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    一種固定化酶酶解制取大豆油脂的方法技術

    技術編號:8652929 閱讀:201 留言:0更新日期:2013-05-01 19:03
    一種固定化酶酶解制取大豆油脂的方法屬于植物油脂提取技術,該方法包括以下步驟:(1)將堿性蛋白酶溶解于磷酸鹽緩沖液中,加入乙醇沉淀聚集后再加入戊二醛進行交聯得交聯酶聚集體即固定化堿性蛋白酶;(2)大豆經粉碎后進行擠壓膨化預處理得到膨化物料,將膨化物料粉碎后與水混合,調節pH和溫度,再加入步驟(1)中得到的固定化酶進行酶解,酶解后回收固定化酶,酶解液經離心分離后,即得大豆油脂;本方法所需的工藝設備簡單,制備的固定化酶活性高,固定化時間短且無需成本高昂的載體,大大降低了成本,同時將該固定化酶應用于水酶法提取大豆油脂中,不僅提油率高,并且酶可回收重復使用,減少資源浪費,具有很好的經濟效益和發展前景。

    【技術實現步驟摘要】

    本專利技術屬于植物油脂提取技術,尤其涉及。
    技術介紹
    在水酶法提取大豆油脂的過程中,酶溶解于液相和物料混合在一起,無法從反應體系中分離出來,不僅增加了成本,還造成了資源的浪費,而且會對產品品質有一定影響。固定化酶是20世紀60年代發展起來的新技術,一般是將酶與不溶性載體結合起來,使酶在一定的空間內呈封閉狀態,能連續的進行反應,反應后的酶通過過濾或離心等方法回收重復使用。然而固定化使用的試劑和載體成本高昂、固定效率偏低,真正投入工業化應用的固定化酶不多,因而進一步開發更簡便、更適用的固定化方法仍是該領域追求的目標。交聯酶聚集體技術是一種無載體固定化酶技術,酶的固定化是通過對基本純化的、高濃度的蛋白質樣品的共價交聯來實現的。該固定化方法獲得的固定化酶穩定性好、活性高,成本低廉,設備簡單,無需其他載體,因而單位體積活性大、空間效率高,應用范圍更廣。然而將交聯酶聚集體技術——無載體固定化酶技術應用于水酶法提取大豆油脂的研究未見報道,現有的固定化酶提取大豆油脂的方法存在固定化載體成本高,提油率低等問題。
    技術實現思路
    本專利技術所要解決的技術問題是克服上述現有技術的不足,提供,達到簡化工藝、提高酶的重復利用率及降低成本的目的。本專利技術所要解決的技術問題是通過以下技術方案來實現的: ,該方法包括以下步驟:(I)將protex-6L堿性蛋白酶溶解于磷酸鹽緩沖液中,加入乙醇沉淀聚集后再加入戊二醛進行交聯得固定化protex-6L堿性蛋白酶;(2)大豆經粉碎后進行擠壓膨化預處理得到膨化物料,將膨化物料粉碎后與水混合得到混合液,所述加水量與膨化物料質量比為5-9:1,調節混合液pH和溫度,再加入步驟(I)中得到的固定化酶進行酶解得到酶解液,酶解后回收固定化酶,酶解液經離心分即得大豆油脂。所述的固定化protex_6L堿性蛋白酶在以下工藝參數下制備:交聯pH 6_8,戊二醛濃度10-50%,交聯時間l-3h,游離酶添加量8000-12000U/g。所述的固定化protex_6L堿性蛋白酶制備的優選參數為:交聯pH 6.98,戊二醛濃度32.5%,交聯時間2.02h,游離酶添加量10010U/g。所述的加水量與膨化物料質量比優選為6.79:1。所述的酶解在以下工藝參數下進行:酶解溫度55_75°C,酶解pH 8_10,酶解時間2_4h,加酶量 4000-6000U/g。所述的酶解優選參數為: 酶解溫度63.5°C,酶解pH 9.35,酶解時間3.5h,加酶量4895U/g。本專利技術方法采用無載體固定化堿性蛋白酶,首先用沉淀劑聚集酶,再加入交聯劑使酶聚集體交聯,即得交聯酶聚集體一一固定化堿性蛋白酶,該固定化酶由于無需成本高昂的載體,因此大大降低了成本,應用此固定化酶提取大豆油脂,不僅提油率高,并且酶可回收重復使用,減少了資源的浪費。附圖說明圖1是本專利技術方法的工藝路線 圖2交聯pH與戊二醛濃度交互對酶活力回收率的響應面; 圖3交聯pH與交聯時間交互對酶活力回收率的響應面; 圖4交聯pH與游離酶添加量交互對酶活力回收率的響應面; 圖5戊二醛濃度與游離酶添加量交互對酶活力回收率的響應面; 圖6酶解溫度與酶解pH交互對總油提取率的響應面; 圖7酶解溫度與液料比交互對總油提取率的響應面; 圖8酶解pH與酶解時間交互對總油提取率的響應面; 圖9酶解pH與液料比交互對總油提取率的響應面; 圖10酶解時間與液料比交互對總油提取率的響應面。具體實施方案下面結合附圖對本專利技術具體實施例進行詳細描述, ,該方法包括以下步驟:(I)將protex-6L堿性蛋白酶溶解于磷酸鹽緩沖液中,加入乙醇沉淀聚集后再加入戊二醛進行交聯得固定化protex-6L堿性蛋白酶;(2)大豆經粉碎后進行擠壓膨化預處理得到膨化物料,將膨化物料粉碎后與水混合得到混合液,所述加水量與膨化物料質量比為5-9:1,調節混合液pH和溫度,再加入步驟(I)中得到的固定化酶進行酶解得到酶解液,酶解后回收固定化酶,酶解液經離心分即得大豆油脂。所述的固定化protex_6L堿性蛋白酶在以下工藝參數下制備:交聯pH 6_8,戊二醛濃度10-50%,交聯時間l-3h,游離酶添加量8000-12000U/g。所述的固定化protex_6L堿性蛋白酶制備的優選參數為:交聯pH 6.98,戊二醛濃度32.5%,交聯時間2.02h,游離酶添加量10010U/g。所述的加水量與膨化物料質量比優選為6.79:1。所述的酶解在以下工藝參數下進行:酶解溫度55_75°C,酶解pH 8_10,酶解時間2_4h,加酶量 4000-6000U/g。所述的酶解優選參數為:酶解溫度63.5°C,酶解pH 9.35,酶解時間3.5h,加酶量4895U/g。實施例1:制備無載體固定化堿性蛋白酶最佳參數的篩選試驗 I材料與方法1.1材料、試 劑 __protex—6L堿性內切蛋白酶丹麥novo公司本文檔來自技高網...

