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    用于提高鐵皮石斛結實率的培養基及該培養基的制備方法技術

    技術編號:8741079 閱讀:191 留言:0更新日期:2013-05-29 18:14
    本發明專利技術公開了一種用于提高鐵皮石斛結實率的培養基,其特征在于:包括改良MS+白糖25~40g/L+瓊脂粉5.5~10g/L+NAA0.2~0.5mg/L+土豆汁30~50ml/L+紅薯汁30~50ml/L+活性炭粉0.5~0.8g/L;其中,改良MS培養基中KNO3、KH2PO4和H3BO3用量為MS培養基中KNO3、KH2PO4和H3BO3用量的三倍,其余組分含量不變。該培養基通過采用特定含量的鐵皮石斛改良MS培養基、NAA、土豆汁和紅薯汁的共同協同作用,不僅為鐵皮石斛的結實培養提供豐富的氮、磷等營養元素,成本低,并且顯著激活鐵皮石斛結實的關鍵因子,從而大大提高鐵皮石斛的結實率。

    【技術實現步驟摘要】

    本專利技術屬于生物
    ,具體涉及一種。
    技術介紹
    鐵皮石斛又稱黑節草,屬蘭科附生蘭類,為多年生草本植物。鐵皮石斛是石斛中的極品,因其表皮呈鐵綠色而得名,是著名的觀賞兼藥用蘭花;現有技術中,對鐵皮石斛的培養階段中,大多對外植體原球莖進行誘導培養、增殖、分化、生化培養,得到小苗,但是對后期的試管結實的研究比較少;鐵皮石斛對生境條件要求苛刻,難結實,因此,對鐵皮石斛結實的培養對提高植物結實機理研究具有非常重要的意義;而現有的鐵皮石斛結實過程中,授粉后植株一般沒有單獨特殊的營養供應導致營養元素不充足,直接影響果實發育,造成果夾小,結實率低; 并且,通常情況下,培養基的制備過程中一般采用熱灌裝的方式,即白糖和瓊脂粉均是經加熱煮沸后倒入灌裝機中灌裝,該方法制備出的培養基營養元素流失嚴重,灌裝不均勻,不便于結實的培養。
    技術實現思路
    本專利技術的目的在于提供一種,該培養基克服現有技術中鐵皮石斛結實階段營養不良導致結實率低、果夾小的問題,誘導鐵皮石斛結實,提高鐵皮石斛結實率。為了達到 上述專利技術目的,本專利技術采用的技術方案是:提供一種用于提高鐵皮石斛結實率的培養基,其特征在于:包括 改良 MS+ 白糖 25 40g/L+ 瓊脂粉 5.5 10 g/L+NAA 0.2 0.5mg/L+ 土豆汁 30 50ml/L+紅薯汁3(T50ml/L+活性炭粉0.5 0.8g/L ;其中,改良MS培養基中KN03、KH2PO4和H3BO3用量為MS培養基中KNO3、KH2PO4和H3BO3用量的三倍,其余組分含量不變。本專利技術的用于提高鐵皮石斛結實率的培養基,包括 改良 MS+ 白糖 25g/L+ 瓊脂粉 5.5g/L+NAA 0.2mg/L+ 土豆汁 30ml/L+ 紅薯汁 30ml/L+活性炭粉0.5g/L ;其中,改良MS培養基中KN03、KH2PO4和H3BO3用量為MS培養基中ΚΝ03、KH2PO4和H3BO3用量的三倍,其余組分含量不變。本專利技術的用于提高鐵皮石斛結實率的培養基中,每升改良MS培養基中含有的組分及各組分的重量如下:NH4N03165mg、KNO3 5700mg、CaCl2.2H20 440mg、MgSO4.7H20370mg、KH2PO4 510mg、KI 0.83mg、H3BO3 18.6mg、MnSO4.H2O 16.9mg、ZnSO4.7H20 8.6mg、Na2MoO4.2H20 0.25mg、CuSO4.5H20 0.025mg、CoCl2.6H20 0.025mg、FeSO4.7H20 27.8mg、Na2-EDTA.2Η20 37.3mg、肌醇100 mg、煙酸0.5 mg、鹽酸卩比P多醇0.5 mg、鹽酸硫胺素0.1 mg、甘氨酸2 mg ;這種改良的MS培養基通過將NH4N03、KH2PO4和H3BO3的用量增加,使氮和磷的元素含量大大增加,更有利地促進果實的發育。