利用分子印跡—基質固相分散技術分離喜樹堿的方法，本發明專利技術涉及一種分離喜樹堿的方法。本發明專利技術是要解決現有喜樹堿分離提取技術存在選擇性低、步驟復雜、有機溶劑消耗量大，基質固相分散技術的選擇性低，包埋法制備分子印跡聚合物需要反復研磨，費時費力的問題。方法：一、得到混合粉末；二、將混合粉末移入注射器；三、淋洗；四、洗脫。本發明專利技術樣品制備過程簡單，減少了實驗時間和溶劑使用量；應用分子印跡聚合物作為分離介質，提高了喜樹堿提取分離的選擇性效果；在制備分子印跡聚合物時采用表面印跡技術，把結合位點局限在具有良好可接近性的二氧化硅表面上，有利于模板分子的洗脫和再結合，條件易于控制，生產成本低。本發明專利技術用于分離喜樹堿。
【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及一種分離喜樹堿的方法。
技術介紹
喜樹喊(Camptothecin, CPT),淺黃色針狀結晶，分子式C20H16N2O4,分子量 348.3。它是廣泛分布在我國南方的珙桐科旱蓮屬落葉喬木喜樹(Camptotheca acuminata Decsne )中的一種生物堿；1966年Wal I等人從喜樹的葉和樹皮中分離出喜樹堿并確證了結構，它有很強的抗腫瘤活性，尤其對消化道腫瘤、白血病、絨毛膜上皮癌、膀胱癌有效。喜樹堿一般從喜樹的根、皮、莖和種子中提取得到。但是由于喜樹中除喜樹堿以外還含有其它多種組分，導致喜樹堿提取分離困難。傳統提取分離技術存在著步驟復雜、能耗高、選擇性低、 有機溶劑消耗量大等缺點。建立一種新型有效的喜樹堿分離提取方法尤為重要。基質固相分散技術(MatrixSolid-phas e Dispersion, MSPD)是美國 Louisiana 州立大學的Barker教授在1989年提出并給予理論解釋的一種快速樣品預處理技術。其優點是濃縮了傳統的樣品預處理中的樣品勻化、提取、凈化等過程，避免了樣品的損失，提高了凈化效率。然而，常用的基質固相分散技術的分散劑為硅膠、二氧化硅、C18、活性炭等，缺乏選擇性。如何提高基質固相分散技術的選擇性是目前迫切需要解決的問題分子印跡技術也稱模板印跡技術，是指制備對某一特定的目標分子具有特異選擇性的聚合物的過程。它可以被形象的描繪為制造識別“分子鑰匙”的“人工鎖”技術。這種技術制備的聚合物被稱為分子印跡聚合物(Molecularly Imprinted Polymer, MIP)。與傳統常用的樣品前處理方法相比，分子印跡技術可實現目標組分的有效分離，并且選擇性高， 適用范圍廣。然而傳統的包埋法制備分子印跡聚合物需要反復研磨，費時費力，產率低，并且有部分印跡位點被包埋在顆粒內，不能發揮作用，降低了印跡位點的利用率。綜上所述現有喜樹堿分離提取技術存在選擇性低、步驟復雜、有機溶劑消耗量大， 基質固相分散技術的選擇性低，包埋法制備分子印跡聚合物需要反復研磨，費時費力的問題。
技術實現思路
本專利技術是要解決現有喜樹堿分離提取技術存在選擇性低、步驟復雜、有機溶劑消耗量大，基質固相分散技術的選擇性低，包埋法制備分子印跡聚合物需要反復研磨，費時費力的問題，而提供的利用分子印跡-基質固相分散技術分離喜樹堿的方法。利用分子印跡-基質固相分散技術分離喜樹堿的方法，具體是按照以下步驟完成的一、將喜樹原料粉碎至細度為40目飛O目，得到喜樹粉末，按照分子印跡聚合物與喜樹粉末的質量比為I 4，稱取喜樹粉末和分子印跡聚合物，將喜樹粉末和分子印跡聚合物混合，研磨均化5mirTlOmin,得到混合粉末；二、將步驟一得到的混合粉末移入裝有玻璃棉墊底的注射器中，再在混合粉末上方放置玻璃棉，壓實；三、將淋洗劑倒入壓實的注射器中，以lmL/mirT2mL/min的流速淋洗，其中注射器中混合粉末的質量與淋洗劑的體積比為Ig 5mL^25mL ；四、將洗脫劑倒入淋洗后的注射器中，以lmL/mirT2mL/min的流速洗脫，其中注射器中混合粉末的質量與洗脫劑的體積比為Ig :5mL 25mL，完成利用分子印跡一基質固相分散技術分離喜樹堿的方法。其中，步驟三中淋洗的目的是淋洗掉喜樹原料中除喜樹堿以外的其它組分，步驟四中洗脫目標物為喜樹堿。本專利技術的有益效果是本專利技術采用基質固相分散技術作為分離模式，提取分離喜樹堿，使得提取和凈化在一個體系中完成，使樣品制備過程簡單，減少了實驗時間和溶劑使用量；應用分子印跡聚合物作為分離介質，提高了喜樹堿提取分離的選擇性效果，該聚合物對喜樹堿具有兩種結合方式，總的吸附量(Qmaxl+Qmax2)可達IOlOmg g-1;在制備分子印跡聚合物時采用的是表面印跡技術，把結合位點局限在具有良好可接近性的二氧化硅表面上， 從而有利于模板分子的洗脫和再結合，并且制備過程簡單，條件易于控制，生產成本低。