本發(fā)明專利技術(shù)公開了一種卷曲乳桿菌及其應(yīng)用，所述卷曲乳桿菌在中國普通微生物菌種保藏管理中心的保藏編號為CGMCC?No.6406。所述卷曲乳桿菌具有高耐酸性、高產(chǎn)過氧化氫特性和抑制陰道致病菌生長的作用，還涉及卷曲乳桿菌LCR15在調(diào)節(jié)陰道菌群、預(yù)防和治療陰道炎方面的應(yīng)用。
【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)涉及一種乳桿菌屬的新菌株及其應(yīng)用，更準(zhǔn)確地說，本專利技術(shù)描述了卷曲乳桿菌Hactobacillus crispatus)的一個新菌株LCR15,及其高耐酸性、高產(chǎn)過氧化氫特性、對陰道致病菌的抑菌作用和預(yù)防與治療陰道炎的功能。
技術(shù)介紹
健康婦女陰道內(nèi)存在多種微生物，它們與宿主、環(huán)境之間構(gòu)成了相互制約、相互協(xié)調(diào)、動態(tài)平衡的陰道微生態(tài)系統(tǒng)。健康婦女的陰道菌群主要由乳桿菌構(gòu)成，包括卷曲乳桿菌、詹氏乳桿菌和格氏乳桿菌等。正常情況下乳桿菌對陰道可以起到保護(hù)作用，而以乳桿菌占優(yōu)勢的陰道微生態(tài)的紊亂可以導(dǎo)致陰道炎。細(xì)菌性陰道炎(BV )是婦科的常見病、多發(fā)病。它是由于陰道內(nèi)微生態(tài)平衡失調(diào)、厭氧菌和陰道加德納菌過盛生長、兼性厭氧性乳桿菌受抑制所引起的一種陰道粘膜炎癥性表現(xiàn)的綜合征。應(yīng)用抗生素治療，雖然可暫時緩解BV的癥狀，但也使本已減少的乳桿菌進(jìn)一步減少，加重陰道微生態(tài)失調(diào)，從而使BV反復(fù)復(fù)發(fā)。產(chǎn)H2O2乳桿菌是健康婦女陰道內(nèi)的優(yōu)勢菌，是保護(hù)女性陰道免受病原體感染的重要因素。另外乳桿菌代謝產(chǎn)生的酸和一些抗微生物因子也可有效地抑制其他細(xì)菌的生長繁殖。有學(xué)者通過微生物培養(yǎng)鑒定發(fā)現(xiàn)，產(chǎn)生H2O2的乳桿菌的缺乏，可使陰道加德納菌、厭氧革蘭氏陰性桿菌、人型支原體、衣原體等增加。卷曲乳桿菌為主要定植于人體陰道中的一種乳桿菌，也可定植于人體口腔和腸道。卷曲乳桿菌屬于幾種健康婦女陰道中的主要產(chǎn)H2O2的菌之一。很多研究表明，卷曲乳桿菌不但可改變陰道PH值(通過發(fā)酵產(chǎn)生乳酸)，而且可以對陰道pH值變化做出反應(yīng)。健康陰道PH值在4.0左右，受到微生物感染后，其環(huán)境pH值會上升至中性左右。卷曲乳桿菌可能會具有以下三種生理作用:一、產(chǎn)生乳酸，降低陰道內(nèi)環(huán)境的PH值，抑制非嗜酸性微生物的生成，刺激嗜酸性微生物的生成；二、產(chǎn)生H2O2調(diào)節(jié)陰道微生態(tài)平衡，防止外籍菌侵入引起的感染；三、粘附抑制，卷曲乳桿菌能夠粘附于陰道上皮細(xì)胞表面，同時抑制金黃色葡萄球菌、大腸桿菌對陰道上皮細(xì)胞的粘附作用。
技術(shù)實現(xiàn)思路
本專利技術(shù)的目的是提供一種卷曲乳桿菌LCR15，具有耐酸及高產(chǎn)過氧化氫特性，對陰道致病菌有抑菌作用，具有預(yù)防和治療陰道炎的功能。實現(xiàn)上述專利技術(shù)目的的解決方案是:一種卷曲乳桿菌，所述卷曲乳桿菌在中國普通微生物菌種保藏管理中心的保藏編號為CGMCC N0.6406。上述卷曲乳桿菌LE16直接自健康人體腸道中分離獲得，已于2012年7月31日保藏于中國普通微生物菌種保藏管理中心(簡稱06110:，地址為:北京市朝陽區(qū)北辰西路I號院，中國科學(xué)院微生物研究 所)，保藏登記號為CGMCC N0.6406。