【技術實現步驟摘要】
本專利技術屬于激光顯微切割，具體涉及直流電場輔助激光顯微切割細胞組織樣品收集裝置和方法。
技術介紹
1、激光顯微捕獲切割技術可直接從復雜的細胞組織中分離、捕獲和保存特定細胞亞群或單一細胞，可避免在實驗樣本收集過程中被其他細胞、細菌或其他雜質污染。現有各激光顯微捕獲切割系統間的核心技術差異在于切割過程后對細胞無污染收集的裝置或方法。
2、中國專利(公開號：cn100526453c)公開了使用預先帶負電荷的聚酰亞胺薄膜及帶有的極性材料的收集器來收集切割后細胞的方法，該方法依賴于攜帶靜電的聚酰亞胺薄膜。其的缺點是:第一，只適用于聚酰亞胺薄膜，且是預先攜帶負電荷的聚酰亞胺薄膜，該膜所帶電荷有限，無法滿足對較厚或面積較大樣品的收集，且長時間儲存導致的電荷流失會降低收集效果；第二，由于工業界難以生產3微米厚度以下的聚酰亞胺薄膜，較厚的薄膜激光難以切割或在切割后在切割線邊緣易留下燒焦痕跡。
3、中國專利(公告號：cn102628758b和公開號：cn102634455a)等公開了利用光電效應對細胞組織樣品充電的技術，克服了聚酰亞胺薄膜在長期儲存過程中存在電荷流失的問題，進一步推動了靜電捕獲技術的發展。然而，其存在以下缺點：第一，每次使用裝置進行細胞切割前，均需對細胞組織樣品進行充電操作，光敏材料在光源照射下單位時間內所產生的負電荷有限，要完成細胞組織樣品的充電需耗費一定時間，切割多個細胞組織樣品耗時長；第二，要使系統完成對細胞組織樣品充電、切割和收集需多次對多個開關以特定順序進行操作，步驟繁瑣。
4、因此，
技術實現思路
1、本專利技術的目的在于克服現有技術的不足之處，提供了一種直流電場輔助激光顯微切割細胞組織樣品收集裝置和方法，對薄膜材料要求低、限制少，細胞組織樣品的收集過程操作簡單，無需使用光敏材料對細胞組織樣品充電，在切割細胞組織樣品后只需單次操作即可瞬間完成靜電捕獲，且在收集過程中不會對擬收集的細胞組織樣品造成不良影響，可實現細胞組織樣品的純凈、無污染、無損傷收集，解決了上述
技術介紹
中的問題。
2、本專利技術解決其技術問題所采用的技術方案之一是：提供了一種直流電場輔助激光顯微切割細胞組織樣品收集裝置，包括載物臺、樣品收集器和直流電場組件；
3、所述載物臺固定有載玻片，所述載玻片表面貼覆透明薄膜，所述透明薄膜上附著有細胞組織樣品；
4、所述樣品收集器在正對載物臺附著細胞組織樣品的一側表面附有細胞粘附劑，所述細胞粘附劑與細胞組織樣品之間存在一定間距；
5、所述直流電場組件包括第一金屬電極、第二金屬電極和直流電壓源；所述第一金屬電極設置于載物臺與載玻片之間，并與所述載玻片緊密貼合；所述第二金屬電極設置于樣品收集器；所述直流電壓源的正、負極分別與第一金屬電極、第二金屬電極或第二金屬電極、第一金屬電極連接。
6、在本專利技術一較佳實施例中，所述第一金屬電極與載物臺之間設有絕緣層。
7、在本專利技術一較佳實施例中，所述載物臺上設有通孔，所述通孔的尺寸滿足激光顯微切割視場要求；所述絕緣層、第一金屬電極為圍繞通孔設置的環狀。
8、在本專利技術一較佳實施例中，所述第二金屬電極為圓形，設置于樣品收集器遠離載物臺一側，且第二金屬電極的尺寸不大于所述樣品收集器。
9、在本專利技術一較佳實施例中，所述載玻片通過粘合劑與透明薄膜連接，所述粘合劑包括紫外光固化膠水或其他光固化膠水，涂膠厚度小于2毫米。
10、在本專利技術一較佳實施例中，所述第一金屬電極和第二金屬電極在直流電壓源開關閉合條件下形成直流靜電場，所述直流靜電場的電場方向與細胞組織樣品和細胞粘附劑之間的連線方向一致。
11、在本專利技術一較佳實施例中，所述載物臺水平設置，所述樣品收集器位于載物臺的正上方。
12、在本專利技術一較佳實施例中，所述透明薄膜采用熱塑性聚合物材料，厚度為1微米至6微米。
13、在本專利技術一較佳實施例中，所述樣品收集器采用絕緣材料，包括pcr管蓋；所述細胞粘附劑包括瓊脂；所述第一金屬電極、第二金屬電極包括銅箔。
14、本專利技術解決其技術問題所采用的技術方案之二是：提供了直流電場輔助激光顯微切割細胞組織樣品收集方法，采用上述的直流電場輔助激光顯微切割細胞組織樣品收集裝置進行直流電場輔助激光顯微切割細胞組織樣品收集，包括如下步驟：
15、(1)將細胞組織樣品粘附于透明薄膜表面，固定于載物臺上；
16、(2)選定細胞組織樣品的切割區域，控制激光顯微切割設備進行切割，激光束沿所選區域邊界照射一周，實現細胞組織樣品的切割；
17、(3)開啟直流電壓源，在載玻片與樣品收集器之間形成一定強度的靜電場，被切割下的透明薄膜及其表面的細胞組織樣品在靜電場作用下從載玻片的表面飛向樣品收集器表面的細胞粘附劑，實現細胞組織樣品的收集。
