本發(fā)明專利技術(shù)公開一種穩(wěn)定的扶正解毒超微粉中毛蕊異黃酮葡萄糖苷的含量測(cè)定方法，以乙腈-0.2％甲酸溶液（20:80）為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)260nm，以毛蕊異黃酮葡萄糖苷為對(duì)照品，用甲醇回流、過濾、蒸干、溶解處理樣品，采用高效液相色譜法-紫外檢測(cè)器檢測(cè)扶正解毒超微粉中毛蕊異黃酮葡萄糖苷的含量。此方法線性關(guān)系良好、精密度、重現(xiàn)性良好，可作為扶正解毒超微粉中毛蕊異黃酮葡萄糖苷含量測(cè)定方法，簡(jiǎn)單、快速、易操作。
【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)涉及一種高效液相色譜方法，特別涉及一種中藥成分的含量測(cè)定技術(shù)。
技術(shù)介紹
扶正解毒超微粉是根據(jù)《中華人民共和國(guó)獸藥典》2010版二部扶正解毒散項(xiàng)下規(guī)定，由黃芪、板藍(lán)根和淫羊藿三味中藥按一定比例組合超微粉碎而成的成方制劑，具有扶正祛邪、清熱解毒的功效。主治雞法氏囊病。超微粉碎是近20年迅速發(fā)展起來的一項(xiàng)高新技術(shù),用于中藥領(lǐng)域能把原材料加工成微米甚至納米級(jí)的微粉。鑒于粉碎是中藥生產(chǎn)及應(yīng)用中的基本加工技術(shù)，超微粉碎也愈來愈引起人們的關(guān)注，雖然在中藥制藥行業(yè)中起步較晚，開發(fā)研制的品種相對(duì)較少，但已顯露出特有的優(yōu)勢(shì)和廣闊的應(yīng)用前景，并已成為近幾年來中藥界的研究熱點(diǎn)。超微粉碎中藥最大的優(yōu)勢(shì)是有效提高了藥物的生物利用度。從藥物學(xué)原理來說，藥物的溶出速度與藥物的顆粒比表面積呈正相關(guān)，而比表面積與顆粒粒徑成反比。因此，藥物的粒徑越小，則其表面積越大，越有助于藥物有效成分的溶出。超微粉碎中藥及其顆粒達(dá)至IJ超細(xì)粉末的水平，其比表面積顯著增大，藥物在胃腸道里的溶解度明顯增加，從而增加藥物的生物利用度，并加快藥物起效時(shí)間。此外，由于納米或微米粒的粘附性及小的粒徑，既有利于延長(zhǎng)局部用藥時(shí)滯留性的增加，也有利于延長(zhǎng)藥物與腸壁接觸時(shí)間，加大接觸面積，從而提高藥物口服吸收的生物利用度。如甘草飲片超微粉碎后甘草酸的溶出有顯著增加。傳統(tǒng)中藥飲片往往采用煎煮的方法，目前雖已進(jìn)行了中藥制劑的改良，但只是提取中藥所含的小部分成分，占總成分的10% 30%，藥效大受影響。使用超微粉碎技術(shù)可充分提取中藥成分，具有吸收快及使用方便等優(yōu)點(diǎn)。藥典中扶正解毒散項(xiàng)下質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)未規(guī)定其各有效成分的鑒別方法和含量測(cè)定方法，為了完善扶正解毒散質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，為其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制定提供依據(jù)，本專利技術(shù)對(duì)扶正解毒超微粉中黃芪的成分毛蕊異黃酮葡萄糖苷進(jìn)行含量測(cè)定方法的探索，并確定一種。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
本專利技術(shù)旨在解決扶正解毒超微粉中毛蕊異黃酮葡萄糖苷含量測(cè)定問題，以解決扶正解毒超微粉中毛蕊異黃酮葡萄糖苷含量測(cè)定無法使用中國(guó)獸藥典中所規(guī)定的黃芪中毛蕊異黃酮葡萄糖苷含量測(cè)定方法。具體方法技術(shù)方案如下 一種高效液相色譜法測(cè)定扶正解毒超微粉中毛蕊異黃酮葡萄糖苷含量的方法，其色譜條件為 a.填充劑為十八烷基硅烷鍵合硅膠； b.流動(dòng)相為混合比例為20:80的乙腈和O.2%甲酸溶液；C.紫外檢測(cè)器的檢測(cè)波長(zhǎng)為260nm。d.所用流動(dòng)相流速為lml/min ； e.進(jìn)樣體積為10 μ I。1.毛蕊異黃酮葡萄糖苷標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 a.