一種以百部為主要原料制備發酵殺蟲劑的方法技術

本發明專利技術提供了一種發酵百部制備殺蟲劑的方法，其工藝特點是以百部為主要原料，輔以生活垃圾、淀粉類物質及水，以市售短小芽孢桿菌、蘇云桿菌和解淀粉芽孢桿菌H47為發酵菌株，按照百部：生活垃圾：淀粉類物質:純凈水＝2～5:1～2:0.01:3～7的比例和體系2～5％的菌株接種量，發酵溫度為25～35℃，轉速為100～200rpm，保持pH＝5～8，發酵時間6～9d。本發明專利技術完全發酵，使其中的多種酶、維生素、氨基酸和微量元素充分釋放出來，使產品提高殺蟲劑的藥效及其功能。而且又不影響植物性殺蟲劑的生理活性物質。

Method for preparing fermented insecticide with hundred parts as main raw material

The invention provides a fermentation method for preparing insecticide 100, the characteristics of the technology is to 100 as the main raw material, supplemented by garbage, starch and water, using commercially available short small bacillus, Bacillus thuringiensis and Bacillus amyloliquefaciens H47 strains, according to 100: garbage starch. Material: pure water = 2 ~ 5:1 ~ 2:0.01:3 ~ 7 and 2 ~ 5% of the proportion of system strain inoculation, fermentation temperature is 25 to 35 DEG C, the speed is 100 ~ 200rpm, pH = 5 ~ 8, fermentation time 6 ~ 9d. The invention is fully fermented so that a plurality of enzymes, vitamins, amino acids and trace elements are fully released so as to improve the efficacy and the function of the pesticide. And it does not affect the physiological active substances of botanical insecticides.

【技術實現步驟摘要】
一種以百部為主要原料制備發酵殺蟲劑的方法
一種微生物發酵制備殺蟲劑的方法，涉及到用市售短小芽孢桿菌、蘇云桿菌和解淀粉芽孢桿菌H47凍干粉，以百部為原料發酵制備殺蟲劑的方法，屬于生物工程及發酵