    【技術保護點】
    一種固定化酶酶解制取大豆油脂的方法,其特征在于,該方法包括以下步驟:(1)將protex?6L堿性蛋白酶溶解于磷酸鹽緩沖液中,加入乙醇沉淀聚集后再加入戊二醛進行交聯得固定化protex?6L堿性蛋白酶;(2)大豆經粉碎后進行擠壓膨化預處理得到膨化物料,將膨化物料粉碎后與水混合得到混合液,所述加水量與膨化物料質量比為5?9:1,調節混合液pH和溫度,再加入步驟(1)中得到的固定化酶進行酶解得到酶解液,酶解后回收固定化酶,酶解液經離心分即得大豆油脂。

    【技術特征摘要】
    1.一種固定化酶酶解制取大豆油脂的方法,其特征在于,該方法包括以下步驟:(1)將pix)tex-6L堿性蛋白酶溶解于磷酸鹽緩沖液中,加入乙醇沉淀聚集后再加入戊二醛進行交聯得固定化proteX-6L堿性蛋白酶;(2)大豆經粉碎后進行擠壓膨化預處理得到膨化物料,將膨化物料粉碎后與水混合得到混合液,所述加水量與膨化物料質量比為5-9:1,調節混合液PH和溫度,再加入步驟(I)中得到的固定化酶進行酶解得到酶解液,酶解后回收固定化酶,酶解液經離心分即得大豆油脂。2.根據權利要求1所述的一種固定化酶酶解制取大豆油脂的方法,其特征在于所述的固定化protex-6L堿性蛋白酶在以下工藝參數下制備:交聯pH 6-8,戍二醒濃度10-50%,交聯時間l_3h,游離酶添加量8000-12000U/g。3.根據權...

    【專利技術屬性】
    技術研發人員:李楊,江連洲,齊寶坤馮紅霞,王歡,王中江,王勝男隋曉楠,
    申請(專利權)人:東北農業大學,
    類型:發明
    國別省市:

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