所述的卷曲乳桿菌LCR15在抑制陰道致病菌中的應(yīng)用。所述陰道致病菌是指枯草芽孢桿菌、糞腸球菌、淺黃色微球菌、金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、綠膿桿菌和蠟樣芽孢桿菌。所述的卷曲乳桿菌在調(diào)節(jié)陰道菌群、預(yù)防和治療陰道炎中的應(yīng)用。本專利技術(shù)的卷曲乳桿菌LCR15的形態(tài)為桿狀，具有強耐酸性以及高產(chǎn)過氧化氫的特性，革蘭氏染色陽性，不形成芽孢，產(chǎn)生乳酸，兼性厭氧。附圖說明圖1是本專利技術(shù)的卷曲乳桿菌在顯微鏡(X 1000倍)下的菌體形態(tài)。具體實施例方式本專利技術(shù)的卷曲乳桿菌LCR15利用葡萄糖、果糖、甘露糖、N-乙酰-葡萄糖胺、七葉靈、水楊甙(柳醇)、纖維二糖、麥芽糖、乳糖、蜜二糖、鹿糖、棉籽糖、淀粉和肝糖(糖原)，不利用甘油、赤癬醇、D-阿拉伯糖、L-阿拉伯糖、核糖、D-木糖、L-木糖、阿東醇、β -甲基-D-木糖甙、半乳糖、山梨糖、鼠李糖、衛(wèi)矛醇、肌醇、甘露醇、山梨醇、α -甲基-D-甘露糖甙、α -甲基-D-葡萄糖甙、苦杏仁甙、熊果甙、海藻糖(草糖)、菊糖、松叁糖、木糖醇、龍膽二糖、D-松二糖、D-來蘇糖、D-塔格糖、D-巖糖、L-巖糖、D-阿糖醇、L-阿糖醇、匍萄糖酸鈉、2-酮基-葡萄糖酸鈉和5-酮基-葡萄糖酸鈉。本專利技術(shù)的卷曲乳桿菌LCRl5發(fā)酵過程:于MRS液體培養(yǎng)基中37°C培養(yǎng)24h。實施例1:菌株鏡檢無菌條件下用接種環(huán)挑卷曲乳桿菌LCR15，涂于載玻片上，制片并革蘭氏染色，在顯微鏡下觀察菌體形態(tài)。實施例2 =MRS平板純化分離無菌條件下用接種環(huán)挑卷曲乳桿菌LCR15，在MRS平板上劃線，平板置于培養(yǎng)箱中37°C培養(yǎng)48h，挑選單菌落進(jìn)行鏡檢，達(dá)到菌株純種分離。實施例3:菌株發(fā)酵用接種環(huán)將卷曲乳桿菌LCR15從斜面上挑取二環(huán)至裝有15ml MRS液體培養(yǎng)基中，37°C培養(yǎng)24h，再以1%接種量接入15ml MRS液體培養(yǎng)基中，37°C培養(yǎng)24h，即得卷曲乳桿菌LCRl5發(fā)酵液。實施例4:卷曲乳桿菌LCR15的16S rDNA部分序列(見序列表)。實施例5:卷曲乳桿菌LCR15耐酸性能卷曲乳桿菌LCR15菌株于MR S液體培養(yǎng)基中37°C培養(yǎng)24小時后，離心收集菌體，取1.0ml細(xì)胞重懸液至ρΗ3.0、ρΗ4.0和ρΗ5.0的9.0ml無菌PBS中，37°C處理0、1、2、3小時后進(jìn)行活菌計數(shù)分析(表I)。本文檔來自技高網(wǎng)...
【技術(shù)保護(hù)點】
一種卷曲乳桿菌，其特征在于，所述卷曲乳桿菌在中國普通微生物菌種保藏管理中心的保藏編號為CGMCC?NO.6406。
【技術(shù)特征摘要】
1.一種卷曲乳桿菌，其特征在于，所述卷曲乳桿菌在中國普通微生物菌種保藏管理中心的保藏編號為CGMCC N0.6406。2.權(quán)利要求1所述的卷曲乳桿菌LCR15在抑制陰道致病菌中的應(yīng)用。3.根據(jù)權(quán)利要求2...
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：張旻，杭曉敏，張和春，夏祎稚，陳培青，
申請(專利權(quán))人：上海交大昂立股份有限公司，上海諾德生物實業(yè)有限公司，
類型：發(fā)明
國別省市：
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