本專利技術用于分離喜樹堿。附圖說明圖1為實施例一制備的分子印跡聚合物的掃描電子顯微鏡圖2為實施例一制備的分子印跡聚合物的紅外光譜圖3為實施例一制備的分子印跡聚合物對喜樹堿的吸附等溫線圖4為實施例一制備的分子印跡聚合物吸附喜樹堿的Scatchard分析圖； 圖5為實施例一制備的分子印跡聚合物對模板分子喜樹堿的動力學曲線圖6為實施例一制備的分子印跡聚合物吸附喜樹堿的準一級動力學擬合圖7為實施例一制備的分子印跡聚合物吸附喜樹堿的準二級動力學擬合圖。具體實施方式本專利技術技術方案不局限于以下所列舉的具體實施方式，還包括各具體實施方式之間的任意組合。具體實施方式一本實施方式利用分子印跡-基質固相分散技術分離喜樹堿的方法，其特征在于利用分子印跡一基質固相分散技術分離喜樹堿的方法，具體是按照以下步驟完成的一、將喜樹原料粉碎至細度為40目飛O目，得到喜樹粉末，按照分子印跡聚合物與喜樹粉末的質量比為I 4，稱取喜樹粉末和分子印跡聚合物，將喜樹粉末和分子印跡聚合物混合，研磨均化5min IOmin,得到混合粉末；二、將步驟一得到的混合粉末移入裝有玻璃棉墊底的注射器中，再在混合粉末上方放置玻璃棉，壓實；三、將淋洗劑倒入壓實的注射器中，以lmL/mirT2mL/min的流速淋洗，其中注射器中混合粉末的質量與淋洗劑的體積比為Ig 5mL^25mL ；四、將洗脫劑倒入淋洗后的注射器中，以lmL/mirT2mL/min的流速洗脫，其中注射器中混合粉末的質量與洗脫劑的體積比為Ig :5mL 25mL，完成利用分子印跡一基質固相分散技術分離喜樹堿的方法。其中，步驟三中淋洗的目的是淋洗掉喜樹原料中除喜樹堿以外的其它組分，步驟四中洗脫目標物為喜樹堿。本實施方式采用基質固相分散技術作為分離模式，提取分離喜樹堿，使得提取和凈化在一個體系中完成，使樣品制備過程簡單，減少了實驗時間和溶劑使用量；應用分子印跡聚合物作為分離介質，提高了喜樹堿提取分離的選擇性效果，該聚合物對喜樹堿具有兩種結合方式，總的吸附量(Qmaxl+Qmax2)可達l(T20mg g-1;在制備分子印跡聚合物時采用的是表面印跡技術，把結合位點局限在具有良好可接近性的二氧化硅表面上，從而有利于模板分子的洗脫和再結合，并且制備過程簡單，條件易于控制，生產成本低。具體實施方式二 本實施方式與具體實施方式一不同的是步驟一中分子印跡聚合物與喜樹堿樣品粉末的質量比為1:1. 1 2。其它與具體實施方式一相同。具體實施方式三本實施方式與具體實施方式一或二不同的是步驟二中玻璃棉的厚度為2mnT3mm。其它與具體實施方式一或二相同。具體實施方式四本實施方式與具體實施方式一至三之一不同的是步驟三中混合粉末的質量與淋洗劑的體積比為Ig :10mL 20mL。其它與具體實施方式一至三之一相同。具體實施方式五本實施方式與具體實施方式一至四之一不同的是步驟三中淋洗劑為甲醇水溶液或乙醇水溶液，其中甲醇或乙醇與水的體積比為1:1(Γ20。其它與具體實施方式一至四之一相同。具體實施方式六本實施方式與具體實施方式一至五之一不同的是步驟四中混合粉末的質量與洗脫劑的體積比為Ig :10mL 20mL。其它與具體實施方式一至五之一相同。 具體實施方式七本實施方式與具體實施方式一至六之一不同的是步驟四中洗本文檔來自技高網...
【技術保護點】
利用分子印跡—基質固相分散技術分離喜樹堿的方法，其特征在于利用分子印跡—基質固相分散技術分離喜樹堿的方法，具體是按照以下步驟完成的：一、將喜樹原料粉碎至細度為40目~50目，得到喜樹粉末，按照分子印跡聚合物與喜樹粉末的質量比為1：1~4，稱取喜樹粉末和分子印跡聚合物，將喜樹粉末和分子印跡聚合物混合，研磨均化5min~10min，得到混合粉末；二、將步驟一得到的混合粉末移入裝有玻璃棉墊底的注射器中，再在混合粉末上方放置玻璃棉，壓實；三、將淋洗劑倒入壓實的注射器中，以1mL/min~2mL/min的流速淋洗，其中注射器中混合粉末的質量與淋洗劑的體積比為1g：5mL~25mL；四、將洗脫劑倒入淋洗后的注射器中，以1mL/min~2mL/min的流速洗脫，其中注射器中混合粉末的質量與洗脫劑的體積比為1g：5mL~25mL，完成利用分子印跡—基質固相分散技術分離喜樹堿的方法。
【技術特征摘要】
【專利技術屬性】
技術研發人員：陳立鋼，洪言鎖，李斌，
申請(專利權)人：東北林業大學，
類型：發明
國別省市：
還沒有人留言評論。發表了對其他瀏覽者有用的留言會獲得科技券。