器排出培養液，需要向設置在細胞培養容器的彈性構件中通過手工作業來插入某種配管。由于通過這樣的手工作業進行操作，因此存在生物學污染的危險性提高的技術問題。本專利技術是鑒于上述問題而完成的，其目的在于提供解決這些技術問題的細胞培養容器和利用了該細胞培養容器的細胞培養裝置。用于解決技術問題的手段實現上述目的的本專利技術的細胞培養容器提供下述構成的細胞培養容器其是安裝于細胞培養裝置且保持和培養細胞的細胞培養容器，其具備保持培養液的培養液保持部； 用于供給、排出培養液的突起結構部；以及從突起結構部連通至培養液保持部的培養液流路。另外，還提供下述構成的細胞培養裝置其是在細胞培養容器內培養細胞的細胞培養裝置，其具備保持細胞培養容器的培養臺；用于保管培養液的培養液保管部；用于蓄積廢液的廢液收納部；用于將培養液從培養液保管部供至細胞培養容器的送液管；以及從細胞培養容器回收廢液并將廢液送至廢液收納部的廢液管，細胞培養容器具備保持培養液的培養液保持部；用于供給、排出培養液的突起結構部；以及從突起結構部連通至培養液保持部的培養液流路，且突起結構部與送液管和廢液管的一端相連接。專利技術效果根據本專利技術的細胞培養容器，能夠在全封閉體系內自動培養細胞。通過在全封閉體系內進行培養，能夠抑制來自細胞培養空間外的含有微生物的粒子的侵入，從而能夠安全、安心地實施細胞培養。另外，在細胞培養結束后從細胞培養容器排出培養液時，也能夠抑制來自細胞培養空間外的含有微生物的粒子的侵入，從而能夠安全地回收培養后的細胞。附圖說明圖I是表不第I實施例的細胞培養容器的圖。圖2是表示第I實施例的細胞培養容器與管連接后的狀態的圖。圖3是表示第I實施例的細胞培養容器的各種突起結構的圖。圖4是表示第I實施例的具有細胞培養容器的細胞培養裝置的圖。圖5是表示第I實施例的細胞培養結束后解除細胞培養裝置與細胞培養容器的連接的方法的圖。圖6是表不第I實施例的從細胞培養容器排出培養液的方法的圖。圖7是表示第I實施例的從細胞培養容器回收再生組織的順序的圖。圖8是表示第I實施例的熔敷于細胞培養容器的透氣膜的形狀的圖。圖9是表示第I實施例的變形例的單層型細胞培養容器的一個例子的圖。圖10是表示第I實施例的變形例的單層型細胞培養容器的另一個例子的圖。圖11是表示第I實施例的變形例的細胞培養容器中突起結構的位置的另一個例子的圖。圖12是表示第I實施例的具體例I中制得的細胞培養容器框體的外觀的圖。圖13是表示第I實施例的具體例I中將透氣膜等熔敷在制得的細胞培養容器框體上進行密封從而保持有培養液的狀態的外觀的圖。圖14是表示第I實施例的具體例I和比較例I中的相位差顯微鏡圖像和剝離回收得到的細胞薄片的外觀的圖。圖15是表示第I實施例的具體例I和比較例I中的角膜上皮組織所含的細胞數的圖。圖16是表示第I實施例的具體例I和比較例I中的角膜上皮組織切片的蘇木精-伊紅(HE)染色圖像的圖。圖17是表示第I實施例的具體例I和比較例I中的角膜上皮組織切片的免疫組織染色圖像的圖。圖18是表示第I實施例的具體例2和比較例2中的剝離回收得到的細胞薄片的外觀的圖。圖19是表示第I實施例的具體例2和比較例2中的角膜上皮組織切片的蘇木精-伊紅(HE)染色圖像和免疫組織染色圖像的圖。圖20是表示第I實施例的具體例2和比較例2中的角膜上皮組織切片的免疫組織染色圖像和P63陽性細胞率的圖。圖21是表示第I實施例的具體例2和比較例2中的菌落檢出圖像和菌落形成率的圖。圖22是表示第2實施例的細胞培養容器的剖面的圖。圖23是表示第2實施例的細胞培養容器的(a)立體及(b)剖面的圖。圖24是表示第2實施例的細胞培養容器的(a)上部及(b)傾斜照片的圖。圖25是表示第3實施例的細胞培養容器的剖面的圖。具體實施方式以下參照附圖對本專利技術的各種實施例進行說明。但是，這些實施例只不過是用于實現本專利技術的一個例子，并不限定本專利技術的技術范圍。另外，對于各圖中共同的構成賦予相同的參照編號。另外，在本說明書中，有時將培養液稱為培養基。實施例I<細胞培養容器的結構>圖I是表示第I實施例中的細胞培養容器的結構的一個例子的圖。圖I (a)是俯視圖，(b)是其A本文檔來自技高網...
【技術保護點】
【技術特征摘要】
【國外來華專利技術】...
【專利技術屬性】
技術研發人員：中島亮太，守谷騰，小林豐茂，松岡志津，野崎貴之，森圭祐，
申請(專利權)人：株式會社日立制作所，
類型：
國別省市：
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