本發明專利技術涉及一種人乳頭瘤病毒HPV致癌基因蛋白作為抗原，用于檢測抗人乳頭瘤病毒HPV的抗體，其選自如SEQ?ID?NO:1、SEQ?ID?NO:2、SEQ?ID?NO:3、SEQ?ID?NO:4、SEQ?ID?NO:5所示的氨基酸序列或者與它們具有80%同源性的氨基酸序列中的一種或幾種。還提供了包括上述抗原的免疫檢測試劑盒。以及上述抗原和試劑盒的應用。本發明專利技術的用于檢測抗HPV抗體的抗原可以高靈敏度、高特異性和高穩定性地檢測血液或唾液中的HPV抗體，從而可以為醫生準確診斷病人有HPV病毒致癌基因轉化的宮頸上皮內瘤變和子宮頸癌帶來依據，進而及時采取治療，以防止癌癥發生，或癌癥擴散，及時減輕病人痛苦，由其制成的免疫檢測試劑盒可以快速簡單準確地檢測血液或唾液中的HPV抗體，適于大規模推廣應用。
【技術實現步驟摘要】
用于檢測抗人乳頭瘤病毒抗體的抗原及相關免疫檢測試劑盒
本專利技術涉及抗體檢測
，特別涉及抗人乳頭瘤病毒(HumanPapillomavirus, HPV)抗體檢測
，具體是指一種用于檢測抗人乳頭瘤病毒抗體的抗原及相關免疫檢測試劑盒，尤其可用于國內流行的高危險型人乳頭瘤病毒(HPV)亞型HPV16 和 HPV18。
技術介紹
子宮頸癌是第二位常見女性惡性腫瘤，人乳狀瘤病毒(HPV)是其發生的必要條件。盡管人群HPV感染很普遍，如:宮頸癌高發區婦女35歲以后感染率仍高達20.8%。但超過80%的HPV DNA陽性婦女不會進展為癌癥或癌前病變。因此HPV DNA檢測缺陷是無法分辨一過性感染和可引起宮頸病變的感染，導致較高假陽性率。大量研究顯示，HPV致癌基因表達產物(癌蛋白oncoprotein)有很高的致癌活性，因此這些生物標志物有可以作為比HPVDNA更為準確有特異性的宮頸癌預測指標。高危HPV E2、E6、E7癌蛋白(oncoprotein)的表達水平和宮頸癌前病變不同階段直接相關。利用這一特性可以構建全新的宮頸癌分子篩查指標。對HPV致癌機理的 研究表明，高危型HPV的早期表達蛋白E6，E7蛋白在宮頸癌的發生中起著重要作用。在宮頸高度病變和癌癥患者的宮頸上皮細胞中HPV E6及E7蛋白一般呈過度表達，持續表達和過量表達的E6，E7致癌蛋白可與宿主細胞調控蛋白(如，P53和Rb蛋白等)相互作用，使腫瘤抑制因子失活，導致細胞永生化和惡性轉化。除了 HPV DNA檢測和HPV致癌蛋白檢測，血液(體液)中HPV抗體也證明對HPV感染及宮頸癌發病史有很大的相關性。HPV LI血液抗體可用標準ELISA方法檢測，提供HPV感染信息。隨著HPV感染時間的延長，HPV誘導產生了抗HPV抗體，故可檢測到血清中抗HPV抗體。Wikstrom等檢測了 47例男性現癥尖銳濕疣患者和32例曾有尖銳濕疣病史患者的男性對HPV6型和HPVll型衣殼蛋白的血清IgG抗體，并與205例無生殖器尖銳濕疣病史的男性比較，結果，血清中抗HPV6型的IgG抗體在曾有尖銳濕疣病史的男性中為35%，在現癥尖銳濕疣中為27%，而在對照組為10%。這表明抗HPV6IgG抗體的出現發生在尖銳濕疣病期的晚些時候，同時IgG陽性也反映曾感染過這種病毒。Stone等報道了利用此方法對于美國普通人群7218例HPV-16的感染率研究，結果表明女性陽性率17.9%,男性陽性率7.9% (Stone, K.M., et al., Seroprevalenceof HumanPapiIlomavirus Typel6Infection in the United States.2002.TheJournal of Infectious Diseases2002;186:1396-402)。 HPV LI 抗體 ELISA 方法在配合HPV疫苗(Merck公司Gardasil預防性疫苗)的研發及臨床試驗過程中曾被廣泛釆用。Luevano等用蛋白芯片例宮頸癌病人的血清樣品進行了高通量檢測分析(Luevano, M., et al., High-Throughput Profling of the Humoral Immune ResponsesAgainst Thirteen Human PapillomavirusTypes by Proteome Microarrays.2010.Virology.2010; 405 (I):31 - 40),分析 13 個 HPV 型的總共 54604 種蛋白的抗體 profiling,結果表明了血液中致癌蛋白的抗體與宮頸癌、高度病變、低度病變、及無癥狀普通人有較強的相關性(Luevano, M., et al., High-Throughput Profling of the HumoralImmune Responses Against Thirteen Human Papillomavirus Types by ProteomeMicroarrays.2010.Virology.2010;405(I):31 - 40)。因此，為了實現HPV抗體檢測的高靈敏度、高特異性和高穩定性，需要提供新的用于檢測抗人乳頭瘤病毒抗體的抗原。
技術實現思路