技術介紹
百部為百部科多年生草本，高60-90cm。塊根紡錘形，肉質，幾個或幾十個簇生。莖下部直立，上部成蔓生狀。單葉2-4片輪生，卵形或卵狀極針形，先端銳尖或漸尖，基部圓形或近截形，全線，葉脈5-9條，小脈細密橫行。總花梗直立，基部貼生在葉片中脈上，頂端著生一。兩朵淺綠色的花；花被4，開放后向外卷；雄蕊4，有附屬物，紫色；子房小，卵形。蒴果表面平滑，暗褐色，成熟裂開，有種子數粒。花期5月，果期7月)。百部含百部堿、百部定堿、異百部定堿、原百部堿、百部寧堿、華百部堿對葉百部堿、霍多林堿、直立百部堿等多種次生代謝產物，對蚊蠅幼蟲、頭虱、陰虱、衣虱及臭蟲等均有殺滅作用，高濃度百部在體外有殺死鼠蟯蟲的作用。但植物性殺蟲劑多用有機溶劑或煎煮提取，1)不利于節能也有較大的環境風險；2)影響活性物質的穩定性和遺失活性物質；3)增加成本使得開發應用困難較大，作用效果緩慢，因此給植物源殺蟲劑的研發和生產帶來了巨大的經濟困難。利用合適的植物促生菌發酵百部，不僅有利于生理活性物質的提取，還不易造成活性物質的失活，促生菌本身還有較好的殺蟲防病和促生作用。有利于改善植物生長和增強殺蟲效果。有利于環境保護和百部植物本身的有效利用。
技術實現思路
本專利技術利用百部的豐富資源，通過微生物進行發酵產生不同的生理活性物質及植物促生菌產生酶類、醇類及芳香物質等多類有義代謝產物從而提高殺蟲劑的藥效及其功能，本專利技術擁有著發酵時間短，有害微生物滋生少甚至沒有，避免由于過長時間發酵而產生的病毒，以及能產生脂肽等生理活性物質等優點，從而提高殺蟲防病的功效和植物生長的促生作用。本專利技術配方及用法：(1)挑選材料：選擇新鮮、質量好的百部為發酵主原料。(2)材料的處理：先用自來水沖洗，再使用無錫百年尚水飲品有限公司提供的百年尚水清水洗兩遍，最后再用0.9％的NaCl溶液侵泡120秒，瀝干備用。(3)菌種培養：使用無錫百年尚水飲品有限公司提供的百年尚水配制LB培養基，將原保存菌株活化，培養約48小時得到的菌液備用；(4)接種發酵：均按照接種比例2～5％，將市售短小芽孢桿菌、蘇云桿菌和解淀粉芽孢桿菌H47按等比例接入發酵原液，各菌濃度為106CFU/ml，發酵3～9d，pH值5.0～8.0，溫度25℃～35℃。(5)后期處理制作：粗過濾，初步篩掉大顆粒殘渣，避免百部久放容易造成酸敗，過濾條件：過濾篩數目為20～32目。細過濾：進一步濾掉小型顆粒殘渣，使液態呈現較清澈的狀態，過濾條件：過濾篩數目為80～100目，既得以百部發酵原料的殺蟲劑。步驟(1)原料的制備方法包括如下步驟：(11)所使用的工具、器具均要滅菌，無油膩。(12)把百部用純凈水洗凈，再用純凈水或0.9％的鹽水浸泡瀝干。(13)再將百部置于已滅菌的容器中，后加入生活垃圾及淀粉類物質和純凈水，其中發酵原液中體積比百部：生活垃圾：淀粉類物質:純凈水＝2～5:1～2:0.01:3～7，即得百部發酵原液。專利技術的有益效果：本利用合適的植物促生菌發酵百部，不僅有利于生理活性物質的提取，保持活性物質的穩定性，促生菌本身可通過優勢菌株抑制了其他雜菌滋生從而有較好的殺蟲防病和促生作用。有利于改善植物生長和增強殺蟲效果。有利于環境保護和百部植物本身的有效利用。提高殺蟲劑的經濟價值。具體實施方式下面將結合本專利技術實施例，對本專利技術的技術方案進行清楚、完善地描述，顯然，所描述的實施例僅僅是本專利技術一部分實施例，而不是全部的實施例。基于本專利技術中的實施例，本領域普通技術人員在沒有作出創造性勞動的前提下所獲得的其他實施例，都屬于本專利技術保護的范圍。實施例1一種以百部為原料發酵制備殺蟲劑的方法，包括以下步驟：(1)選擇新鮮、質量好的百部做為發酵主要原料。(2)純凈水清水洗兩遍，最后再用0.9％的NaCl溶液浸泡，低溫殺菌，然后瀝干，裝入純凈水清洗好的容器中，大概占體積的20％，加入占總液體體積5％的生活垃圾及1％的淀粉類物質為發酵原液備用。(3)配制LB培養基，將原保存菌株活化，80r/min振蕩培養約48小時得到的發酵菌液備用；(4)均按照接種比例2％，將市售短小芽孢桿菌、蘇云桿菌和解淀粉芽孢桿菌H47按等比分別取接入發酵原液，100r/min振蕩培養發酵6d，pH值7.0，溫度25℃。(5)先進行粗過濾，過濾篩數目為20～32目。然后細過濾，過濾篩數目為為80～100目，即得百部為發酵原料的殺蟲劑。實施例2一種以百部為原料發酵制備殺蟲劑的方法，包括以下步驟：(1)選擇新鮮、質量好的百部做為發酵主要原料。(2)純凈水清水洗兩遍，最后再用0.9％的NaCl溶液浸泡，低溫殺菌，然后瀝干，裝入純凈水清洗好的容器中，大概占體積的30％，加入占總液體體積10％的生活垃圾及1％的淀粉類物質為發酵原液備用。(3)配制LB培養基，將原保存菌株活化，100r/min振蕩培養約48小時得到的發酵菌液備用；(4)均按照接種比例3％，將市售短小芽孢桿菌、蘇云桿菌和解淀粉芽孢桿菌H47按等比分別取接入發酵原液，100r/min振蕩培養發酵6d，pH值7.0，溫度25℃。(5)先進行粗過濾，過濾篩數目為20～32目。然后細過濾，過濾篩數目為為80～100目，即得百部為發酵原料的殺蟲劑。實施例3一種以百部為原料發酵制備殺蟲劑的方法，包括以下步驟：(4)選擇新鮮、質量好的百部做為發酵主要原料。(5)純凈水清水洗兩遍，最后再用0.9％的NaCl溶液浸泡，低溫殺菌，然后瀝干，裝入純凈水清洗好的容器中，大概占體積的30％，加入占總液體體積15％的生活垃圾及1％的淀粉類物質為發酵原液備用。(6)配制LB培養基，將原保存菌株活化，100r/min振蕩培養約48小時得到的發酵菌液備用；(4)均按照接種比例4％，將市售短小芽孢桿菌、蘇云桿菌和解淀粉芽孢桿菌H47按等比分別取接入發酵原液，100r/min振蕩培養發酵6d，pH值7.0，溫度25℃。(5)先進行粗過濾，過濾篩數目為20～32目。然后細過濾，過濾篩數目為為80～100目，即得百部為發酵原料的殺蟲劑。實施例4一種以百部為原料發酵制備殺蟲劑的方法，包括以下步驟：(1)選擇新鮮、質量好的百部做為發酵主要原料。(2)純凈水清水洗兩遍，最后再用0.9％的NaCl溶液浸泡，低溫殺菌，然后瀝干，裝入純凈水清洗好的容器中，大概占體積的50％，加入占總液體體積20％的生活垃圾及1％的淀粉類物質為發酵原液備用。(3)配制LB培養基，將原保存菌株活化，150r/min振蕩培養約48小時得到的發酵菌液備用；(4)均按照接種比例5％，將市售短小芽孢桿菌、蘇云桿菌和解淀粉芽孢桿菌H47按等比分別取接入發酵原液，100r/min振蕩培養發酵6d，pH值7.0，溫度25℃。(5)先進行粗過濾，過濾篩數目為20～32目。然后細過濾，過濾篩數目為為80～100目，即得百部為發酵原料的殺蟲劑。本專利技術中的百部含有豐富的次級代謝物質以及百部堿提物及醇提物等對植物具有促生作用且藥效明顯，但是不僅僅限于此，可以根據實際情況，確定百部的鮮重或是干重的添加量或者本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種以百部為原料發酵制備殺蟲劑的技術，其特點是以質量好的百部為主要發酵原料，加入淀粉及生活垃圾，采用市售短小芽孢桿菌、蘇云桿菌和解淀粉芽孢桿菌H47，生產制備殺蟲劑，其工藝為：1)選用新鮮無病變的百部用自來水洗凈表面污物，再使用無錫百年尚水飲品有限公司提供的百年尚水清水洗兩遍，最后再用0.9％的NaCl溶液侵泡120秒，瀝干，放入罐中，按體積比為百部：生活垃圾：淀粉類物質:純凈水＝2～5:1～2:0.01:3～7配制成發酵原液。2)配制LB培養基，將原保存菌株活化，培養約48小時得到的菌液備用；再將市售短小芽孢桿菌、蘇云桿菌和解淀粉芽孢桿菌H47按一定的比例接入發酵原液3)發酵體系中，加入體系2％～5％的菌種，發酵溫度為25～35℃，轉速100～200rpm，保持pH＝5～8，發酵時間6～9d。4))發酵完成后的發酵液先經粗過濾，過濾篩數目為20～32目；再細過濾，過濾篩數目為80～100目，即可制備得到以百部為原料的殺蟲劑。

