【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及多肽制備，具體涉及一種環六肽及其制備方法和應用。
技術介紹
1、環肽藥物在醫藥領域因其卓越的高親和力、杰出的穩定性以及極低的細胞毒性而備受贊譽。在化妝品行業中，環肽同樣展現出獨特的魅力。化妝品中的環肽，相較于其環化前的線性形態，整體呈現出高穩定性、高親和力及強皮膚滲透性的顯著特點。其中，六肽-3(h-lys-leu-asp-ala-pro-thr-oh)，作為化妝品原料中的佼佼者，具有促進i型和ii型膠原蛋白再生、減輕皺紋深度和長度的多重抗皺功效。
2、傳統的大環肽制備，即由5個及以上氨基酸組成的環肽結構，主要通過兩大途徑實現：其一為液相環合法，該方法先利用固相制備技術在樹脂上制備出直鏈肽，隨后在側鏈保護的狀態下將直鏈肽從樹脂上裂解下來；接著，在有機溶劑中引入縮合劑促使直鏈肽的首尾相連形成環狀結構；最后，去除側鏈保護基團后經過純化、凍干處理，得到環肽。然而，將該方法步驟繁瑣且效率低下，導致產率較低，同時伴隨大量副產物的產生；其二為固相環合法，該方法直接在樹脂上構建環肽結構，但實施條件較為苛刻：其要求起始氨基酸必須是側鏈帶有羧基的谷氨酸或天冬氨酸，且這些羧基必須處于未保護狀態，而主鏈的羧基則要通過丙烯酯加以保護。氨基酸連接完成后，還要依賴昂貴的四苯基磷鈀進行脫保護反應，增加了生產成本，限制了固相環合在環肽制備領域的廣泛應用。
技術實現思路
1、針對現有技術存在的不足，本專利技術提供了一種環六肽及其制備方法和應用，本專利技術以芴甲氧羰基-n6-三甲基硅乙氧羰酰
2、為了實現上述目的，本專利技術采用的技術方案為：
3、本專利技術的第一個目的是提供一種環六肽，所述環六肽的結構式為：
4、
5、本專利技術的第二個目的是提供上述環六肽的制備方法，包括如下步驟：
6、s1、采用n,n-二異丙基乙胺提供堿性環境，將芴甲氧羰基-n6-三甲基硅乙氧羰酰基-l-賴氨酸與2-氯代三苯甲基氯混合于堿性環境中，2-氯代三苯甲基氯的氯原子與芴甲氧羰基-n6-三甲基硅乙氧羰酰基-l-賴氨酸上的羥基發生取代反應，得到fmoc-lys(teoc)-o-trt-2-cl。
7、s2、脫除fmoc-lys(teoc)-o-trt-2-cl中保護基團三甲基硅乙氧羰基，得到fmoc-lys-o-trt-2-cl，采用n,n二異丙基丙胺提供堿性環境，將fmoc-lys-o-trt-2-cl與二氯樹脂混合于堿性環境中，二氯樹脂上的一個氯原子與fmoc-ly?s-o-trt-2-cl上的羧基負離子發生親核取代反應，得到fmoc-lys(2-ctcresin)-o-trt-2-cl。
8、s3、脫除fmoc-lys(2-ctcresin)-o-trt-2-cl的保護基團芴甲氧羰基，得到h-lys(2-ctcresin)-o-trt-2-cl，將h-lys(2-ctcresin)-o-trt-2-cl與芴甲氧羰基-o-叔丁基-l-蘇氨酸進行縮合反應，得到fmoc-thr(otbu)-lys(2-ctcresin)-o-trt-2-cl。
9、s4、脫除fmoc-thr(otbu)-lys(2-ctcresin)-o-trt-2-cl的保護基團芴甲氧羰基，得到h-thr(otbu)-lys(2-ctcresin)-o-trt-2-cl，將h-thr(otbu)-lys(2-ct?cresin)-o-trt-2-cl與芴甲氧羰基-l-脯氨酸進行縮合反應，得到fmoc-pro-thr(otbu)-lys(2-ctcresin)-o-trt-2-cl。
10、s5、脫除fmoc-pro-thr(otbu)-lys(2-ctcresin)-o-trt-2-cl的保護基團芴甲氧羰基，得到h-pro-thr(otbu)-lys(2-ctcresin)-o-trt-2-cl，將h-pro-thr(otbu)-lys(2-ctcresin)-o-trt-2-cl與芴甲氧羰基-l-丙氨酸進行縮合反應，得到fmo?c-ala-pro-thr(otbu)-lys(2-ctcresin)-o-trt-2-cl。
11、s6、脫除fmoc-ala-pro-thr(otbu)-lys(2-ctcresin)-o-trt-2-cl的保護基團芴甲氧羰基，得到h-ala-pro-thr(otbu)-lys(2-ctcresin)-o-trt-2-cl，將h-ala-pro-thr(otbu)-lys(2-ctcresin)-o-trt-2-cl與芴甲氧羰基-天冬氨酸-4-叔丁酯進行縮合反應，得到fmoc-asp(otbu)-ala-pro-thr(otbu)-lys(2-ctcresin)-o-trt-2-cl。
12、s7、脫除fmoc-asp(otbu)-ala-pro-thr(otbu)-lys(2-ctcresin)-o-trt-2-cl的保護基團芴甲氧羰基，得到h-asp(otbu)-ala-pro-thr(otbu)-lys(2-ctcresin)-o-trt-2-cl，將h-asp(otbu)-ala-pro-thr(otbu)-lys(2-ctcresin)-o-trt-2-cl與芴甲氧羰基-l-亮氨酸進行縮合反應，得到fmoc-leu-asp(otbu)-ala-pro-thr(otb?u)-lys(2-ctcresin)-o-trt-2-cl。
13、s8、脫除fmoc-leu-asp(otbu)-ala-pro-thr(otbu)-lys(2-ctcresin)-o-trt-2-cl的保護基團芴甲氧羰基，得到h-leu-asp(otbu)-ala-pro-thr(otbu)-lys(2-ctcresin)-o-trt-2-cl。
14、s9、脫除h-leu-asp(otbu)-ala-pro-thr(otbu)-lys(2-ctcresin)-o-trt-2-cl的保護基團2-氯代三苯甲基后，得到h-leu-asp(otbu)-ala-pro-thr(otb本文檔來自技高網...
