一種戊糖化合物的純化方法技術

本發明專利技術涉及一種利用陰離子交換色譜柱純化戊糖化合物的方法，所述的方法是將戊糖粗品上樣至的陰離子交換色譜柱上，利用水溶液洗脫。所述的方法純化效率高，操作簡便。

【技術實現步驟摘要】
一種戊糖化合物的純化方法
本專利技術涉及一種戊糖的純化方法，更具體的涉及一種制備磺達肝癸鈉的純品的方法。
技術介紹
磺達肝癸鈉（FondaparinuxSodium）是完全人工合成的硫酸五聚糖的鈉鹽，具有如下式（I）所示的化學結構：（I）。磺達肝癸鈉是一種抗凝血酶依賴性的Xa因子的間接抑制劑。已在法國、英國、德國、中國和美國等國上市，臨床上用于治療和預防深部靜脈血栓栓塞事件的發生，具有良好的抗血栓效果。由于磺達肝癸鈉的結構復雜，合成路線長，反應過程中會形成多種雜質，影響產品的安全性。而雜質的存在本身又會影響磺達肝癸鈉的穩定性，造成存放過程中的產品質量的下降。現有技術中，往往需要通過多次柱層析的方法純化，效率低。過長時間的柱層析，本身也會導致磺達肝癸鈉穩定性下降，產生其他降解雜質。US4818816公開了通過50步化學反應合成磺達肝癸鈉的方法，該方法中會產生多種寡糖混合物，尤其是最后一步反應中的氫化過程，會產生多聚物雜質影響磺達肝癸鈉的純度。該專利中同時公開了通過葡聚糖凝膠SephadexG-25柱純化磺達肝癸鈉的方法。按照該方法制備獲得的磺達肝癸鈉的純度低于90%。US2005020536公開了先通過活性炭純化磺達肝癸鈉的方法，獲得99%以上純度。并公開了通過兩次柱層析90%以上純度的磺達肝癸鈉，獲得大于99.7%以上純度的方法。該方法中，需要將活性炭用樹脂輔助劑固定在二維纖維素碟上，活性炭過濾需循環2小時，然后還需要經過微孔濾膜過濾，實際操作方法復雜，不易操作。因此，急需要一種操作簡單，快速有效的純化磺達肝癸鈉的方法。
技術實現思路
本專利技術的目的是提供一種制備如下式（I）所示的化合物的純品的方法，其特征在于采用陰離子交換樹脂純化磺達肝癸的鹽的粗品：：（I）。所述的磺達肝癸的鹽包括：鈉鹽、鉀鹽、銨鹽、鎂鹽等，優選鈉鹽。所述的陰離子交換樹脂的粒徑為2-100μm，優選粒徑為10-70μm。孔徑50-4000埃，孔徑優選100-1000埃。所述的陰離子交換樹脂包括：甲基丙烯酸酯聚合物或聚丙烯酸酯為基質的陰離子交換樹脂；或苯乙烯-二乙烯基苯聚合物為基質的陰離子交換樹脂。所述的陰離子交換樹脂是指在甲基丙烯酸聚合物基質或聚丙烯酸酯基質或苯乙烯-二乙烯基苯聚合物基質上鍵合陰離子官能團的樹脂。包括但不限于強堿性甲基丙烯酸聚合物陰離子樹脂，例如含有季銨基的樹脂；弱堿性陰離子樹脂，例如含有伯胺或腫胺基的樹脂。優選強堿性陰離子樹脂，例如帶有C1-C10的季銨基官能團的樹脂，優選帶有C1-C4的季銨基官能團的樹脂。更優選含有三甲基胺基官能團的甲基丙烯酸聚合物為基質或帶有C1-C4的季銨基官能團的苯乙烯-二乙烯基苯聚合物為基質的樹脂。進一步的，本專利技術所述的陰離子交換樹脂可以通過市售購買的方式獲得，例如甲基丙烯酸聚合物基質或聚丙烯酸酯基質的陰離子交換樹脂可選用購自TOSH公司的TSKgelBioAssistQ，TSKgelDNA-NPR，TSKgelSuperQ-5PW、SugarAXI柱等；或選用購自中國的納微科技的UniQ-50S、UniQ-50M、UniQ-30S、UniQ-10S等；苯乙烯-二乙烯基苯聚合物為基質的陰離子交換樹脂選用購自GE的MonoQ5/50柱、MonoQ4.6/50柱、MonoQ10/100柱、MonoQ4.6/100柱等；也可以通過自行制備的方式獲得，例如可以采用JP7735779、JP7758087或JP8253589公開的方法制備苯乙烯-二乙烯基苯陰離子交換樹脂。通常，UniQ-50S是粒徑50-70μm的均一粒徑的樹脂填料；TSKgelSuperQ-5PW是粒徑10-30μm的均一粒樹脂填料；MonoQ是粒徑10μm的均一粒樹脂填料。進一步的，本專利技術的目的是提供一種制備磺達肝癸鈉純品的方法，包括：（1）將磺達肝癸的鹽的粗品上樣至陰離子交換樹脂上；（2）用氯化鈉水溶液進行洗脫，分離雜質，獲得純化的磺達肝癸鈉。上述步驟（1）中，所述的磺達肝癸鹽包括鈉鹽、鉀鹽、銨鹽、鎂鹽等，優選鈉鹽；所述的粗品可以按照US4818816公開的方法制備。