一種華南錐無(wú)性繁殖的方法技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)公開了一種華南錐無(wú)性繁殖的方法，包括外植體選擇、外植體處理、初始芽誘導(dǎo)培養(yǎng)、增殖培養(yǎng)、壯芽培養(yǎng)和生根培養(yǎng)工序，采集半木質(zhì)化、生長(zhǎng)健壯的當(dāng)年生黃檀嫩枝作為外植體，對(duì)外植體進(jìn)行修剪、滅菌消毒處理后接種于初始芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基中獲取初始芽，再將初始芽接種于增殖培養(yǎng)基中經(jīng)過3?4個(gè)周期增殖培養(yǎng)，形成叢生芽，將叢生芽接入壯芽培養(yǎng)基中培養(yǎng)，最后將高≥2cm的單芽插入生根培養(yǎng)基中誘導(dǎo)生根。本發(fā)明專利技術(shù)縮短了黃檀的育苗周期，節(jié)省育苗材料，克服了傳統(tǒng)育苗方法中存在的育苗所需材料多、周期長(zhǎng)等問題，大大降低了生產(chǎn)成本，提高了生產(chǎn)效率，具有較好的經(jīng)濟(jì)效益、社會(huì)效益和生態(tài)效益。

Method for asexual reproduction of Southern China cone

The invention discloses a method for Southern China cone of asexual reproduction, including explant selection, explant, bud induction culture, proliferation culture, strong bud culture and rooting culture process, Dalbergia shoots as explants collected raw semi lignified and robust growth when the explants were sterilized after pruning, the initial inoculated in bud inducing culture medium for the bud, the bud were cultured on proliferation medium after 3 4 cycles of proliferation, formation of buds, the clusters of medium access bud strong buds, the single bud is more than or equal to 2cm into the culture medium for rooting and rooting. The invention shortens the breeding cycle of Dalbergia, saving seedling material, overcomes the problem of materials needed, long cycle of the traditional breeding methods in the nursery there, greatly reduce the production cost, improve production efficiency, and has good economic benefits, social benefits and ecological benefits.

【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
一種華南錐無(wú)性繁殖的方法
本專利技術(shù)屬于植物繁殖
，涉及一種華南錐無(wú)性繁殖的方法。
技術(shù)介紹
華南錐（Castanopsisconcinna(Champ.exBenth.)A.DC.），殼斗科錐屬，常綠喬木，高10-15米，很少達(dá)20米，胸徑達(dá)50厘米，當(dāng)年生枝及花序軸被黃或紅棕色微柔毛及頗厚的細(xì)片狀易抹落的蠟鱗層，三年生枝無(wú)或幾無(wú)毛。分布于中國(guó)珠江三角洲以西南至廣西岑溪、防城一帶，北限見于廣東的廣寧縣（越過北回歸線稍北），沿海島嶼只見于香港。生于海拔約500米以下花崗巖風(fēng)化的紅壤丘陵坡地常綠闊葉林中。種子含淀粉，種仁可作木本糧食，味道能與板栗媲美；木材顏色鮮艷，材質(zhì)堅(jiān)重有彈性，耐水濕，是家具、器械、建筑的優(yōu)良用材。是中國(guó)國(guó)家Ⅱ級(jí)重點(diǎn)保護(hù)野生植物。目前，華南錐有性繁殖主要靠雜交授粉完成，即選用不同品種或同品種不同株間相互授粉，然而有性繁殖周期較長(zhǎng)。組織培養(yǎng)技術(shù)是一種快速無(wú)性繁殖技術(shù)，選擇華南錐優(yōu)良家系或者無(wú)性系為材料，通過組織培養(yǎng)方法繁殖苗木，既可以滿足生產(chǎn)上的數(shù)量要求，又可保持母本性狀。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
