以黃皮屬植物中的咔唑生物堿為抗腫瘤活性成分的藥物組合物及其制備方法與應用技術

以咔唑生物堿clausine?D（1）、6-methoxyheptaphylline（2）、mafaicheenamine?C（3）或claulansine?G（4）為活性成分的藥物組合物。它們的制備方法，它們在制備腫瘤細胞生長抑制劑中的應用，以及在制備抗腫瘤藥物中的應用。

【技術實現步驟摘要】

本專利技術屬于藥物
，具體地，涉及以黃皮屬植物中咔唑生物堿為活性成分的藥物組合物，其制備方法，其作為腫瘤細胞生長抑制劑，其在制備抗腫瘤藥物中的應用。
技術介紹
當今世界，腫瘤嚴重威脅著人類的健康和生命，其死亡率僅次于心血管疾病而位居第二，成為當今人類醫學界一大難題。據世界衛生組織最近發表的報告，在28個工業化國家內，男性癌癥死亡率上升55%，女性上升40%，其中胃癌居首位，其他依次為食道癌、肝癌、子宮頸癌和腸癌等。隨著分子腫瘤學的發展，人們發現細胞內促增殖系統成分的過度表達與抑增殖系統成分的缺失均可引起細胞增殖失控而導致癌變。隨著生命科學研究的飛速 進展，惡性腫瘤細胞內的信號轉導、細胞周期的調控、細胞凋亡的誘導、血管生成以及細胞與胞外基質的相互作用等各種基本過程正在被逐步闡明。目前抗腫瘤藥物的來源主要包括植物、動物、微生物、礦物和海洋生物的代謝產物及其人工合成和人工修飾等產物。根據其作用機理的不同，抗腫瘤藥物又可分為以下幾類(I)細胞毒類抗腫瘤藥；(2)以細胞信號轉導分子為靶點的抗腫瘤藥物；(3)腫瘤新生血管生成抑制藥物；(4)腫瘤細胞誘導分化劑；(5)細胞周期依賴性蛋白激酶抑制劑等。植物來源的天然產物在當今抗腫瘤藥物市場上扮演了重要角色，由于植物來源抗腫瘤藥物的作用機制獨特、抗癌療效顯著，如今在臨床上已經逐步占據了主導地位，達到40%的市場份額，但其資源來源和成本問題仍然困擾著這些藥物的廣泛推廣和使用，如臨床使用的植物來源的生物堿類型的抗腫瘤藥物紫杉醇化3(1；^3161)、喜樹堿(0311^101116(3；pyrrolocarbazole-5-ones and the identification ofCEP-5214 and its dimethylglycine ester prodrug clinical candidate CEP-7055， J.Med. Chem.，2003，46，5375-5388。另外也有一些來自天然的咔唑生物堿類化合物具有良好的抗腫瘤活性，可以作為抗腫瘤藥物的先導物，但截至目前僅限于文獻報道或專利申請，尚未進入臨床試驗階段，例如YH Taufiq-Yap等從小葉臭黃皮中得到的咔唑生物堿類化合物 clausine-TY對腫瘤細胞株 CEM-SS 的 IC5tl 為 8. 2 ii g/mL。參見Tauf iq-Yap YH, etal, A new cytotoxic carbazole alkaloid from Clausena excavate, Nat. Prod. Res.,2007, 21, 810-813。WManeerat等人從黃皮根部分離得到咔唑生物喊mafaicheenamineE 對腫瘤細胞株 MCF-7 的 IC5tl 達到 3.1 u g/mL。參見Maneerat W，et al. Carbazolealkaloids and coumarins from Clausena lansium roots, Phytochem. Lett. , 2012,5, 26-28。T Thongthoom等從Clausena harmandiana根部分離得到的咔唑生物喊類化合物 7-methoxymukonal 對腫瘤細胞株 MCF-7 和 KB 的 IC50 分別達到 2. 21 u g/mL 和1. 74 u g/mL0參見Thongthoom T, et al. Biological activity of chemical constituents fromClausena harmandiana, Arch. Pharmacal Res. , 2010, 33, 675-680。