【技術保護點】
1.一種環六肽的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：
2.根據權利要求1所述的環六肽的制備方法，其特征在于，步驟S1中，芴甲氧羰基-N6-三甲基硅乙氧羰酰基-L-賴氨酸與2-氯代三苯甲基氯的摩爾比為1：1～2；
3.根據權利要求1所述的環六肽的制備方法，其特征在于，步驟S2中，采用四丁基氟化銨和N,N-二異丙基乙胺的混合溶液脫除Fmoc-Lys(Teoc)-O-TRT-2-Cl中保護基團三甲基硅乙氧羰基，且四丁基氟化銨與N,N-二異丙基乙胺的摩爾比為2～3：3～4。
4.根據權利要求1所述的環六肽的制備方法，其特征在于，步驟S3～S8中，脫除保護基團芴甲氧羰基的操作相同，具體為：
5.根據權利要求1所述的環六肽的制備方法，其特征在于，步驟S3～S7中，縮合反應的操作相同，具體為：
6.根據權利要求1所述的環六肽的制備方法，其特征在于，步驟S9中，采用醋酸、三氟乙醇和二氯甲烷的混合溶液脫除H-Leu-Asp(otbu)-Ala-Pro-Thr(otbu)-Lys(2-CTCResin)-O-TRT-2-Cl的保護基團2-氯
7.根據權利要求1所述的環六肽的制備方法，其特征在于，步驟S10中，縮合反應的操作為：以六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷和N,N-二異丙基乙胺為縮合劑，將H-Leu-Asp(otbu)-Ala-Pro-Thr(otbu)-Lys(2-CTCResin)-OH和縮合劑共同混合于N,N-二甲基甲酰胺中，在氮氣氛圍中，于20℃～25℃下反應1h～2h；
8.根據權利要求1所述的環六肽的制備方法，其特征在于，步驟S11中，切肽反應的操作為：以三氟乙酸和三異丙基硅烷為切肽液，將切肽液和Cyclo(Leu-Asp(otbu)-Ala-Pro-Thr(otbu)-Lys(2-CTCResin))混合，在氮氣氛圍中，于20℃～25℃下反應1h～2h；
9.一種權利要求1～8任一項所述的制備方法制得的環六肽，其特征在于，所述環六肽的結構式為：
10.一種權利要求9所述的環六肽在制備環肽產品中的應用。
...【技術特征摘要】
1.一種環六肽的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：
2.根據權利要求1所述的環六肽的制備方法，其特征在于，步驟s1中，芴甲氧羰基-n6-三甲基硅乙氧羰酰基-l-賴氨酸與2-氯代三苯甲基氯的摩爾比為1：1～2；
3.根據權利要求1所述的環六肽的制備方法，其特征在于，步驟s2中，采用四丁基氟化銨和n,n-二異丙基乙胺的混合溶液脫除fmoc-lys(teoc)-o-trt-2-cl中保護基團三甲基硅乙氧羰基，且四丁基氟化銨與n,n-二異丙基乙胺的摩爾比為2～3：3～4。
4.根據權利要求1所述的環六肽的制備方法，其特征在于，步驟s3～s8中，脫除保護基團芴甲氧羰基的操作相同，具體為：
5.根據權利要求1所述的環六肽的制備方法，其特征在于，步驟s3～s7中，縮合反應的操作相同，具體為：
6.根據權利要求1所述的環六肽的制備方法，其特征在于，步驟s9中，采用醋酸、三氟乙醇和二氯甲烷的混合溶液脫除h-leu-asp(otbu)-ala-pro-thr(otbu)-lys(2-ctcresin)-o-t...
【專利技術屬性】
技術研發人員：王惠嘉，王向東，雷鑫，苗苗，劉暢，王麗妮，
申請(專利權)人：陜西未來多肽生物科技有限公司，
類型：發明
國別省市：
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