標(biāo)準(zhǔn)品溶液的制備精密稱取毛蕊異黃酮葡萄糖苷標(biāo)準(zhǔn)品O. 01042g,置于200ml容量瓶中，用甲醇溶解，定容至200ml。b.用甲醇稀釋不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品溶液精密量取原濃度標(biāo)準(zhǔn)品溶液5ml，加甲醇定容至10ml，混勻后，再精密量取5ml至另一容量瓶中，加甲醇定容至10ml，按照此方法倍比稀釋，制成濃度分別為 52.1 μ g/ml、26. 05 μ g/ml、13. 03 μ g/ml、6. 51 μ g/ml、3. 26 μ g/ml的毛蕊異黃酮葡萄糖苷標(biāo)準(zhǔn)品溶液。 c.以不同濃度的毛蕊異黃酮葡萄糖苷標(biāo)準(zhǔn)品溶液響應(yīng)的峰面積對(duì)濃度作圖，得到毛蕊異黃酮葡萄糖苷的標(biāo)準(zhǔn)曲線。見附圖。2.供試品的制備 取扶正解毒超微粉約lg，精密稱定，置圓底燒瓶中，精密加入甲醇50ml，稱定重量，加熱回流4小時(shí)，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液25ml，回收溶劑至干，殘?jiān)蛹状既芙猓D(zhuǎn)移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得。3.精密度試驗(yàn) 取供試品溶液，精密吸取10 μ I進(jìn)樣，重復(fù)5次，記錄峰面積，計(jì)算該方法精密度。試驗(yàn)結(jié)果見表。表毛蕊異黃酮葡萄糖苷含量測(cè)定方法精密度試驗(yàn)結(jié)果序號(hào) I2345 峰_ mu丨斑於腿觀丨纖選I服觀 平均值224.75 RSD (%>0.51% 由結(jié)果可見，毛蕊異黃酮葡萄糖苷的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為O. 58%，表明本方法的進(jìn)樣精密度良好。4.方法的專屬性試驗(yàn) 陰性樣品溶液精密稱取除黃芪外扶正解毒超微粉約lg，置圓底燒瓶中，精密加入甲醇50ml，稱定重量，加熱回流4小時(shí)，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液25ml，回收溶劑至干，殘?jiān)蛹状既芙猓D(zhuǎn)移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得。對(duì)照品溶液取毛蕊異黃酮葡萄糖苷對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制成每Iml含50 μ g的溶液，即得。5.回收率試驗(yàn) 供試品溶液的制備精密稱取扶正解毒超微粉約lg，6份，置圓底燒瓶中，分別加入毛蕊異黃酮葡萄糖苷標(biāo)準(zhǔn)品溶液1ml，精密加入甲醇49ml，稱定重量，加熱回流4小時(shí)，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液25ml，回收溶劑至干，殘?jiān)蛹状既芙猓D(zhuǎn)移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得。對(duì)照品溶液取毛蕊異黃酮葡萄糖苷對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制成每Iml含50 μ g的溶液，即得。表毛蕊異黃酮葡萄糖苷回收率試驗(yàn)結(jié)果權(quán)利要求1.一種穩(wěn)定的扶正解毒超微粉中毛蕊異黃酮葡萄糖苷的含量測(cè)定方法，其特征在于步驟如下(1)采用高效液相色譜法測(cè)定；(2)色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-O.2% 甲酸溶液(20:80)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為260nm，理論板數(shù)按毛蕊異黃酮葡萄糖苷峰計(jì)算應(yīng)不低于3000;(3)對(duì)照品溶液的制備取毛蕊異黃酮葡萄糖苷對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制成每 Iml含50 μ g的溶液，即得；(4)供試品溶液的制備取本品粉末約lg，精密稱定，置圓底燒瓶中，精密加入甲醇 50ml，稱定重量，加熱回流4小時(shí)，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過， 精密量取續(xù)濾液25ml，回收溶劑至干，殘?jiān)蛹状既芙猓D(zhuǎn)移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度， 搖勻，即得；(5)測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μ 1，注入液相色譜儀，測(cè)定， 即得。