本專利技術(shù)的目的是針對(duì)黃檀組織培養(yǎng)過程中芽增殖系數(shù)低，生長(zhǎng)緩慢等問題,提供一種生長(zhǎng)效果好、擴(kuò)繁快的黃檀嫩枝組培繁殖方法。為了實(shí)現(xiàn)上述專利技術(shù)目的，本專利技術(shù)的技術(shù)方案如下：一種華南錐無(wú)性繁殖的方法，包括外植體選擇、外植體處理、初始芽誘導(dǎo)培養(yǎng)、增殖培養(yǎng)、壯芽培養(yǎng)和生根培養(yǎng)工序，采集半木質(zhì)化、生長(zhǎng)健壯的當(dāng)年生黃檀嫩枝作為外植體，對(duì)外植體進(jìn)行修剪、滅菌消毒處理后接種于初始芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基中獲取初始芽，再將初始芽接種于增殖培養(yǎng)基中經(jīng)過3-4個(gè)周期增殖培養(yǎng)，形成叢生芽，將叢生芽接入壯芽培養(yǎng)基中培養(yǎng)，最后將高≥2cm的單芽插入生根培養(yǎng)基中誘導(dǎo)生根，具體操作步驟如下：（1）外植體選擇：采集半木質(zhì)化、生長(zhǎng)健壯的當(dāng)年生黃檀嫩枝作為外植體；（2）外植體處理：將外植體置于自來(lái)水下沖洗10-15min，然后去除外植體葉片，再將外植體浸泡在體積濃度0.1%的升汞溶液中，控制浸泡時(shí)間15-20min，最后用純凈水洗凈藥物，將外植體裁成帶至少1個(gè)腋芽，1.5-3cm長(zhǎng)的莖段，視莖段木質(zhì)化程度分類置放容器內(nèi)，備用；（3）初始芽誘導(dǎo)培養(yǎng)：將步驟（2）得到的外植體接種于初始芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基中培養(yǎng)，培養(yǎng)30-35d，初始芽萌發(fā)、生長(zhǎng)；（4）增殖培養(yǎng)：將高≥1cm的初始芽接入增殖培養(yǎng)基中進(jìn)行增殖培養(yǎng)，35-40d轉(zhuǎn)接一次，循環(huán)往復(fù)，經(jīng)3-4個(gè)周期的培養(yǎng)，形成叢生芽；（5）壯芽培養(yǎng)：將步驟（4）得到的叢生芽進(jìn)行切割，4-5顆芽/叢，插入壯芽培養(yǎng)基中，培養(yǎng)35-40d，形成壯芽；（6）生根培養(yǎng)：將步驟（5）得到的高≥2cm的單芽插入生根培養(yǎng)基中誘導(dǎo)生根；余下小芽叢再次接種于步驟（4）的增殖培養(yǎng)基中繼續(xù)增殖，然后再重復(fù)步驟（5），循環(huán)往復(fù)，獲得大量壯芽。以上所述的初始芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基的配方為：1/2改良MS培養(yǎng)基+TDZ4.0-6.0mg/L+NAA2.0-3.0mg/L+KT1.0-2.0mg/L+ZT1.5-2.0mg/L+VC15mg/L+葉酸10mg/L+VB215mg/+瓊脂3.0g/L+葡萄糖25g/L。以上所述的增殖培養(yǎng)基的配方為：改良1/2MS培養(yǎng)基+TDZ6.0-8.0mg/L+NAA2.0-3.0mg/L+ZT0.5-1.0mg/L+VC15mg/L+VB215mg+L-半胱氨酸20mg/L+瓊脂3.6g/L+葡萄糖30g/L。以上所述的壯芽培養(yǎng)基的配方為：改良MS培養(yǎng)基+TDZ3.0-4.0mg/L+NAA1.0-1.5mg/L+VC15mg/L+VB215mg+L-半胱氨酸20mg/L+瓊脂3.5g/L+葡萄糖25g/L。以上所述的生根培養(yǎng)基的配方為：1/2改良MS培養(yǎng)基+TDZ1.5-2.5mg/L+NAA1.0-1.5mg/L+瓊脂3.5g/L+葡萄糖30g/L。所述的改良MS培養(yǎng)基的配方為：KNO3874mg·L-1；NH4NO3850mg·L-1；CaCl2·2H2O295mg·L-1；MgSO4·7H2O318mg·L-1；Ca(NO3)2·4H2O600mg·L-1；KH2PO4340mg·L-1；MnSO4·H2O22.3mg·L-1；ZnSO4·7H2O8.6mg·L-1；CuSO4·5H2O0.025mg·L-1；H3BO36.2mg·L-1；Na2MoO4·2H2O0.025mg·L-1；KI0.83mg·L-1；CoCl2·6H2O0.025mg·L-1；維生素B11.0mg·L-1；維生素B60.5mg·L-1；煙酸0.5mg·L-1；甘氨酸2.0mg·L-1；肌醇70mg·L-1。以上步驟（3）所述的初始芽誘導(dǎo)培養(yǎng)的培育控制條件為：光培養(yǎng)、光照500-1000lx，培養(yǎng)溫度20±1℃；步驟（4）所述的增殖培養(yǎng)、步驟（5）所述的壯芽培養(yǎng)、步驟（6）所述的生根培養(yǎng)的培育控制條件均為：光培養(yǎng)，光照2500-4000lx，每日光照16h，培養(yǎng)溫度25-28℃。相對(duì)于現(xiàn)有技術(shù)，本專利技術(shù)具有的優(yōu)點(diǎn)和有益效果如下：1、本專利技術(shù)以黃檀當(dāng)年生嫩枝作為外植體，經(jīng)過初始芽培養(yǎng)基培養(yǎng)，初始芽萌動(dòng)率90%以上；經(jīng)過3-4個(gè)周期增殖培養(yǎng)，形成叢生芽，芽增殖系數(shù)5/30d-7/30d，再將叢生芽接入壯芽培養(yǎng)基中培養(yǎng)，最后將高≥2cm的單芽插入生根培養(yǎng)基中誘導(dǎo)生根，從而縮短了黃檀的育苗周期，節(jié)省育苗材料，克服了傳統(tǒng)育苗方法中存在的育苗所需材料多、周期長(zhǎng)等問題，大大降低了生產(chǎn)成本，提高了生產(chǎn)效率。