脈絡通膠囊質量控制方法技術

本發明專利技術公開了脈絡通膠囊質量控制方法，該方法采用超高效液相色譜法檢測脈絡通膠囊。本發明專利技術通過大量實驗優選出最佳的流動相組成，梯度洗脫程序、流速，檢測波長和色譜柱等分析條件，經多次實驗驗證表明，本發明專利技術提供的脈絡通膠囊質量控制方法，穩定性和重復性好、分析速度快，分析效率高、分離度好，可以靈敏準確的定性、定量檢測目標化合物，從而可以客觀、全面、準確的評價脈絡通膠囊的質量，對控制脈絡通膠囊的質量和保證臨床療效具有重要意義。

【技術實現步驟摘要】

本專利技術涉及一種藥物制劑的質量控制方法，具體涉及脈絡通膠囊的質量控制方法。
技術介紹
脈絡通具有益氣活血、化瘀止痛、通脈活絡的功能。適用于胸痹引起的心胸疼痛、胸悶氣短、頭痛眩暈及冠心病、心絞痛具有上述諸癥，中風引起的肢體麻木、半身不遂等癥。脈絡通顆粒劑和片劑列入《國家基本醫療保險和工傷保險藥品目錄(2004版)》乙類藥品。脈絡通顆粒劑和膠囊劑均列入《江蘇省基本醫療保險和工傷保險藥品目錄》乙類藥品。江蘇揚子江藥業集團有限公司生產的脈絡通顆粒組方出自《中藥部頒標準》的“脈絡通顆?！?，且于1987年獨家生產、上市。南京海陵藥業有限公司生產的脈絡通膠囊組方與江蘇揚子江藥業集團有限公司生產的脈絡通顆粒相同。絡通膠囊的組方中，以黨參、當歸為君藥，益氣兼以養血；紅花、丹參、川芎、地龍為臣藥，輔助君藥達到活血通脈的功效；山楂為佐藥,通行氣血,活血祛瘀止痛；木賊、葛根、槐米為使藥,能夠升清通痹,助藥上行,直達病所。君臣佐使，全方配伍，益氣活血、化瘀止痛，適用于氣虛血瘀、心脈痹阻的冠心病心絞痛患者。由于脈絡通中藥成分復雜，現有的脈絡通質量檢測方法，為常規的高效液相檢測方法，分離效果差，檢測時間長，檢測靈敏度和準確度不高，穩定性也較差。因此為了控制好脈絡通膠囊制劑的臨床安全性，維護患者的利益，很有必要在現有技術的基礎之上研究設計出能準確檢測脈絡通膠囊制劑中有效成分的檢測方法。
技術實現思路
專利技術目的:本專利技術的目的是解決現有技術的不足，提供一種能夠很好的將脈絡通各成分分離，檢測靈敏度高，檢測速度快，檢測結果準確，可以客觀、全面、準確的評價脈絡通膠囊的質量，對控制脈絡通膠囊劑的質量和保證療效具有重要意義。技術方案:為了實現以上目的，本專利技術所提供的，包括以下步驟:(I)標準品溶液的制備:精密稱取葛根素對照品適量，加濃度30%乙醇制成每Iml中含80ug的葛根素對照品溶液；(2)脈絡通膠囊樣品溶液的制備:取脈絡通膠囊內容物，研細，精密稱取0.25g，置錐形瓶中，加濃度為35%的乙醇15ml，振蕩溶解，超聲提取，抽濾，合并濾液，置25ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，即得；(3)標準曲線的制備:取步驟⑴得到的標準品溶液注入超高效液相色譜儀制備標準曲線，色譜條件為:色譜柱:反相C18柱；流動相為甲醇和水，梯度洗脫，流速為0.4 0.6ml/min，檢測波長為250 260nm，柱溫為25 30°C ；(4)脈絡通膠囊樣品中葛根素的含量測定:精密吸取步驟(2)脈絡通膠囊樣品溶液1μ 1，注入超高效液相色譜儀分析10分鐘，色譜條件為:反相C18柱；流動相為甲醇和水；梯度洗脫，流速為0.4^0.6ml/min,檢測波長為25(T260nm，柱溫為25 30°C;并按步驟(3)標準曲線測量脈絡通膠囊中葛根素的含量。作為優選方案，本專利技術提供的，步驟(3)中以脈絡通膠囊的峰面積為縱坐標，濃度μ g/ml為橫坐標繪制標準曲線為:Y = 12262X-24.945,r=0.9999 ο作為優選方案，本專利技術所述的，步驟(3)和(4)所述的梯度洗脫方式為:O分鐘，甲醇和水的體積比為77:23 ；5分鐘，甲醇和水的體積比為77:23 ；5.1分鐘甲醇和水的體積比為30:70 ；7分鐘甲醇和水的體積比為30:70 ；7.1分鐘甲醇和水的體積比為77:23ο作為優選方案，以上所述的，步驟(3)和(4)所述的流速為0.4ml/min,檢測波長為250nm。作為優選方案，本專利技術所述的，步驟(3)和(4)所述的步驟⑶和⑷所述的柱溫為25°C。作為優選方案，本專利技術所述的，步驟(3)和(4)所述的反相 C18 柱為 Poroshell20SB-C18O作為優選方案，以上所述的，步驟(3)和(4)所述的超高效液相色譜儀的檢測器為DAD檢測器。本專利技術所述的，通過篩選不同濃度:20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%乙醇提取溶劑，實驗結果表明，濃度為30%乙醇具有提取效率最高，活性化合物提取率高。因此本專利技術選用濃度為30%乙醇作為提取溶劑。同時本專利技術對提取方法:回流提取法、超聲提取法、煎煮法等提取方法進行篩選，實驗結果表明，超聲提取法具有提取效率聞，提取完全等優點，因此本專利技術優選超聲提取法。脈絡通膠囊含有多味藥物，化學成分復雜，常規的高效液相色譜分離度差，檢測結果不準確，為了嚴格控制好脈絡通膠囊的質量，制定檢測脈絡通膠囊含量的方法，本專利技術經過大量實驗對流動相組成、流動相的洗脫程序、流速、檢測波長及色譜柱進行篩選。1、本專利技術針對脈絡通膠囊成分復雜，選用葛根素化合物作為目標檢測化合物，通過全波長掃描和3D等高線觀察，確定目標化合物在250nm處有較大的吸收，靈敏度高，因此本專利技術采用250nm作為檢測波長，可以準確靈敏的檢測到目標化合物。2、脈絡通膠囊成分復雜，在色譜柱上的分離度很差，目標化合物和其它成分無法很好分離，導致檢測結果不準確，本專利技術對流動相的組成進行了大量篩選，確定采用梯度洗脫，梯度洗脫方 式為:O分鐘，甲醇和水的體積比為77:23 ；5分鐘，甲醇和水的體積比為77:23 ；5.1分鐘甲醇和水的體積比為30:70 ；7分鐘甲醇和水的體積比為30:70 ；7.1分鐘甲醇和水的體積比為77:23。各化合物在色譜柱上能很好的分離，不會出現峰重疊等現象，目標化合物峰形好，能保證在色譜柱上有很好的分離度，從而能保證檢測結果準確。3、同時本專利技術還對流動相的流動速度進行了考察，如流速過快，分離度不夠理想，因此本專利技術分別考察了 1.5mL/min、lmL/min、0.8mL/min、0.6mL/min、0.5mL/min、0.4mL/min和0.2mL/min不同流速，實驗結果表明，當流動相的流速為0.4mL/min時，各化合物的峰形最好、分離度最好，理論塔板數最高，因此本專利技術采用流動相的流速為0.4mL/min。4、同時本專利技術對色譜柱的柱溫進行了篩選，考察了色譜柱在20 V、25 °C、28 V、30°C和35°C條件下化合物的分離效果，實驗結果表明，色譜柱在25°C條件下分離效果最好，分離重復性和穩定性最好。因此本專利技術采用色譜柱的柱溫為25°C。5、本專利技術采用超高效液相色譜分析目標化合物，選用安捷倫(Agilent) 1290Infinity系統。同時本專利技術對多種色譜柱也進行了篩選，實驗結果表明，Poroshel 120SB-C18柱的分離效果最好。因此，本專利技術以Poroshel 120SB_C18柱作為分析柱。有益效果:本專利技術提供的和現有技術相比具有以下優占-^ \\\.本專利技術首選超高效液相色譜儀，并且根據脈絡通膠囊中活性成分和雜質成分的結構性質特點，通過大量實驗篩選出最佳的流動相組成和梯度洗脫程序、流速，檢測波長、色譜柱等分析條件，經多次實驗驗證表明，本專利技術提供的可以快速，靈敏、準確的檢測目標活性成分，因此具有很高的分析效率，可以克服現有檢測方法分離速度慢，分離效果差，檢測靈敏度低、準確度低、穩定性差等諸多缺點，且本專利技術提供的質量檢測方法穩定性好、對各分析成分的分離度好，可定性、定量檢測分析各化合物。因此，本專利技術提供的可以客觀、全面、準確的評價脈絡通膠囊的質量，對控制脈絡通膠囊的質量和保證臨床療效具有重要意義。附圖說明圖1為葛根素標準品的超高本文檔來自技高網...

