本發(fā)明專利技術(shù)涉及一種生牛乳體細(xì)胞檢測(cè)比色杯及其制備方法，所述比色杯底部設(shè)置檢測(cè)塊，所述檢測(cè)塊包括芯材和壁材；所述芯材的組成成分包括1～12份芳香酯、1～18份重氮鹽、0.1～1.6份增溶增敏劑，水溶解上述成分，并用濃度為0.1mol/L緩沖溶液調(diào)溶液pH為8.0，得到芯材溶液；所述壁材的組成成分包括酪蛋白5～10份、大豆蛋白或乳清蛋白15～30份、乳糖或蔗糖20～50份，水溶解上述成分得到壁材溶液，將芯材溶液與壁材溶液按照1：1混合，取混合溶液0.15～0.25mL注入比色杯，膜封口，膜上扎孔，經(jīng)冷凍干燥和避光處理，得到生牛乳體細(xì)胞檢測(cè)比色杯。本發(fā)明專利技術(shù)能夠快速、敏感、便捷的對(duì)生牛乳中的體細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè)。
【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)涉及食品檢測(cè)
，具體地，本專利技術(shù)涉及。
技術(shù)介紹
生牛乳中的體細(xì)胞數(shù)是指每毫升生牛乳中的細(xì)胞總數(shù)，體細(xì)胞數(shù)是衡量生牛乳品質(zhì)與供應(yīng)生牛乳動(dòng)物乳腺健康的重要指標(biāo)，需要簡(jiǎn)便、成本低、準(zhǔn)確度高的檢測(cè)方法。目前國(guó)內(nèi)外乳品行業(yè)應(yīng)用的生牛乳體細(xì)胞數(shù)或乳房炎的檢測(cè)方法很多，通用的方法包括仲裁法-顯微鏡直接觀察法、電子計(jì)數(shù)儀檢測(cè)法、加利福尼亞細(xì)胞數(shù)測(cè)定法(CMT)、酯酶法。其中，仲裁法-顯微鏡直接觀察法需要染色、制片、觀察、計(jì)數(shù)，十分繁瑣，易造成操作人員視覺疲勞出現(xiàn)人為誤差，且其所用的試劑(四氯乙烷)具有強(qiáng)毒性。電子計(jì)數(shù)儀檢測(cè)法設(shè)備價(jià)格昂貴、運(yùn)行成本高；加利福尼亞細(xì)胞數(shù)測(cè)定法只是對(duì)生牛乳的凝固狀態(tài)進(jìn)行粗略的判斷，主觀性強(qiáng)，結(jié)果不夠準(zhǔn)確。酯酶法是基于粒細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)含有特異性酯酶可作用于底物芳香酯，釋放出酚，酚又與重氮鹽發(fā)生反應(yīng)形成紫色絡(luò)合物，顏色深淺與體細(xì)胞數(shù)呈一定的比例關(guān)系。但酯酶法未能廣泛應(yīng)用于生牛乳驗(yàn)收，以及奶牛乳房炎判定，主要原因?yàn)榉枷沲z測(cè)生牛乳時(shí)用量微小，需精密稱量；重氮鹽配制方法繁瑣，分布廣泛的生牛乳檢測(cè)現(xiàn)場(chǎng)無法具備精密稱取藥品、配制反應(yīng)溶液的條件。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
本專利技術(shù)的目的在于，提供一種生牛乳體細(xì)胞檢測(cè)比色杯，該比色杯能夠快速、敏感、便捷的對(duì)生牛乳中的體細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè)。為達(dá)到上述目的，本專利技術(shù)采用了如下的技術(shù)方案一種生牛乳體細(xì)胞檢測(cè)比色杯，所述比色杯底部設(shè)置檢測(cè)塊，所述檢測(cè)塊包括芯材和壁材；所述芯材的組成成分包括I 12份芳香酯、I 18份重氮鹽、O.1 1. 6份增溶增敏劑，200份水溶解上述成分，濃度為O. lmol/L緩沖溶液調(diào)溶液的pH為8. O ;所述壁材的組成成分包括酪蛋白5 10份、大豆蛋白或乳清蛋白15 30份、乳糖或蔗糖20 50份。所述芳香酯為吡咯酯，也可以是其他芳香酯，比如吲哚酯等。所述重氮鹽為1-氨基-2-萘酚-4-磺酸重氮鹽，也可以是其他的重氮鹽，如氟硼酸重氮鹽。所述緩沖溶液為Tris-鹽酸緩沖溶液。所述增溶增敏劑為EDTA。本專利技術(shù)采用微膠囊技術(shù)，以芳香酯及重氮鹽為芯材,并根據(jù)芯材性質(zhì)以及檢測(cè)樣品(生牛乳)性質(zhì)配制壁材，使壁材即可有效承載并保護(hù)芯材，又可以在與生牛乳接觸時(shí)迅速崩解，快速反應(yīng)。