上述用于提高鐵皮石斛結實率的培養基的配制方法包括以下步驟: a、首先將白糖和瓊脂粉進行預處理:將白糖和瓊脂粉混合,再加入蒸餾水溶解,靜置4飛小時;其中,混合后的白糖和瓊脂粉與蒸餾水的重量比為1:10 ; b、改良MS培養基母液的配制,包括母液A1、母液A2、母液A3、母液A4、母液B、母液C和母液D的配制,其中 母液Al的配制:稱取255g KH2PO4置于燒杯中,加入蒸懼水攪拌溶解,定容至5000ml,保存到棕色磨合瓶中; 母液A2的配制:稱取2850g KNO3置于燒杯中,加入蒸懼水攪拌溶解,定容至5000ml,保存到棕色磨合瓶中; 母液A3的配制:稱取825g NH4N03、185g MgSO4.7H20置于燒杯中,加入蒸餾水攪拌溶解,定容至5000ml,保存到棕色磨合瓶中; 母液A4的配制:稱取220mg CaCl2.2H20置于燒杯中,加入蒸懼水攪拌溶解,定容至5000ml,保存到棕色磨合瓶中;母液 B 的配制:分別稱量 0.83g ΚΙ、18.6g H3BO3'16.9g MnSO4.Η20、8.6g ZnSO4.7Η20、0.25g Na2MoO4.2Η20、0.025g CuSO4.5H20 和 0.025g CoCl2.6H20,加入燒杯中溶解,定容至5000ml,保存到棕色磨合瓶中; 母液C的配制:分別稱量100 g肌醇、0.5 g煙酸、0.5 g鹽酸吡哆醇、0.1 g鹽酸硫胺素和2 g甘氨酸,加入燒杯中溶解,定容至5000ml,保存到棕色磨合瓶中; 母液 D 的配制:分別稱量 27.8g FeSO4.7Η20、37.3g Na2-EDTA.2H20 分別加入 1500ml蒸餾水溶解,然后將兩種溶液 混合,加熱煮沸15分鐘,并不斷攪拌,充分螯合,再定容至5000ml,保存到棕色磨合瓶中; C、分別稱取土豆和紅薯,洗凈,削皮,切片,加入水煮沸20分鐘,并不斷攪拌,過濾取其汁液,分別得到土豆汁和紅薯汁,冷卻至40°C以下備用; d、將預處理的白糖和瓊脂水溶液、IOml母液A1、A2、A3、A4和5 ml母液B、C、D分別倒入灌裝機中,再加入NAA、土豆汁、紅薯汁及活性炭粉,加水定容,并攪拌,調節pH值至5.8,攪拌15min后灌裝,在121°C、0.16MPa的條件下滅菌25分鐘,冷凝后制得;其中,灌裝時間為Ils,間歇時間為0.8s。本專利技術的用于提高鐵皮石斛結實率的培養基通過采用特定含量的鐵皮石斛改良MS培養基、NAA、土豆汁和紅薯汁的共同協同作用,不僅為鐵皮石斛的結實培養提供豐富的氮、磷等營養元素,成本低,并且顯著激活鐵皮石斛結實的關鍵因子,從而大大提高鐵皮石斛的結實率;本專利技術提供的用于提高鐵皮石斛結實率的培養基的制備方法通過將瓊脂粉及白糖進行預處理及采用冷灌裝方式,可大大減少微量元素、維生素及植物激素等營養元素的損失,并且制備的培養基硬度適中,顏色白中透亮,為鐵皮石斛結實提供了關鍵的培養基條件;經該培養基培養后的鐵皮石斛果夾直徑可達0.8^1cm,結實率高達90%。具體實施例方式下面結合實施例對本專利技術進行詳細的描述,但它們不是對本專利技術的進一步限制。實施例1 該用于提高鐵皮石斛結實率的培養基的配方為:改良MS+白糖25g/L+瓊脂粉5.5g/L+NAA 0.2mg/L+ 土豆汁 30ml/L+ 紅薯汁 30ml/L+ 活性炭粉 0.5g/L ; 其中,每升改良MS培養基中含有的組分及各組分的重量如下=NH4NO3 165mg、KN035700mg、CaCl2.2H20 440mg、MgSO4.7H20 370mg、KH2PO4 5IOmg、KI 0.83mg、H3BO3 18.6mg、MnSO4.H2O 16.9mg、ZnSO4.7H20 8.6mg、Na2MoO4.2H20 0.25mg、CuSO4.5H20 0.025mg、CoCl2.6Η20 0.025mg、FeSO4.7H20 27.8mg、Na2-EDTA.2H20 37.3mg、肌醇 100 mg、煙酸 0.5mg、鹽酸卩比卩多醇0.5 mg、鹽酸硫胺素0.1 mg、甘氨酸2 mg。上述用于提高鐵皮石斛結實率的培養基的配制過程為: (1)首先將白糖和瓊脂粉進行預處理:將白糖和瓊脂粉混合,再加入10倍重量本文檔來自技高網...

    【技術保護點】
    一種用于提高鐵皮石斛結實率的培養基,其特征在于:包括改良MS+白糖25~40g/L+瓊脂粉5.5~10?g/L+NAA?0.2~0.5mg/L+土豆汁30~50ml/L+紅薯汁30~50ml/L+活性炭粉0.5~0.8g/L;其中,改良MS培養基中?KNO3、KH2PO4和H3BO3用量為MS培養基中KNO3、KH2PO4和H3BO3用量的三倍,其余組分含量不變。

    【技術特征摘要】

    【專利技術屬性】
    技術研發人員:林忠全
    申請(專利權)人:四川深達生物科技有限公司
    類型:發明
    國別省市:

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