2.如權(quán)利要求1所述，穩(wěn)定的扶正解毒超微粉中毛蕊異黃酮葡萄糖苷的含量測(cè)定方法，其特征在于采用高效液相色譜法。3.如權(quán)利要求1所述，扶正解毒超微粉中毛蕊異黃酮葡萄糖苷的含量測(cè)定方法，其特征在于以乙腈-O. 2 %甲酸溶液(20:80 )為流動(dòng)相。4.如權(quán)利要求1所述，穩(wěn)定的扶正解毒超微粉中毛蕊異黃酮葡萄糖苷的含量測(cè)定方法，其特征在于以毛蕊異黃酮葡萄糖苷為對(duì)照品。5.如權(quán)利要求1所述，穩(wěn)定的扶正解毒超微粉中毛蕊異黃酮葡萄糖苷的含量測(cè)定方法，其特征在于所用檢測(cè)器為紫外檢測(cè)器。6.穩(wěn)定的扶正解毒超微粉中毛蕊異黃酮葡萄糖苷的含量測(cè)定方法，其特征在于檢測(cè)波長(zhǎng)為260nm。7.穩(wěn)定的扶正解毒超微粉中毛蕊異黃酮葡萄糖苷的含量測(cè)定方法，其特征在于所用溶劑為甲醇。全文摘要本專利技術(shù)公開一種穩(wěn)定的扶正解毒超微粉中毛蕊異黃酮葡萄糖苷的含量測(cè)定方法，以乙腈-0.2％甲酸溶液(20:80)為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)260nm，以毛蕊異黃酮葡萄糖苷為對(duì)照品，用甲醇回流、過濾、蒸干、溶解處理樣品，采用高效液相色譜法-紫外檢測(cè)器檢測(cè)扶正解毒超微粉中毛蕊異黃酮葡萄糖苷的含量。此方法線性關(guān)系良好、精密度、重現(xiàn)性良好，可作為扶正解毒超微粉中毛蕊異黃酮葡萄糖苷含量測(cè)定方法，簡(jiǎn)單、快速、易操作。文檔編號(hào)G01N30/02GK102本文檔來自技高網(wǎng)...
【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
一種穩(wěn)定的扶正解毒超微粉中毛蕊異黃酮葡萄糖苷的含量測(cè)定方法，其特征在于步驟如下：（1）采用高效液相色譜法測(cè)定;（2）色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)??以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈?0.2％甲酸溶液（20:80）為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為260nm,理論板數(shù)按毛蕊異黃酮葡萄糖苷峰計(jì)算應(yīng)不低于3000;（3）對(duì)照品溶液的制備??取毛蕊異黃酮葡萄糖苷對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含50μg的溶液，即得;（4）供試品溶液的制備??取本品粉末約1g，精密稱定，置圓底燒瓶中，精密加入甲醇50ml，稱定重量，加熱回流4小時(shí)，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液25ml，回收溶劑至干，殘?jiān)蛹状既芙猓D(zhuǎn)移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得;（5）測(cè)定法??分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。
【技術(shù)特征摘要】
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：郭振環(huán)，于瑞，劉海新，劉琴，李秋霞，王文文，
申請(qǐng)(專利權(quán))人：河南省康星藥業(yè)股份有限公司，
類型：發(fā)明
國(guó)別省市：
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