【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及一種提高肌細胞生成素(MyoG是myogenin的縮寫)基因啟動子活性的方法，屬于遺傳工程
技術介紹
真核生物的基因表達調控是一個復雜而嚴密的過程。在轉基因動物的研究中，獲得能廣泛應用的高效特異性的啟動子對于外源基因的表達具有十分重要的意義。哺乳動物核心啟動子包括TATA盒以及啟動子近端元件,位于轉錄起始位點上游大約200至300bp。廣義啟動子包括啟動子近端元件、增強子和沉默子等所有順式調控元件，一般至少有2至3kb以上的長度。實際上核心啟動子是RNA聚合酶識別和結合，并使基因轉錄的主要位點。編碼蛋白的基因核心啟動子主要與通用轉錄因子II (TFII)結合。通用轉錄因子II (TFII)的成分TFIID,可識別TATA盒，(又名TATA框、TATA box / Hogness box,位于轉錄起始位點上游約25bp處)。TF I1-D、B、F及RNA聚合酶II結合形成一個基本的起始復合物，使RNA聚合酶II磷酸化，啟動轉錄，RNA聚合酶可以特異性識別和結合的DNA序列。啟動子是基因(gene)的一個組成部分，控制基因表達(轉錄)的起始時間和表達的程度。啟動子(Promoters)就像“開關”，決定基因的活動。既然基因是成序列的核苷酸(nucleotides),那么啟動子也應由DNA組成。啟動子本身并不控制基因活動，而是通過與稱為轉錄(transcription)因子的這種蛋白質(proteins)結合而控制基因活動的。轉錄因子就像一面“旗子”，指揮著酶(enzymes) (RNA聚合酶polymerases)的活動。這種酶制造著...
【技術保護點】
一種提高肌細胞生成素（MyoG）基因啟動子活性的方法，其特征在于通過克隆MyoG基因5′端調控區長度為2125bp的核酸序列，采用啟動子缺失片段活性分析的方法獲得1個長度為373bp，且具有較高肌肉特異性啟動子活性的較為理想的缺失片段即pGL3?MyoGpro373，該片段是MyoG基因啟動子的核心片段，在373bp缺失片段內部通過生物信息學分析結果，又對其內部具有SP1正調控作用的啟動子元件進行克隆，并將這兩個片段進行串聯，即將新克隆的具有SP1正調控作用的啟動子元件連接到pGL3?MyoGpro373的373缺失片段之前，從而構建了一個含有兩個拷貝數啟動子調控元件的表達載體，稱為pGL3?MyoGpro373?double，即具有“double”特征的啟動子序列，其堿基組成Seq?ID?No:2所示。
【技術特征摘要】
【專利技術屬性】
技術研發人員：李樹峰，佟慧麗，嚴云勤，金慧然，王鑫，李光鵬，
申請(專利權)人：東北農業大學，
類型：發明
國別省市：
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