2、本專利技術(shù)將高≥2cm的單芽插入生根培養(yǎng)基中誘導(dǎo)生根，余下小芽叢繼續(xù)增殖培養(yǎng)，使得材料能夠多次繼代，實(shí)現(xiàn)大量增殖，規(guī)模化生產(chǎn)壯芽，實(shí)現(xiàn)黃樟油素型樟樹的擴(kuò)繁。3、本專利技術(shù)對(duì)MS基本培養(yǎng)基進(jìn)行了改良，同時(shí)重點(diǎn)調(diào)整了與黃檀出芽壯芽相關(guān)元素，使得培養(yǎng)基更科學(xué)，更有針對(duì)性，更易促使黃檀芽誘導(dǎo)的發(fā)生、增殖和壯芽，效果顯著。4、本專利技術(shù)操作過程簡(jiǎn)便，培養(yǎng)周期短，繼代芽產(chǎn)量大,并且質(zhì)量?jī)?yōu)，增殖系數(shù)達(dá)到5以上的組培苗產(chǎn)業(yè)化技術(shù)要求，具有很好的經(jīng)濟(jì)效益、生態(tài)效益和社會(huì)效益。具體實(shí)施方式下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本專利技術(shù)做進(jìn)一步說(shuō)明。實(shí)施例1：（1）外植體選擇：采集半木質(zhì)化、生長(zhǎng)健壯的當(dāng)年生黃檀嫩枝作為外植體；（2）外植體處理：將外植體置于自來(lái)水下沖洗10min，然后去除外植體葉片，再將外植體浸泡在體積濃度0.1%的升汞溶液中，控制浸泡時(shí)間15min，最后用純凈水洗凈藥物，將外植體裁成帶至少1個(gè)腋芽，1.5-3cm長(zhǎng)的莖段，視莖段木質(zhì)化程度分類置放容器內(nèi)，備用；（3）初始芽誘導(dǎo)培養(yǎng)：將步驟（2）得到的外植體接種于初始芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基中培養(yǎng)，置于光培養(yǎng)、光照500lx，培養(yǎng)溫度20±1℃的環(huán)境中培養(yǎng)30-35d，初始芽萌發(fā)、生長(zhǎng)；所述的初始芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基的配方為：1/2改良MS培養(yǎng)基+TDZ4.0mg/L+NAA2.0mg/L+KT1.0mg/L+ZT1.5mg/L+VC15mg/L+葉酸10mg/L+VB215mg/+瓊脂3.0g/L+葡萄糖25g/L；（4）增殖培養(yǎng)：將高≥1cm的初始芽接入增殖培養(yǎng)基中進(jìn)行增殖培養(yǎng)，置于光培養(yǎng)，光照2500lx，每日光照16h，培養(yǎng)溫度25-28℃的環(huán)境中，35-40d轉(zhuǎn)接一次，循環(huán)往復(fù)，經(jīng)3-4個(gè)周期的培養(yǎng)，形成叢生芽；所述的增殖培養(yǎng)基的配方為：1/2改良本文檔來(lái)自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
一種華南錐無(wú)性繁殖的方法，其特征在于：包括外植體選擇、外植體處理、初始芽誘導(dǎo)培養(yǎng)、增殖培養(yǎng)、壯芽培養(yǎng)和生根培養(yǎng)工序，采集半木質(zhì)化、生長(zhǎng)健壯的當(dāng)年生黃檀嫩枝作為外植體，對(duì)外植體進(jìn)行修剪、滅菌消毒處理后接種于初始芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基中獲取初始芽，再將初始芽接種于增殖培養(yǎng)基中經(jīng)過3?4個(gè)周期增殖培養(yǎng)，形成叢生芽，將叢生芽接入壯芽培養(yǎng)基中培養(yǎng)，最后將高≥2cm的單芽插入生根培養(yǎng)基中誘導(dǎo)生根，具體操作步驟如下：（1）外植體選擇：采集半木質(zhì)化、生長(zhǎng)健壯的當(dāng)年生黃檀嫩枝作為外植體；（2）外植體處理：將外植體置于自來(lái)水下沖洗10?15?min，然后去除外植體葉片，再將外植體浸泡在體積濃度?0.1%的升汞溶液中，控制浸泡時(shí)間15?20?min，最后用純凈水洗凈藥物，將外植體裁成帶至少1個(gè)腋芽，1.5?3cm長(zhǎng)的莖段，視莖段木質(zhì)化程度分類置放容器內(nèi)，備用；（3）初始芽誘導(dǎo)培養(yǎng)：將步驟（2）得到的外植體接種于初始芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基中培養(yǎng)，培養(yǎng)30?35?d，初始芽萌發(fā)、生長(zhǎng)；（4）增殖培養(yǎng)：將高≥1cm的初始芽接入增殖培養(yǎng)基中進(jìn)行增殖培養(yǎng)，35?40?d轉(zhuǎn)接一次，循環(huán)往復(fù)，經(jīng)3?4個(gè)周期的培養(yǎng)，形成叢生芽；（5）壯芽培養(yǎng)：將步驟（4）得到的叢生芽進(jìn)行切割，4?5顆芽/叢，插入壯芽培養(yǎng)基中，培養(yǎng)35?40?d，形成壯芽；（6）生根培養(yǎng)：將步驟（5）得到的高≥2cm的單芽插入生根培養(yǎng)基中誘導(dǎo)生根；余下小芽叢再次接種于步驟（4）的增殖培養(yǎng)基中繼續(xù)增殖，然后再重復(fù)步驟（5），循環(huán)往復(fù)，獲得大量壯芽。...