本專利技術(shù)通過真空干燥技術(shù)使用壁材包埋吡咯酯及重氮鹽，在比色杯底部形成質(zhì)地細(xì)致均勻的藥品固體方塊，且比色杯底部采用避光處理，-10°c 10°C條件保存。本專利技術(shù)的壁材中，乳糖或蔗糖為惰性載體，可有效保護(hù)芯材自身不發(fā)生反應(yīng)變色。其中，乳糖與大 蛋白顆粒小、易溶解，與待測(cè)樣品溶液混合后可迅速朋解釋放芯材。乳糖和大豆蛋白聯(lián)合使用不會(huì)造成吡咯酯及重氮鹽在運(yùn)輸或使用過程中的損失，且可賦予成品細(xì)膩豐滿的質(zhì)感。酪蛋白在壁材配制中具有乳化作用，同時(shí)具有PH調(diào)節(jié)作用，使溶液以及成品的pH更接近中性。—般生牛乳的pH為6. 3 6. 8,因此,本專利技術(shù)試劑反應(yīng)的最佳pH條件為弱堿環(huán)境，故在配制過程中需要添加緩沖溶液，調(diào)節(jié)pH。本專利技術(shù)的使用方法量取I 2mL生牛乳注入比色杯，震蕩、混勻，靜置I IOmin觀察生牛乳顏色變化。本專利技術(shù)的另一個(gè)目的在于，提供一種生牛乳體細(xì)胞檢測(cè)比色杯的制備方法，所述方法包括以下步驟I)比色杯處理比色杯經(jīng)超聲波處理10 30分鐘，水沖洗，熱風(fēng)干燥箱干燥；2)芯材溶液1 12份芳香酯、I 18份重氮鹽、O.1 1. 6份增溶增敏劑，200份水溶解上述原料，濃度為O. lmol/L緩沖溶液調(diào)溶液的pH為8. O ;3)壁材溶液酪蛋白5 10份、大豆蛋白或乳清蛋白15 30份、乳糖蔗糖20 50份，IOOml水溶解上述原 料得到壁材溶液；4)混合溶液注入比色杯芯材溶液壁材溶液按照1:1混合，取混合溶液O. 15 O.25mL注入比色杯，膜封口，膜上扎孔；5)真空冷凍干燥-80 -20°C預(yù)凍2 8h，I 20pa真空干燥5 IOh ;6)避光處理真空冷凍干燥后，比色杯底部形成檢測(cè)塊，采用不透光材質(zhì)包裹比色杯底部或采用不透光涂料涂布比色杯底部，得到生牛乳體細(xì)胞檢測(cè)比色杯。所述混合溶液O. 15 O. 25mL注入比色杯中，優(yōu)選混合溶液O. 2mL注入比色杯中。所述芳香酯為吡咯酯，也可以是其他芳香酯，比如吲哚酯等。所述重氮鹽為1-氨基-2-萘酚-4-磺酸重氮鹽，也可以是其他的重氮鹽，如氟硼酸重氮鹽。所述緩沖溶液為Tris-鹽酸緩沖溶液。所述增溶增敏劑為EDTA。本專利技術(shù)相對(duì)于現(xiàn)有技術(shù)具有以下優(yōu)點(diǎn)I)可解決現(xiàn)有生牛乳體細(xì)胞的檢測(cè)方法無法實(shí)現(xiàn)實(shí)時(shí)在線檢測(cè)的問題，適用于生產(chǎn)現(xiàn)場(chǎng)生牛乳體細(xì)胞數(shù)據(jù)的收集；2)可解決酯酶法無法現(xiàn)場(chǎng)準(zhǔn)確用量的問題；3)檢測(cè)速度快，最快2 8分鐘即可定量測(cè)定原料乳的體細(xì)胞；4)檢測(cè)方便，注入生牛乳混勻觀察即可；5)便捷、經(jīng)濟(jì)、準(zhǔn)確、成本低、應(yīng)用廣泛，既適合個(gè)體奶農(nóng)，又適合大型牧場(chǎng)的大量檢測(cè)。具體實(shí)施例方式下面以具體實(shí)施方式對(duì)本專利技術(shù)作進(jìn)一步詳細(xì)的說明。實(shí)施例1一種生牛乳體細(xì)胞檢測(cè)比色杯，所述比色杯底部設(shè)置檢測(cè)塊，所述檢測(cè)塊包括芯材和壁材；所述芯材的組成成分包括I份吡咯酯、I份1-氨基-2-萘酚-4-磺酸重氮鹽、O.1份增溶增敏劑，200份水溶解上述成分，濃度為O. lmol/L Tris-鹽酸緩沖溶液調(diào)溶液的pH為 8.0 ;所述壁材的組成成分包括酪蛋白5份、大豆蛋白15份、乳糖20份。一種生牛乳體細(xì)胞檢測(cè)比色杯的制備方法，所述方法包括以下步驟I)比色杯處理751型有機(jī)玻璃比色杯經(jīng)超聲波處理10分鐘，水沖洗，熱風(fēng)干燥箱干燥；2)芯材溶液1份吡咯酯、I份1-氨基-2-萘酚-4-磺酸重氮鹽、O.1份增溶增敏齊U，200份水溶解，濃度為O. lmol/L Tris-鹽酸緩沖溶液調(diào)溶液的pH為8. O ;3)壁材溶液酪蛋白5份、大豆蛋白15份、乳糖20份，IOOml水溶解得到壁材溶液；4)混合溶液注入比色杯芯材溶液壁材溶液按照1:1混合，取混合溶液O. 