氮芥槲皮素衍生物及其制備方法和用途技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)涉及氮芥槲皮素衍生物包括其立體異構(gòu)體或互變異構(gòu)體及其制備方法，和以該類衍生物為活性成分的藥物組合物，以及該藥物在治療癌癥中的應(yīng)用。該類衍生物的制備方法首先用槲皮素與甲醛和氯乙胺制得槲皮素的Mannich堿，然后再與取代的氨基磷酰二氯反應(yīng)制得氮芥槲皮素衍生物。氮芥槲皮素衍生物具有抗腫瘤作用。

【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】
氮芥槲皮素衍生物及其制備方法和用途
本專利技術(shù)涉及氮芥槲皮素衍生物及其在制藥中的應(yīng)用，屬于醫(yī)藥

技術(shù)介紹
槲皮素是黃酮類化合物的重要組成部分，具有廣泛的藥理作用和生物活性，如抗氧化和清除氧自由基、降血壓、保護(hù)心肌缺血、避免缺血再灌注損喪、增強(qiáng)免疫功能及抗癌、抗病毒和鎮(zhèn)痛作用等。近年來，槲皮素對人卵巢癌、乳腺癌、白細(xì)胞、胃腸道腫瘤細(xì)胞的增殖的抑制作用，備受關(guān)注。以槲皮素為母體，對其進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾，提高其藥物活性，對發(fā)現(xiàn)新型藥物，有重要的意義。氮芥類藥物是一類直接作用于DNA的重要的抗腫瘤藥物，其抗瘤譜廣，廣泛應(yīng)用于臨床。但其缺點是其代謝物具有毒性。為了降低其毒副作用，進(jìn)一步提高其抗癌活性，本專利技術(shù)人將氮芥結(jié)構(gòu)片段進(jìn)入槲皮素結(jié)構(gòu)中，得到了一類具有抗癌活性的氮芥槲皮素衍生物。
技術(shù)實現(xiàn)思路
本專利技術(shù)的目的在于提供氮芥槲皮素衍生物，包括其立體異構(gòu)體或互變異構(gòu)體，其具有抗癌的作用。本專利技術(shù)的另一目的在于提供上述氮芥槲皮素衍生物，包括其立體異構(gòu)體或互變異構(gòu)體的制備方法。本專利技術(shù)的再一目的在于提供上述氮芥槲皮素衍生物，包括其立體異構(gòu)體或互變異構(gòu)體的用途。以下對本專利技術(shù)進(jìn)行詳細(xì)描述。本專利技術(shù)提供一種氮芥槲皮素衍生物，包括其立體異構(gòu)體或互變異構(gòu)體，結(jié)構(gòu)如下式所示：式中：R選自下列取代基：H、飽和烴基、不飽和烴基、芳基、雜環(huán)基、取代的芳基、取代的雜環(huán)基、取代的烴基包括氯乙基、1-羧（酯）基烴基、2-羥基烴基、芳基甲基、雜環(huán)基甲基、芳基乙基、雜環(huán)基乙基、取代的芳基甲基、取代的雜環(huán)基甲基、取代的芳基乙基、雜環(huán)基乙基。所述的氮芥槲皮素衍生物，包括其立體異構(gòu)體或互變異構(gòu)體的結(jié)構(gòu)包括：本專利技術(shù)還提供了所述的氮芥槲皮素衍生物，包括其立體異構(gòu)體或互變異構(gòu)體的制備方法，包括以下步驟：本專利技術(shù)的氮芥槲皮素衍生物，包括其立體異構(gòu)體或互變異構(gòu)體，具有抗癌活性。有益效果：提供了一種具有抗癌活性的氮芥槲皮素衍生物。通過以下實施例進(jìn)一步舉例說明本專利技術(shù)，但應(yīng)注意本專利技術(shù)的范圍并不受這些實施例的任何限制。具體實施方式實施例1氮芥槲皮素衍生物（1）的制備N2保護(hù)下，將97.6mg(1.2mmol)的甲醛溶液，94.8mg(1.2mmol)2-氯代乙胺，302mg(1.0mmol)槲皮素和5mL乙醇加入密閉反應(yīng)器中，加4滴鹽酸，加熱至75-80℃反應(yīng)3h,自然冷卻，析出固體，抽濾，粗品經(jīng)層析板分離（V（正丁醇）：V(水）：V(HOAc）=4:1:1，甲醇洗脫，得槲皮素Mannich堿黃色固體129mg，收率33.0%。取393mg(1mmol)上述Mannich堿，431mg(2.2mmol)2-氯乙氨基磷酰二氯，用5mL干燥的DMF溶解，室溫攪拌下滴加0.6mLEt3N與4mL干燥的DMF的混合液，30min滴完，室溫反應(yīng)2h后，然后加熱至60℃，TLC監(jiān)測反應(yīng)完全，用10%的HCl溶液調(diào)溶液的pH值為3-4,再加入50mL水，過濾，得粗品，經(jīng)層析板分離（V（正丁醇）：V(水）：V(HOAc）=4:1:1，甲醇洗脫，得槲皮素衍生物（1）。MS(EIS)[M+H]+=640.0。實施例2氮芥槲皮素衍生物（2）的制備用462mg(2.2mmol)（N-2-氯乙基-N’-甲基)氨基磷酰二氯代替實施例1中的431mg(2.2mmol)2-氯乙氨基磷酰二氯，其它操作與實施例1相同，得到槲皮素衍生物（2），收率72.5%。MS(EIS)[M+H]+=668.0。