【技術(shù)特征摘要】
1.一種華南錐無(wú)性繁殖的方法，其特征在于：包括外植體選擇、外植體處理、初始芽誘導(dǎo)培養(yǎng)、增殖培養(yǎng)、壯芽培養(yǎng)和生根培養(yǎng)工序，采集半木質(zhì)化、生長(zhǎng)健壯的當(dāng)年生黃檀嫩枝作為外植體，對(duì)外植體進(jìn)行修剪、滅菌消毒處理后接種于初始芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基中獲取初始芽，再將初始芽接種于增殖培養(yǎng)基中經(jīng)過3-4個(gè)周期增殖培養(yǎng)，形成叢生芽，將叢生芽接入壯芽培養(yǎng)基中培養(yǎng)，最后將高≥2cm的單芽插入生根培養(yǎng)基中誘導(dǎo)生根，具體操作步驟如下：（1）外植體選擇：采集半木質(zhì)化、生長(zhǎng)健壯的當(dāng)年生黃檀嫩枝作為外植體；（2）外植體處理：將外植體置于自來(lái)水下沖洗10-15min，然后去除外植體葉片，再將外植體浸泡在體積濃度0.1%的升汞溶液中，控制浸泡時(shí)間15-20min，最后用純凈水洗凈藥物，將外植體裁成帶至少1個(gè)腋芽，1.5-3cm長(zhǎng)的莖段，視莖段木質(zhì)化程度分類置放容器內(nèi)，備用；（3）初始芽誘導(dǎo)培養(yǎng)：將步驟（2）得到的外植體接種于初始芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基中培養(yǎng)，培養(yǎng)30-35d，初始芽萌發(fā)、生長(zhǎng)；（4）增殖培養(yǎng)：將高≥1cm的初始芽接入增殖培養(yǎng)基中進(jìn)行增殖培養(yǎng)，35-40d轉(zhuǎn)接一次，循環(huán)往復(fù)，經(jīng)3-4個(gè)周期的培養(yǎng)，形成叢生芽；（5）壯芽培養(yǎng)：將步驟（4）得到的叢生芽進(jìn)行切割，4-5顆芽/叢，插入壯芽培養(yǎng)基中，培養(yǎng)35-40d，形成壯芽；（6）生根培養(yǎng)：將步驟（5）得到的高≥2cm的單芽插入生根培養(yǎng)基中誘導(dǎo)生根；余下小芽叢再次接種于步驟（4）的增殖培養(yǎng)基中繼續(xù)增殖，然后再重復(fù)步驟（5），循環(huán)往復(fù)，獲得大量壯芽。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種華南錐無(wú)性繁殖的方法，其特征在于：所述的初始芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基的配方為：1/2改良MS培養(yǎng)基+TDZ4.0-6.0mg/L+NAA2.0-3.0mg/L+KT1.0-2.0mg/L+ZT1.5-2.0mg/L+VC15mg/L+葉酸10mg/L+VB215mg/+瓊脂3.0g/L+葡萄糖25g/L。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種華南錐無(wú)性繁殖的方法，其特征在于：所述的增殖培養(yǎng)基的配方為：1/2改良MS培養(yǎng)基+T...

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：唐春艷，陳素云，
申請(qǐng)(專利權(quán))人：唐春艷，陳素云，
類型：發(fā)明
國(guó)別省市：廣西,45