2mL注入比色杯，膜封口，膜上扎孔；5)真空冷凍干燥-28 -20°C預(yù)凍2h，1. 3pa真空干燥IOh ；6)避光處理真空冷凍干燥后，比色杯底部形成檢測(cè)塊，采用不透光材質(zhì)包裹比色杯底部，得到生牛乳體細(xì)胞檢測(cè)比色杯。實(shí)施例2一種生牛乳體細(xì)胞檢測(cè)比色杯，所述比色杯底部設(shè)置檢測(cè)塊，所述檢測(cè)塊包括芯材和壁材；所述芯材的組成成分包括12份吡咯酯、18份1-氨基-2-萘酚_4_磺酸重氮鹽、1.6份增溶增敏劑，200份水溶解上述成分，濃度為O. lmol/L Tris-鹽酸緩沖溶液調(diào)溶液的PH 為 8. O ;所述壁材的組成成分包括酪蛋白10份、乳清蛋白30份、蔗糖50份。一種生牛乳體細(xì)胞檢測(cè)比色杯的制備方法，所述方法包括以下步驟I)比色杯處理751型有機(jī)玻璃比色杯經(jīng)超聲波處理15分鐘，水沖洗，熱風(fēng)干燥箱干燥；2)芯材溶液12份吡咯酯、18份1-氨基_2_萘酚_4_磺酸重氮鹽、1. 6份增溶增敏劑，200份水溶解，濃度為O. lmol/L Tris-鹽酸緩沖溶液調(diào)溶液的pH為8. O ;3)壁材溶液酪蛋白10份、乳清蛋白30份、蔗糖50份，IOOml水溶解得到壁材溶液；4)混合溶液注入比色杯芯材溶液壁材溶液按照1:1混合，取混合溶液O. 15mL注入比色杯，膜封口，膜上扎孔；5)真空冷凍干燥-80 _40°C預(yù)凍2h,1. 3pa真空干燥IO本文檔來自技高網(wǎng)...
【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
一種生牛乳體細(xì)胞檢測(cè)比色杯，所述比色杯底部設(shè)置檢測(cè)塊，所述檢測(cè)塊包括芯材和壁材；所述芯材的組成成分包括1～12份芳香酯、1～18份重氮鹽、0.1～1.6份增溶增敏劑，200份水溶解上述成分，濃度為0.1mol/L緩沖溶液調(diào)溶液的pH為8.0；所述壁材的組成成分包括酪蛋白5～10份、大豆蛋白或乳清蛋白15～30份、乳糖或蔗糖20～50份。
【技術(shù)特征摘要】
1.一種生牛乳體細(xì)胞檢測(cè)比色杯，所述比色杯底部設(shè)置檢測(cè)塊，所述檢測(cè)塊包括芯材和壁材； 所述芯材的組成成分包括I 12份芳香酯、I 18份重氮鹽、O.1 1. 6份增溶增敏齊IJ，200份水溶解上述成分，濃度為O. lmol/L緩沖溶液調(diào)溶液的pH為8. O ; 所述壁材的組成成分包括酪蛋白5 10份、大豆蛋白或乳清蛋白15 30份、乳糖或鹿糖20 50份。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的生牛乳體細(xì)胞檢測(cè)比色杯，其特征在于，所述芳香酯為吡咯酯或吲哚酯。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的生牛乳體細(xì)胞檢測(cè)比色杯，其特征在于，所述重氮鹽為1-氨基-2-萘酚-4-磺酸重氮鹽或氟硼酸重氮鹽。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的生牛乳體細(xì)胞檢測(cè)比色杯，其特征在于，所述緩沖溶液為Tris-鹽酸緩沖溶液。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的生牛乳體細(xì)胞檢測(cè)比色杯，其特征在于，所述增溶增敏劑為EDTA。6.一種生牛乳體細(xì)胞檢測(cè)比色杯的制備方法，所述方法包括以下步驟 1)比色杯處理比色杯經(jīng)超聲波處理10 30分鐘，水沖洗，熱風(fēng)干燥箱干燥； 2)芯材溶液1 12份芳香酯、I 18份重氮鹽、O.1 1. ...
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：富鑫，
申請(qǐng)(專利權(quán))人：內(nèi)蒙古伊利實(shí)業(yè)集團(tuán)股份有限公司，
類型：發(fā)明
國(guó)別省市：
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