為了解決上述存在的問題，本專利技術的目的是提供一種用于檢測抗人乳頭瘤病毒抗體的抗原及相關免疫檢測試劑盒，該用于檢測抗人乳頭瘤病毒抗體的抗原可以高靈敏度、高特異性和高穩定性地檢測血液或唾液中的HPV抗體，從而可以為醫生準確診斷病人宮頸上皮內瘤變和子宮頸癌帶來依據，進而及時采取治療，以防止癌癥發生，或癌癥擴散，及時減輕病人痛苦，由其制成的免疫檢測試劑盒可以快速簡單準確地檢測血液或唾液中的HPV抗體，適于大規模推廣應用。為了實現上述目的，在本專利技術的第一方面，提供了一種用于檢測抗人乳頭瘤病毒抗體的抗原，其特點是，所述的用于檢測抗人乳頭瘤病毒抗體的抗原選自如SEQ ID N0:1所示的氨基酸序列、如SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列、如SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列、如SEQ ID NO: 4所示的氨基酸序列、如SEQ ID NO: 5所示的氨基酸序列、與SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列具有80%同源性的氨基酸序列、與SEQ ID NO: 2所示的氨基酸序列具有80%同源性的氨基酸序列、與SEQ ID NO: 3所示的氨基酸序列具有80%同源性的氨基酸序列、與SEQ ID NO:4所示的氨基酸序列具有80%同源性的氨基酸序列以及與SEQ ID N0:5所示的氨基酸序列具有80%同源性的氨基酸序列中的一種或幾種。較佳地，所述的用于檢測抗人乳頭瘤病毒抗體的抗原的第m+2位、第m+3位、第m+5位、第 m+6 位以及第 m+8-m+12 位氨基酸依次是 Asp、Ser、Glu、Glu、Asp、Glu、lie、Asp 和Gly，其中 m ^ O0較佳地，所述的用于檢測抗人乳頭瘤病毒抗體的抗原采用化學合成或生物工程方法獲得。例:重組蛋白，融合蛋白。在本專利技術的第二方面，提供了一種免疫檢測試劑盒，其特點是，包括上述的用于檢測抗人乳頭瘤病毒抗體的抗原。較佳地，所述免疫檢測試劑盒還包括載體，所述的用于檢測抗人乳頭瘤病毒抗體的抗原包被在所述載體上。較佳地，所述免疫檢測試劑盒還包括標記的抗人乳頭瘤病毒抗體的二抗。二抗用來檢測人血清中的抗體IgG，IgM，或IgA.所用標記物可以是辣根過氧化物酶，堿性磷酸酶，熒光分子FITC (或其它熒光標記)，化學發光檢測。檢測方法可以是顯色法，熒光方法，化學發光，電化學發光法進行定性、定量分析。更佳地，所述的標記的抗人乳頭瘤病毒抗體的二抗是辣根過氧化物酶標記的抗人乳頭瘤病毒抗體的二抗。在本專利技術的第三方面，提供了上述的用于檢測抗人乳頭瘤病毒抗體的抗原或上述的免疫檢測試劑盒在檢測人體液中抗人乳頭瘤病毒抗體中的應用。較佳地，所述體液是血液或唾液。本專利技術的有益效果在于:本專利技術的用于檢測抗人乳頭瘤病毒抗體的抗原選自如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列、如SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列、如SEQ ID N0:3所示的氨基酸序列、如S本文檔來自技高網...
【技術保護點】
一種用于檢測抗人乳頭瘤病毒抗體的抗原，其特征在于，所述的用于檢測抗人乳頭瘤病毒抗體的抗原選自如SEQ?ID?NO:1所示的氨基酸序列、如SEQ?ID?NO:2所示的氨基酸序列、如SEQ?ID?NO:3所示的氨基酸序列、如SEQ?ID?NO:4所示的氨基酸序列、如SEQ?ID?NO:5所示的氨基酸序列、與SEQ?ID?NO:1所示的氨基酸序列具有80%同源性的氨基酸序列、與SEQ?ID?NO:2所示的氨基酸序列具有80%同源性的氨基酸序列、與SEQ?ID?NO:3所示的氨基酸序列具有80%同源性的氨基酸序列、與SEQ?ID?NO:4所示的氨基酸序列具有80%同源性的氨基酸序列以及與SEQ?ID?NO:5所示的氨基酸序列具有80%同源性的氨基酸序列中的一種或幾種。
【技術特征摘要】
1.一種用于檢測抗人乳頭瘤病毒抗體的抗原，其特征在于，所述的用于檢測抗人乳頭瘤病毒抗體的抗原選自如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列、如SEQ ID N0:2所示的氨基酸序列、如SEQ ID N0:3所示的氨基酸序列、如SEQ ID NO:4所示的氨基酸序列、如SEQ IDNO: 5所示的氨基酸序列、與SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列具有80%同源性的氨基酸序列、與SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列具有80%同源性的氨基酸序列、與SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列具有80%同源性的氨基酸序列、與SEQ ID NO:4所示的氨基酸序列具有80%同源性的氨基酸序列以及與SEQ ID NO: 5所示的氨基酸序列具有80%同源性的氨基酸序列中的一種或幾種。2.根據權利要求1所述的用于檢測抗人乳頭瘤病毒抗體的抗原，其特征在于，所述的用于檢測抗人乳頭瘤病毒抗體的...
【專利技術屬性】
技術研發人員：常小迦，張杰成，許虹，
申請(專利權)人：艾托金生物醫藥蘇州有限公司，
類型：發明
國別省市：江蘇;32
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