【技術保護點】
脈絡通膠囊質量控制方法，其特征在于，包括以下步驟：(1)標準品溶液的制備：精密稱取葛根素對照品，加濃度30%乙醇制成每1ml中含80ug的葛根素的對照品溶液；(2)脈絡通膠囊樣品溶液的制備：取脈絡通膠囊內容物，研細，精密稱取0.25g，置錐形瓶中，加濃度為35%的乙醇15ml，振蕩溶解，超聲提取，抽濾，合并濾液，置25ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，即得；(3)標準曲線的制備：取步驟(1)得到的標準品溶液注入超高效液相色譜儀制備標準曲線，色譜條件為：色譜柱：反相C18柱；流動相為甲醇和水，梯度洗脫，流速為0.4~0.6ml/min，檢測波長為250~260nm，柱溫為25~30℃；(4)脈絡通膠囊樣品中葛根素的含量測定：精密吸取步驟(2)脈絡通膠囊樣品溶液1μl，注入超高效液相色譜儀分析10分鐘，色譜條件為：反相C18柱；流動相為甲醇和水；梯度洗脫，流速為0.4~0.6ml/min，檢測波長為250~260nm，柱溫為25~30℃；并按步驟(3)標準曲線測量脈絡通膠囊中葛根素的含量。

【技術特征摘要】

【專利技術屬性】
技術研發人員：王麗楠，陶元景，
申請(專利權)人：揚子江藥業集團南京海陵藥業有限公司，
類型：發明
國別省市：