實施例3氮芥槲皮素衍生物（3）的制備用696mg(2.2mmol)L-（N-2-氯乙基-N’-羥甲基芐基）氨基磷酰二氯代替實施例1中的431mg(2.2mmol)2-氯乙氨基磷酰二氯，其它操作與實施例1相同，得到槲皮素衍生物（3），收率71%。MS(EIS)[M+H]+=880.1。實施例4氮芥槲皮素衍生物（4）的制備用520mg(2mmol)磷酰二氯氮芥代替實施例1中的431mg(2.2mmol)2-氯乙氨基磷酰二氯，其它操作與實施例1相同，得到槲皮素衍生物（4）,收率76%。MS(EIS)[M+H]+=764.0。實施例5氮芥槲皮素衍生物（5）的制備用565mg(2mmol)L-[N-2-氯乙基-N’-(2-羧酸甲酯基)乙基]氨基磷酰二氯代替實施例1中的431mg(2.2mmol)2-氯乙氨基磷酰二氯，其它操作與實施例1相同，得到槲皮素衍生物（5）,收率72%。MS(EIS)[M+H]+=812.0。實施例6氮芥槲皮素衍生物（6）的制備用597mg(2mmol)L-[N-2-氯乙基-N’-(1-羥基-2-羧酸甲酯基)乙基]氨基磷酰二氯代替實施例1中的431mg(2.2mmol)2-氯乙氨基磷酰二氯，其它操作與實施例1相同，得到槲皮素衍生物（6）,收率67%。MS(EIS)[M+H]+=842.1。實施例7氮芥槲皮素衍生物（7）的制備用247mg(2mmol)（N-2-氯乙基-N’-4-吡啶基）氨基磷酰二氯代替實施例1中的431mg(2.2mmol)2-氯乙氨基磷酰二氯，其它操作與實施例1相同，得到槲皮素衍生物（7）,收率69.1%。MS(EIS)[M+H]+=794.0。實施例8氮芥槲皮素衍生物（8）的制備用573mg(2mmol)（N-2-氯乙基-N’-芐基）氨基磷酰二氯代替實施例1中的431mg(2.2mmol)2-氯乙氨基磷酰二氯，其它操作與實施例1相同，得到槲皮素衍生物（8）,收率73.2%。MS(EIS)[M+H]+=820.1。實施例9氮芥槲皮素衍生物抗腫瘤活性研究一．對腹水型S180腫瘤的抑制將接種7天，生長良好的荷S180腫瘤細(xì)胞小鼠脫椎處死，于干凈工作臺腹部碘酒消毒，酒精脫碘后抽取腹水瘤，用生理鹽水以l：4(腹水：生理鹽水)的比例稀釋為細(xì)胞懸液（細(xì)胞密度2×109/L）。每只小鼠右腋窩碘酒消毒后皮下接種該腫瘤細(xì)胞液0.2ml。于接種次日將小鼠隨機(jī)分為陰性對照組、異環(huán)磷酰胺組、5-氟尿嘧啶組、槲皮素陽性對照組和氮芥槲皮素衍生物組。各組均連續(xù)灌胃給藥10天。于末次給藥后次日將小鼠脫椎處死，剝?nèi)×鼋M織，稱瘤重及體重(除瘤后)。將實驗結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理，計算抑瘤率（表1）。結(jié)果顯示，與陽性對照品相比，氮芥槲皮素衍生物對荷腹水型S180腫瘤小鼠有顯著的抑制作用。用藥后小鼠體重與槲皮素組增重相當(dāng)，較異環(huán)磷酰胺組和5-氟尿嘧啶組增重明顯，毛色好，瘤體小，且動物沒有死亡，說明氮芥槲皮素衍生物毒性較小。抑癌率(％)=(對照組平均瘤重-治療組平均瘤重)/對照組平均瘤重×100％二．對S180腫瘤組織中微血管生長的抑制上述實驗第21天麻醉處死小鼠，切取腫瘤組織，40g/L甲醛溶液固定，石蠟包埋，常規(guī)切片，片厚3-5μm，分別行HE染色及免疫組化檢驗。免疫組化檢驗采用SABC法，一抗為兔抗鼠CD31抗體，用PBS代替，作為陰性對照，瘤旁正常組織作為陽性對照。計數(shù)方法：選擇腫瘤組織細(xì)胞間質(zhì)內(nèi)孤立的黃棕色的血管內(nèi)皮細(xì)胞或細(xì)胞簇或血管腔內(nèi)徑小于8個紅細(xì)胞者代表一條單獨(dú)的微血管。在200倍視野（0.7386mm3）下計數(shù)5個視野的微血管數(shù)目，取平均值。計算微血管密度（表2）。結(jié)果顯示，氮芥槲皮素衍生物對S180腫瘤組織中微血管生長均有顯著抑制作用。實施例10氮芥槲皮素衍生物對TRAMP-C2前列腺癌細(xì)胞抑制作用取77只C5本文檔來自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護(hù)點】
氮芥槲皮素衍生物包括其立體異構(gòu)體或互變異構(gòu)體，其特征在于，結(jié)構(gòu)通式如下：

【技術(shù)特征摘要】
1.氮芥槲皮素衍生物包括其立體異構(gòu)體或互變異構(gòu)體，其特征在于，結(jié)構(gòu)通式如下：式中：R選自下列取代基：H、飽和烴基、不飽和烴基、芳基、雜環(huán)基、取代的芳基、取代的雜環(huán)基、取代的烴基包括氯乙基、1-羧（酯）基烴基、2-羥基烴基、芳甲基、雜環(huán)甲基、芳乙基、雜環(huán)乙基、取代的芳甲基、取代的雜環(huán)甲基、取代的芳乙基、雜環(huán)乙基。2....

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：史蘭香，張冀男，劉斯婕，張寶華，郭瑞霞，
申請(專利權(quán))人：石家莊學(xué)院，
類型：發(fā)明
國別省市：河北,13