一種類肉毒多肽納米膠束及其制備方法和應(yīng)用技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)屬于化妝品技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種類肉毒多肽納米膠束及其制備方法和應(yīng)用。類肉毒多肽氨基酸序列為：R

【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】
一種類肉毒多肽納米膠束及其制備方法和應(yīng)用


[0001]本專利技術(shù)屬于化妝品
，具體涉及一種類肉毒多肽納米膠束及其制備方法和應(yīng)用。

技術(shù)介紹

[0002]皺紋是皮膚老化的最初征兆，隨著年齡的增長，面部肌肉收縮肌力下降，皮膚張力也隨之降低，富有彈性的肌膚開始出現(xiàn)皺紋。這種現(xiàn)象的產(chǎn)生存在多種內(nèi)在及外在誘因，內(nèi)在誘因主要是由于人體自身的再生能力隨著年齡的增加逐漸減弱；外在誘因則包括紫外線及電磁輻射、長期熬夜等。這些內(nèi)、外誘因的疊加作用會導(dǎo)致面部皮膚表現(xiàn)出皺紋加深加多、皮膚松弛、膠原蛋白大量流失等特征。
[0003]基于自然老化等原因，皺紋產(chǎn)生是無法避免的，但是可以通過抗皺的方式進行延緩，現(xiàn)有技術(shù)有采取注射A型肉毒毒素的方式來除皺的。A型肉毒毒素是由肉毒桿菌在繁殖過程中所產(chǎn)生的一種神經(jīng)毒素蛋白，大小為150kD，它的作用方式為抑制周圍運動神經(jīng)末梢突觸前膜乙酰膽堿的釋放，從而導(dǎo)致肌肉松弛性麻痹，抑制肌肉的收縮。但是肉毒毒素在作為祛皺產(chǎn)品應(yīng)用時也面臨諸多問題。首先，肉毒毒素需要通過注射發(fā)揮作用且注射一次后維持效果時間有限；其次，肉毒毒素價格昂貴，受眾面相對較小；最重要的是，操作及使用不當會引起使用者留下面部僵硬、面癱等后遺癥。
[0004]隨著研究的進展，六勝肽的出現(xiàn)大大提高了抗皺安全性，與肉毒毒素相比，六勝肽無刺激、安全、無手術(shù)風(fēng)險、無年齡膚質(zhì)要求以及無需注射，也不容易留下面部僵硬、面癱等后遺癥。六勝肽是一種最經(jīng)典的對抗表情紋的多肽，通過與SNAP
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25競爭干擾SNARE蛋白三元復(fù)合體的形成，抑制神經(jīng)遞質(zhì)的過度釋放，發(fā)揮抗皺功效。10％乳液涂抹眼角30天，可使眼角魚尾紋深度減少30％，是一種非常有效的抗皺活性物。市場還有一些其他的抗皺多肽，比如維洛斯肽，在28天時間內(nèi)使用，可使眼部皺紋減少49％，皮膚粗糙度減少47％；類蛇毒肽，是一種模擬蛇毒毒素小分子活性肽，可有效減少皺紋的產(chǎn)生。且不會影響面部表情，通過功效驗證實驗，對培養(yǎng)的細胞使用25ppm的類蛇毒肽溶液，一分鐘后肌肉收縮率降低到36％，2小時降至82％，可達到一個即時除皺的效果。
[0005]不管是上述的六勝肽，還是維洛斯肽等產(chǎn)品，多為短肽，對于肽類產(chǎn)品來說，肽鏈越長越難以穿透皮膚屏障。比如，CN113402586A公開了一種多肽及其作為肌肉麻痹松弛劑或皮膚抗皺劑中的應(yīng)用，其多肽序列為：R
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Glu
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Glu
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Met
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Gln
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Arg
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Arg
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Ala，其中R選自Ser、Glu、Phe、Met、Arg、Asn、Glu和Leu中的至少一種，從多肽結(jié)構(gòu)來看，其最短為八肽，最長為15肽。當氨基酸序列超過10個時，其皮膚穿透性必然受到影響，當其為15肽時，透皮性進一步減弱；因此，雖然該專利制備的仿A型肉毒素的十五肽，穩(wěn)定性、滲透性和親和力好，且展現(xiàn)出良好的生物相容性，用于面部表情肌麻痹松弛，已達到改善面部輪廓和消除或減少褶皺的功效，但是其皮膚穿透性下降，大部分停留在角質(zhì)層，穿透皮膚進入表皮及真皮的部分為極少部分，因此，其生物利用率大幅降低，功效性有限，實際并未解決當肽鏈延長后的透皮問題。因此，市面上現(xiàn)有的肽類產(chǎn)品會通過減少肽鏈長度來提高其穿透性，這同時會舍棄不
少肽鏈上發(fā)揮功效的部位，造成多肽功效性降低。
[0006]為了提高多肽的穿透性，CN113512092A公開了一種多肽納米雜化物具有很好的消除或減少褶皺的功效。所述多肽納米雜化物的結(jié)構(gòu)為[Au
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S
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S
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十五肽]n，所述十五肽的氨基酸序列為SEFMRNELEEMQRRA。其被Cys修飾后與納米金制備成雜化物，借助納米金載體將十五肽遞送透皮。根據(jù)其技術(shù)方案所述：納米雜化物最終形式為酸性溶液形式，含有羥乙基哌嗪乙基磺酸和氯金酸，pH相對較低，納米金本身為外源性物質(zhì)，應(yīng)用于注射類制劑時，易造成多肽和金解離，金離子缺少了穿過皮膚屏障，有一定的過敏隱患，這些過敏隱患會導(dǎo)致破皮，微損傷，誘發(fā)鋸齒細胞吞噬，造成炎癥等系列問題。
[0007]多肽納米膠束多應(yīng)用于多肽藥物領(lǐng)域，在癌癥的治療方面已有不少的報道。CN112426537A公開了一種多肽納米膠束及其制備方法和應(yīng)用。多肽納米膠束是由聚乙二醇化磷脂(PEG
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PE)和多肽自組裝形成，具有抑制癌細胞增殖的作用。CN 112494427A公開了一種聚乳酸
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多肽膠束及其應(yīng)用，由兩親性聚乳酸
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多肽聚合物自組裝形成。親水性多肽形成聚乳酸
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多肽膠束的外殼，疏水性聚乳酸形成聚乳酸
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多肽膠束的內(nèi)核；兩親性聚乳酸
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多肽聚合物上還連接有靶向腫瘤細胞的適配體，在腫瘤的聯(lián)合治療領(lǐng)域具有重要意義。以上專利提供的多肽納米膠束作為藥物使用，但是在美容方面的應(yīng)用，卻鮮有報道。
[0008]綜上所述，需要開發(fā)一種透皮性好、安全性高的抗皺多肽產(chǎn)品的制備方法。

