枯草芽孢桿菌YB-05、其微生物制劑及其應用制造技術

本發明專利技術涉及一種枯草芽孢桿菌菌株YB-05及其菌劑制備方法，該菌株保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號為CGMCCNO.6498。所述微生物菌劑利用枯草芽孢桿菌YB-05菌株發酵液噴霧干制備粉劑。本發明專利技術的YB-05菌株及其菌劑抑菌譜廣、抑菌效果好，對小麥全蝕病、番茄灰霉病菌、小麥紋枯病菌和黃瓜疫病菌等有較強的抑制作用；該菌劑可用于小麥全蝕病、番茄灰霉病菌、小麥紋枯病菌和黃瓜疫病等的高效無毒、使用簡單、不造成環境污染。

【技術實現步驟摘要】

本專利技術涉及一種生防微生物，具體涉及一種枯草芽孢桿菌YB-05、其微生物制劑及其應用。
技術介紹
枯草芽孢桿菌5^07/5.),具有生長繁殖快、營養簡單,能產生耐熱抗逆的芽孢，對人畜無害、環境兼容性好、能夠抑制多種植物病害、不易使農作物產生抗藥性。而且批量生產工藝簡單，成本也較低，施用方便，儲存期長等優點，因此，是一種理想的生防微生物。目前該菌已經在黃瓜、辣椒、水稻、小麥、玉米等農作物上顯出很好的病害防治效果。在植物真菌病害生物防治方面，澳大利亞開發的枯草芽孢桿菌A-13對麥類胡蘿卜立枯病以及其他土傳性病害具有很好的防治效果并具有增產作用。趙百鴿等用枯草芽孢桿菌B-903有效防治蘋果輪紋病，田間噴淋保護和貯前浸果處理還可降低爛果率。何紅等分離的辣椒內生枯草芽孢桿菌Bs-2和BS-1，對膠孢炭疽菌引起的辣椒苗和果炭疽病有良好的防治效果，菌株培養液對苗炭疽病的防效為81.5% 93.3%，對果炭疽病的防效為80% 100% ο小麥全蝕病(Take-all)是由禾頂囊殼小麥變種ipaeumannomyces graminis var.tritici)侵染小麥根部引起的一種世界毀滅性病害。該病是一種典型的土傳病害，病菌從小麥苗期至成株期均可危害，而且該病一旦發生，蔓延速度很快，危害嚴重。發病輕者可造成小麥減產10% 20%，嚴重時可達50%以上，甚至絕收。對于該病的防治，目前仍然以化學防治為主，缺乏有效的抗病品種和高效的生防制劑，利用微生物之間的拮抗作用對小麥全蝕病進行生物防治具有廣闊的應用前景。
技術實現思路
本專利技術要解決的技術問題是提供一種具有拮抗小麥全蝕病作用和廣譜的抑菌效果的枯草芽孢桿菌YB-05及其生物制劑，并給出了其生物制劑的方制備方法。為解決上述技術問題，本專利技術采用的技術方案是: 分離出了一種枯草芽孢桿菌YB-05，其保藏編號為CGMCC N0.6498。制備出一種微生物制劑，所含活性成分為上述枯草芽孢桿菌YB-05或/和其代謝產物。所述枯草芽孢桿菌YB-05在防治小麥全蝕病中的應用，種子拌種處理，種子加水比例3:100，將藥劑按比例與水充分混合，均勻拌種后，敞開晾干備用。在小麥拔節期和抽穗期YB-05制劑防治效果較好，收獲期防治效果最好為YB-05，與12.5%全蝕凈相當，顯著高于市售生防制劑的77.8%，表明YB-05持效期較長，在田間表現很好的防治效果。本專利技術具有積極有益的效果: 所分離出的枯草芽孢桿菌YB-05 CGMCC N0.6498對小麥全蝕的抑菌帶邊緣清晰且抑菌效果明顯，發現其表現出較為廣譜的抑菌效果，其中對番茄灰霉病菌、棉花黃萎病菌、小麥全蝕病菌等的抑菌效果較好。在小麥全蝕病的生物防治中具有重要的應用價值。田間在小麥拔節期和抽穗期YB-05制劑防治效果較好，收獲期防治效果最好為YB-05，與12.5%全蝕凈相當，顯著高于市售生防制劑的77.8%，表明YB-05持效期較長，在田間表現很好的防治效果。本專利技術所述枯草芽孢桿菌YB-05，已于2012年9月3日保藏在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，其簡稱為CGMCCJia:北京市朝陽區北辰西路I號院3號中國科學院微生物研究所，該還枯草芽孢桿菌YB-05的保藏編號為CGMCC N0.6498。附圖說明圖1:菌株YB-05對小麥全蝕病的抑菌效果 圖2:菌株YB-05的菌落特征 圖3:菌株YB-05的分子進化樹圖。具體實施例方式為了使本專利技術更加容易理解，下面結合具體實施例，進一步闡述本專利技術。應理解，這些實施例僅用于說明本專利技術而不用于限止本專利技術的范圍，下列實施例中未提及的具體實驗方法，通常按常規實 驗方法進行。實施例1枯草芽孢桿菌YB-05的分離、篩選 土樣采集:在商水縣譚莊鎮小麥田小麥根際，采用五點采樣，采樣時鏟去表層5 cm土層，取新鮮土樣500 g,用保鮮袋帶回。將5份土樣混勻后取500 g作為土壤樣品(采集時間:2010年4月20日；具體采集地點:河南省周口市商水縣譚莊鎮；采集人:楊麗榮)。枯草芽孢桿菌的分離與純化:稱取5g 土壤樣品，置于盛有45mL無菌蒸懼水的三角瓶中，小火加熱至懸浮液沸騰，維持15min，然后靜止5min，吸取上清液依次稀釋至10_2和10_3，將不同稀釋度的上層清液涂布于LB平板培養基上。并將培養基倒置于37°C恒溫培養過夜，最后挑取形態、色澤、大小與枯草芽孢桿菌類似的單菌落轉接到LB平板培養基上，于37°C培養2d后，記錄其編號，再挑選單菌落接種到LB斜面培養基上保存。經過土壤樣品微生物分離，共分離出98株類似枯草芽孢桿菌菌株，然后通過平板對峙法進行初篩得到對小麥全蝕病菌有拮抗作用的菌株36株，通過杯蝶法進行復篩得到拮抗作用較強的菌株6株(表I )，其中以YB-05菌株拮抗效果最好(見圖1)。表I六株拮抗菌對小麥全蝕病菌的抑制效果本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種枯草芽孢桿菌YB?05，其保藏編號為CGMCC?NO.6498。