咔唑生物喊類化合物在植物界分布廣泛，尤其以蕓香科黃皮屬植物中最為豐富。黃皮屬植物在我國南方分布廣，容易生長栽培，資源豐富，從黃皮屬植物中分離到的咔唑生物堿類化合物含量大、種類多、分離提取容易、抗腫瘤活性強，對咔唑生物堿進行抗腫瘤藥物方面的研究有利于黃皮屬植物資源的綜合開發利用。本專利中申請保護的四個咔唑生物堿類化合物具有較強的細胞毒活性，目前尚未發現有文獻報道。黃皮屬植物中的咔唑生物堿類化合物的提取分離有一定的特點，該類天然產物主要分布于植物的根和莖，含色素，化合物極性大多數中等偏小，含量不同，另外由于該類化合物結構中含有較大的共軛體系，因此紫外吸收比較強，在分離純化時可充分利用該特點。現有技術中，從黃皮屬植物中分離咔唑生物堿類化合物已公開發表如下方法(I) 20世紀80年代，黃皮屬植物Clausena harmandiana的根莖經正己燒回流提取,用TLC檢測,經反復娃膠柱層析分離得到咔唑生物堿heptaphylline。參見Wangboonskul JD, et al, FiveCoumarins and a carbazole alkaloid from the root bark of Clausena harmandiana,J. Nat. Prod. , 1984，47，1058-1059。其缺點是用正己烷提取樣品不充分，只利用TLC檢測和硅膠柱層析進行分離得不到微量成分。(2) 20世紀90年代，黃皮屬植物Clausenaanisata的莖由石油醚和乙醇分別提取，然后用氯仿和乙酸乙酯分別萃取，再經硅膠柱層析，分別以石油醚，石油醚/ 二氯甲烷1: 1，氯仿，氯仿/甲醇1:50為洗脫劑反復硅膠柱層析得到咔唑生物喊 clausenol 和 clausenine。參見Chakraborty A, et al, Clausenoland clausenine-Two carbazole alkaloids from Clausena anisata, Phytochemistry,1995，40，295-298。其缺點是只用正相硅膠，沒有應用反相硅膠，容易吸附微量樣品。(3)近年來,黃皮屬植物Clausena anisata的莖經干燥粉碎后分別由丙酮和甲醇進行回流提取，得到的浸膏經反復硅膠柱層析及TLC制備薄層板進行分離純化得到咔唑生物IjlEfuranoclausamine A 和 furanoclausamine B。參見Ito C，et al. gamma-Lactonecarbazoles from Clausena anisata, J. Nat. Prod. , 2009, 72, 1202-1204。該方法的缺點是薄層制備板只適用于微量成分，且容易吸附樣品。以上幾種方法側重于使用正相硅膠，反相硅膠幾乎沒有使用，容易損失樣品；單一的TLC檢測方法靈敏度不夠，微量成分不容易檢測，沒有充分利用咔唑生物堿紫外吸收強的特點。
技術實現思路
針對現有技術存在的上述不足之處，本專利技術的目的在于提供一類咔唑生物堿；提供制備該類化合物的方法，該提取分離方法可控性和重現性好，樣品損失少，成本較低，操作方便，溶劑可以反復回收利用，也適用于工業生產；本專利技術的目的還在于提供以咔唑生物堿類化合物為有效成分的藥物組合物；該類化合物作為腫瘤細胞生長抑制劑，以及在制備抗腫瘤藥物中的應用。為了實現本專利技術的上述目的，本專利技術提供了如下技術方案藥物組合物，其中含有治療有效本文檔來自技高網...

【技術保護點】
藥物組合物，其中含有治療有效量的如下結構式所示的黃皮屬植物中的咔唑生物堿clausine?D（1）、6?methoxyheptaphylline（2）、mafaicheenamine?C（3）、claulansine?G（4）或其藥理學上容許的鹽和藥學上可接受的載體，。FDA0000271318781.jpg

【技術特征摘要】

【專利技術屬性】
技術研發人員：譚寧華，宋衛武，曾廣智，彭文文，
申請(專利權)人：中國科學院昆明植物研究所，
類型：發明
國別省市：