技術(shù)實現(xiàn)思路

[0009]本專利技術(shù)所要解決的技術(shù)問題在于：克服多肽透皮性和功效性兼具難題，同時保障安全性，提供一種類肉毒多肽納米膠束及其制備方法，并應(yīng)用于化妝品

[0010]解決上述技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案由下述步驟組成：
[0011]一種類肉毒多肽納米膠束的制備方法，包括以下步驟：
[0012](1)類肉毒多肽的設(shè)計：利用Discovery studio軟件，基于SNAP
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25與Rabphilin
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3A晶體結(jié)構(gòu)，模擬設(shè)計獲得能夠阻斷二者相互作用的多肽序列；對多肽序列氮端進行疏水基團修飾；
[0013](2)類肉毒多肽的制備：合成疏水基團修飾的多肽序列粗品，純化后凍干，得到純化的類肉毒多肽；
[0014](3)類肉毒多肽納米膠束的制備：類肉毒多肽配制成濃度大于等于0.2mg/mL的溶液，此時類肉毒多肽自組裝為納米膠束。使用透射電子顯微鏡對多肽納米膠束溶液進行表征，樣品使用3％的磷鎢酸負染色處理；使用動態(tài)光散射測試樣品粒徑大小，其粒徑小于50nm。類肉毒多肽膠束具有顯著的抗皺功效、同時作為載體，可負載其他親水活性成分。
[0015]上述步驟(1)中，所述疏水基團修飾為肉豆蔻酰修飾或棕櫚酰修飾。
[0016]上述步驟(2)中，用樹脂為載體，使用多肽固相有機合成技術(shù)，在N,N
?
二甲基甲酰胺體系中，以Fmoc合成策略，合成疏水基團修飾的多肽序列，純化后凍干，得到純化多肽。具體的：
[0017]選用Rink Aminde MBHA Resin為載體，使用多肽固相有機合成技術(shù)，在N,N
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二甲基甲酰胺體系中，以Fmoc合成策略，合成Myristoyl
?
Glu
?
Asn
?
Arg
?
Ser
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【技術(shù)保護點】

【技術(shù)特征摘要】
1.一種類肉毒多肽納米膠束的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：類肉毒多肽的設(shè)計：基于SNAP
?
25與Rabphilin
?
3A晶體結(jié)構(gòu)，模擬設(shè)計獲得能夠阻斷二者相互作用的多肽序列，對多肽序列氮端進行疏水基團修飾；類肉毒多肽的制備：合成疏水基團修飾的多肽序列粗品，純化后凍干，得到純化的類肉毒多肽；類肉毒多肽納米膠束的制備：純化的類肉毒多肽配制成濃度大于等于0.2mg/mL的溶液，此時類肉毒多肽自組裝為納米膠束。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種類肉毒多肽的制備方法，其特征在于，所述疏水基團修飾為肉豆蔻酰修飾或棕櫚酰修飾。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種類肉毒多肽的制備方法，其特征在于，用樹脂為載體，使用多肽固相有機合成技術(shù)，在N,N
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二甲基甲酰胺體系中，以Fmoc合成策略，合成疏水基團修飾的多肽序列，純化后凍干，得到純化多肽。4.根據(jù)權(quán)利要求2所述方法制備得到的類肉毒多肽，其特征在于，該類肉毒多肽氨基酸序列為：R
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Glu
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Asn
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Arg
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Ser
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Phe
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Met
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Glu
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Leu
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Glu
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【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：李晨，王向東，
申請(專利權(quán))人：陜西未來多肽生物科技有限公司，
類型：發(fā)明
國別省市：