所述的粗品是指在HPLC的檢測條件下，磺達肝癸鈉的含量小于90%的混合物：可以是磺達肝癸鈉粗品溶解于水或獲得的溶液，也可以是任何過程得到的磺達肝癸鈉的反應液，或該反應液溶解于水獲得的混合物。所述的陰離子交換樹脂的粒徑為2-100μm，優選粒徑為10-70μm。孔徑50-4000埃，孔徑優選100-1000埃。所述的陰離子交換樹脂包括：甲基丙烯酸酯聚合物或聚丙烯酸酯為基質的陰離子交換樹脂或苯乙烯-二乙烯基苯聚合物為基質的陰離子交換樹脂。所述的甲陰離子交換樹脂是指在甲基丙烯酸聚合物基質或聚丙烯酸酯基質或苯乙烯-二乙烯基苯聚合物基質上鍵合陰離子官能團的樹脂。包括但不限于強堿性甲基丙烯酸聚合物陰離子樹脂，例如含有季銨基的樹脂；弱堿性陰離子樹脂，例如含有伯胺或腫胺基的樹脂。優選強堿性陰離子樹脂，例如帶有C1-C10的季銨基官能團的樹脂，優選帶有C1-C4的季銨基官能團的樹脂。更優選含有三甲基胺基官能團的甲基丙烯酸聚合物為基質或帶有C1-C4的季銨基官能團的苯乙烯-二乙烯基苯聚合物為基質的樹脂。進一步的，本專利技術所述的陰離子交換樹脂可以通過市售購買的方式獲得，例如甲基丙烯酸聚合物基質或聚丙烯酸酯基質的陰離子交換樹脂可選用購自TOSH公司的TSKgelBioAssistQ，TSKgelDNA-NPR，TSKgelSuperQ-5PW、SugarAXI柱等；或選用購自中國的納微科技的UniQ-50S、UniQ-50M、UniQ-30S、UniQ-10S等；苯乙烯-二乙烯基苯聚合物為基質的陰離子交換樹脂選用購自GE的MonoQ5/50柱、MonoQ4.6/50柱、MonoQ10/100柱、MonoQ4.6/100柱等；也可以通過自行制備的方式獲得，例如可以采用JP7735779、JP7758087或JP8253589公開的方法制備苯乙烯-二乙烯基苯陰離子交換樹脂。通常，UniQ-50S是粒徑50-70μm的均一粒徑的樹脂填料；TSKgelSuperQ-5PW是粒徑10-30μm的均一粒樹脂填料；MonoQ是粒徑10μm的均一粒樹脂填料。最優選的是聚丙烯酸酯為基質，用三甲基胺基官能團修飾的陰離子交換樹脂，粒徑10-70μm，孔徑100-1000埃。所述的磺達肝癸鈉粗品上樣的重量與樹脂的用量比（w/v，mg/ml）為1-20%，優選1-10%。所述的陰離子交換色譜柱長度為50-900mm；柱內徑4.6-100mm，所述的柱長度和柱內徑比為5:1-40:1，優選為10:1-20:1。柱長度通常和上樣量相關，少量純化時，可以選擇短小的柱子；而大量純化時，選擇長柱子。柱長和柱內徑的比例為5:1-40:1時，能夠有效的避免管壁效應；尤其是當柱長和柱內徑的比例在10:1-20:1的范圍內時，純化分離的效率較高，還避免了樹脂的浪費。所述的上樣，是指將磺達肝癸鈉溶于水或0-0.2M的氯化鈉水溶液中進行上樣，其中磺達肝癸鈉的濃度為1-20mg/ml，優選為5-10mg/ml。申請人研究過程中發現，上樣樣品的濃度影響純化過程的分辨率，當樣品濃度5-10mg/ml范圍內時，分離的分辨率最佳。上述步驟（2本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種制備如下式I所示的戊糖化合物的純品的方法，其特征在于采用陰離子交換樹脂純化磺達肝癸的鹽的粗品?????????????????????????????????????????????????（I）。362764dest_path_image001.jpg

【技術特征摘要】
1.一種制備磺達肝癸鈉純品的方法，包括：(1)將磺達肝癸鈉的粗品上樣至陰離子交換樹脂上；(2)用氯化鈉水溶液進行洗脫，分離雜質，獲得純化的磺達肝癸鈉；所述陰離子交換樹脂為MonoQ柱。2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(1)中所述的陰離子交換樹脂的粒徑為10μm；孔徑50-4000埃。3.根據權利要求2所述的方法，其特征在于，步...

【專利技術屬性】
技術研發人員：袁建棟，蔣翠英，
申請(專利權)人：博瑞生物醫藥技術蘇州有限公司，
類型：發明
國別省市：