18、在本專利技術一較佳實施例中，提供了當使用得電子能力強(親電子)的透明薄膜材料時，直流電壓源的正極接第二金屬電極，負極接第一金屬電極；所述透明薄膜材料如聚酰亞胺pi；
19、當使用得電子能力弱(易失電子)的透明薄膜材料時，直流電壓源的正極接第一金屬電極，負極接第二金屬電極；所述透明薄膜材料如聚對苯二甲酸乙二醇酯pet。
20、本技術方案與
技術介紹
相比，它具有如下優點：
21、1.本專利技術突破了現有技術中對透明薄膜材料的限制，解決了對薄膜材料帶電能力要求高、長期儲存電荷易流失等問題；
22、2.本專利技術采用穩定的直流電場輔助細胞組織樣品的靜電吸附，解決了現有技術方法中需引入光敏材料利用充電光源對細胞組織樣品提前充電，切割多個組織樣品耗時長的問題；
23、3.本專利技術收集裝置可引入到正置或倒置的激光顯微細胞切割系統中，兼容性強，該系統功能穩定且在收集過程中不會對細胞組織樣品造成不良影響，可實現細胞組織樣品的純凈、無污染、無損傷收集，利于后續的分析。
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1.直流電場輔助激光顯微切割細胞組織樣品收集裝置，其特征在于：包括載物臺、樣品收集器和直流電場組件；
2.根據權利要求1所述的直流電場輔助激光顯微切割細胞組織樣品收集裝置，其特征在于：所述第一金屬電極與載物臺之間設有絕緣層。
3.根據權利要求2所述的直流電場輔助激光顯微切割細胞組織樣品收集裝置，其特征在于：所述載物臺上設有通孔，所述通孔的尺寸滿足激光顯微切割視場要求；所述絕緣層、第一金屬電極為圍繞通孔設置的環狀。
4.根據權利要求1所述的直流電場輔助激光顯微切割細胞組織樣品收集裝置，其特征在于：所述第二金屬電極為圓形，設置于樣品收集器遠離載物臺一側，且第二金屬電極的尺寸不大于所述樣品收集器。
5.根據權利要求1所述的直流電場輔助激光顯微切割細胞組織樣品收集裝置，其特征在于：所述載玻片通過粘合劑與透明薄膜連接，所述粘合劑包括光固化膠水，涂膠厚度小于2毫米。
6.根據權利要求1所述的直流電場輔助激光顯微切割細胞組織樣品收集裝置，其特征在于：所述第一金屬電極和第二金屬電極在直流電壓源開關閉合條件下形成直流靜電場，所述直流靜電場
7.根據權利要求1所述的直流電場輔助激光顯微切割細胞組織樣品收集裝置，其特征在于：所述透明薄膜采用熱塑性聚合物材料，厚度為1微米至6微米。
8.根據權利要求1所述的直流電場輔助激光顯微切割細胞組織樣品收集裝置，其特征在于：所述樣品收集器采用絕緣材料，包括PCR管蓋；所述細胞粘附劑包括瓊脂；所述第一金屬電極、第二金屬電極包括銅箔。
9.直流電場輔助激光顯微切割細胞組織樣品收集方法，其特征在于：采用如權利要求1-8任一項所述的直流電場輔助激光顯微切割細胞組織樣品收集裝置進行直流電場輔助激光顯微切割細胞組織樣品收集，包括如下步驟：
10.根據權利要求9所述的直流電場輔助激光顯微切割細胞組織樣品收集方法，其特征在于：當使用聚酰亞胺作為透明薄膜材料時，直流電壓源的正極接第二金屬電極，負極接第一金屬電極；當使用聚對苯二甲酸乙二醇酯作為透明薄膜材料時，直流電壓源的正極接第一金屬電極，負極接第二金屬電極。
...【技術特征摘要】
1.直流電場輔助激光顯微切割細胞組織樣品收集裝置，其特征在于：包括載物臺、樣品收集器和直流電場組件；
2.根據權利要求1所述的直流電場輔助激光顯微切割細胞組織樣品收集裝置，其特征在于：所述第一金屬電極與載物臺之間設有絕緣層。
3.根據權利要求2所述的直流電場輔助激光顯微切割細胞組織樣品收集裝置，其特征在于：所述載物臺上設有通孔，所述通孔的尺寸滿足激光顯微切割視場要求；所述絕緣層、第一金屬電極為圍繞通孔設置的環狀。
4.根據權利要求1所述的直流電場輔助激光顯微切割細胞組織樣品收集裝置，其特征在于：所述第二金屬電極為圓形，設置于樣品收集器遠離載物臺一側，且第二金屬電極的尺寸不大于所述樣品收集器。
5.根據權利要求1所述的直流電場輔助激光顯微切割細胞組織樣品收集裝置，其特征在于：所述載玻片通過粘合劑與透明薄膜連接，所述粘合劑包括光固化膠水，涂膠厚度小于2毫米。
6.根據權利要求1所述的直流電場輔助激光顯微切割細胞組織樣品收集裝置，其特征在于：所述第一金屬電極和第二金屬電極在直流電壓源...
【專利技術屬性】
技術研發人員：易定容，邱展斌，周博聰，雷廷平，陳超凡，陳鍶鈴，郭梓彬，
申請(專利權)人：華僑大學，
類型：發明
國別省市：
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