【技術特征摘要】
1.一種以百部為原料發酵制備殺蟲劑的技術，其特點是以質量好的百部為主要發酵原料，加入淀粉及生活垃圾，采用市售短小芽孢桿菌、蘇云桿菌和解淀粉芽孢桿菌H47，生產制備殺蟲劑，其工藝為：1)選用新鮮無病變的百部用自來水洗凈表面污物，再使用無錫百年尚水飲品有限公司提供的百年尚水清水洗兩遍，最后再用0.9％的NaCl溶液侵泡120秒，瀝干，放入罐中，按體積比為百部：生活垃圾：淀粉類物質:純凈水＝2～5:1～2:0.01:3～7配制成發酵原液。2)配制LB培養基，將原保存菌株活化，培養約48小時得到的菌液備用；再將市售短小芽孢桿菌、蘇云桿菌和解淀粉芽孢桿菌H47按一定的比例接入發酵原液3)發酵體系中，加入體系2％～5％的菌種，發酵溫度為25～35℃，轉速100～200rpm，保持pH＝5～8，發酵時間6～9d。4))發酵完成后的發酵液先經粗過濾，過濾篩數目為20～32目；再細過濾，過濾篩數目為80～100目，即可制備得到以百部為原料的殺蟲劑。2.根據權利要求1所述的一種發酵百部制備殺蟲劑的方法，其特征是：均按照接種比例2～5％，將市售短小芽孢桿菌、蘇云桿菌和解淀粉芽孢桿菌H47等比發酵原液，各菌濃度為106CFU/ml，發酵3～9d，pH值5...

【專利技術屬性】
技術研發人員：廖祥儒，吳秋蘭，岑仕宇，蔡宇杰，管政兵，
申請(專利權)人：江南大學，
類型：發明
國別省市：江蘇,32