一種脂肪酶催化合成克林霉素脂肪酸酯的方法技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)公開了一種脂肪酶催化合成克林霉素脂肪酸酯的方法。該方法包括下述步驟：在脂肪酶的催化作用下，使克林霉素與脂肪酸和/或脂肪酸酯在20～80℃的條件下，反應0.05～72小時，反應液經(jīng)過分離純化得到克林霉素脂肪酸酯。其中，克林霉素與脂肪酸和/或脂肪酸酯的摩爾比為1∶0.1～1∶10；脂肪酶的用量為克林霉素質(zhì)量的0.01～10倍。本發(fā)明專利技術(shù)首次實現(xiàn)了克林霉素脂肪酸酯的酶催化合成，避免了該產(chǎn)品在化學方法合成中對克林霉素中3，4位羥基的保護和脫保護過程，減少了工藝流程，具有催化效率高、選擇性好、穩(wěn)定性好等特點。

【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】

本專利技術(shù)涉及。
技術(shù)介紹
克林霉素脂肪酸酯是由克林霉素2號位羥基與脂肪酸或脂肪酸酯進行酯化或轉(zhuǎn)酯化合成得到；而鹽酸克林霉素棕櫚酸酯是目前克林霉素脂肪酸酯中唯一經(jīng)FDA批準的臨床常用的抗生素。克林霉素棕櫚酸酯是克林霉素的前體藥物，在體外無抗菌活性，在體內(nèi)經(jīng)酯酶水解形成克林霉素而發(fā)揮抗菌活性，克林霉素的抗菌機理與大環(huán)內(nèi)酯類抗生素相似，通過與細菌核糖核蛋白體50s亞單位結(jié)合，抑制肽鏈的延長和細菌蛋白質(zhì)的合成；同時清除細菌表面A蛋白和絨毛狀外衣，使其易被吞噬和殺滅而達到抑制細菌作用。臨床上鹽酸克林霉素主要治療厭氧細菌的感染，亦可治療原生動物疾病，如瘧疾。它是痤瘡的常用外用處方藥，并可有效治療抗藥性金黃色葡萄球菌。但克林霉素味道極苦，而克林霉素棕櫚酸酯作為前體藥物則苦味顯著降低適合口服。克林霉素棕櫚酸酯化學名是6-(1-甲基-反-4-丙基-L-2-吡咯烷甲酰氨基)-1-硫代-7 (S)-氯-6, 7,8- 二脫氧-L-蘇式-a -D-半乳羊批喃糖苷2_掠櫚酸酯鹽酸鹽，分子式C34H63ClN2O6S,分子量699.87，結(jié)構(gòu)式如下:權(quán)利要求1.一種制備克林霉素脂肪酸酯的方法，包括下述步驟:在脂肪酶的催化作用下，使克林霉素與脂肪酸和/或脂肪酸酯進行反應，得到所述克林霉素脂肪酸酯。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于:所述克林霉素與脂肪酸和/或脂肪酸酯的摩爾比為1: 0.1 1: 10，優(yōu)選1: 2 1: 5。3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于:所述脂肪酶的用量為克林霉素質(zhì)量的0.01 10倍，優(yōu)選I 5倍。4.根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一項所述的方法，其特征在于:所述反應的反應溫度為20 80°C，優(yōu)選40 60°C ;反應時間為0.05 72小時，優(yōu)選24 48小時。5.根據(jù)權(quán)利要求1-4中任一項所述的方法，其特征在于:所述反應的反應介質(zhì)為含水量不高于0.5%的有機溶劑；所述有機溶劑具體選自下述至少一種:乙腈、丙酮、石油醚、甲苯、正己烷、環(huán)己烷、庚烷、辛烷、壬烷和癸烷。6.根據(jù)權(quán)利要求1-5中任一項所述的方法，其特征在于:所述克林霉素選自下述至少一種:鹽酸克林霉素、克林霉素游離堿、克林霉素醇化物和3，4_縮酮化克林霉素。7.根據(jù)權(quán)利要求1-6中任一項所述的方法，其特征在于:所述脂肪酸和/或脂肪酸酯選自下述至少一種:棕櫚酸、棕櫚酸乙烯酯、棕櫚酸甲酯、棕櫚酸乙酯、癸酸、癸酸甲酯、癸酸乙酯、月桂酸、月桂酸甲酯、月桂酸乙酯、肉豆蘧酸、肉豆蘧酸甲酯、肉豆蘧酸乙酯、硬脂酸、硬脂酸甲酯、硬脂酸乙酯、油酸、油酸甲酯、油酸乙酯或以上混合物；優(yōu)選棕櫚酸、棕櫚酸乙烯酯、棕櫚酸甲酯、棕櫚酸乙酯或其混合物。8.根據(jù)權(quán)利要求1-7中任一項所述的方法，其特征在于:所述脂肪酶選自下述任意一種:南極假絲酵母脂肪酶，褶皺 假絲酵母脂肪酶，豬胰脂肪酶，南極假絲酵母脂肪酶B，米黑根毛霉脂肪酶和疏棉狀嗜熱絲孢菌脂肪酶。9.根據(jù)權(quán)利要求1-8中任一項所述的方法，其特征在于:所述反應在搖床中進行，所述搖床的轉(zhuǎn)速為0-1000r/min。10.根據(jù)權(quán)利要求1-9中任一項所述的方法，其特征在于:所述方法還包括對得到的克林霉素脂肪酸酯進行純化的步驟。全文摘要本專利技術(shù)公開了。該方法包括下述步驟在脂肪酶的催化作用下，使克林霉素與脂肪酸和/或脂肪酸酯在20～80℃的條件下，反應0.05～72小時，反應液經(jīng)過分離純化得到克林霉素脂肪酸酯。其中，克林霉素與脂肪酸和/或脂肪酸酯的摩爾比為1∶0.1～1∶10；脂肪酶的用量為克林霉素質(zhì)量的0.01～10倍。本專利技術(shù)首次實現(xiàn)了克林霉素脂肪酸酯的酶催化合成，避免了該產(chǎn)品在化學方法合成中對克林霉素中3，4位羥基的保護和脫保護過程，減少了工藝流程，具有催化效率高、選擇性好、穩(wěn)定性好等特點。文檔編號C12P19/64GK103194511SQ20131007063公開日2013年7月10日 申請日期2013年3月6日 優(yōu)先權(quán)日2013年3月6日專利技術(shù)者李致賢, 戈鈞, 林萌萌, 張一飛, 盧滇楠, 劉錚 申請人:清華大學本文檔來自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護點】
一種制備克林霉素脂肪酸酯的方法，包括下述步驟：在脂肪酶的催化作用下，使克林霉素與脂肪酸和/或脂肪酸酯進行反應，得到所述克林霉素脂肪酸酯。

【技術(shù)特征摘要】

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：李致賢，戈鈞，林萌萌，張一飛，盧滇楠，劉錚，
申請(專利權(quán))人：清華大學，
類型：發(fā)明
國別省市：