【技術特征摘要】
1.一種枯草芽孢桿菌YB-05，其保藏編號為CGMCC N0.6498。2.一種微生物制劑，其特征在于，所含活性成分為權利要求1所述枯草芽孢桿菌YB-05或/和其代謝產物。3.權利要求2所述微生物制劑制備方法，包括如下步驟: (1)菌株培養與制備:將枯草芽孢桿菌YB-05接種到TSA試管斜面培養基上，28 35°C下培養24 36小時獲得菌體； (2)種子液制備:將步驟(I)制備的試管菌種接入TSB培養液內，在28 32°C下震蕩培養12 16小時制成種子液； (3)發酵培養基制備:分別取葡萄糖、玉米粉、黃豆餅粉、磷酸氫二鉀加水配制成含葡萄糖1.2%、玉米粉1.8%、黃豆餅粉3%、磷酸氫二鉀0.2%的培養液； (4)液體發酵生產:對發酵設備及培養基滅菌后，將種子液按5%的接種量接種于步驟配好的培養液，在27 34°C下發酵培養至少36 48小時后，收集發酵液即得菌劑...

【專利技術屬性】
技術研發人員：楊麗榮，薛保國，全鑫，馬毅輝，
申請(專利權)人：河南省農業科學院植物保護研究所，
類型：發明
國別省市：