SPARC 血管生成結構域和使用方法技術

本發明專利技術提供了組合物和方法，其利用了SPARC羧基血管生成結構域的發現。

【技術實現步驟摘要】
【國外來華專利技術】SPARC血管生成結構域和使用方法相關申請的交叉參考本專利申請要求2010年3月11日提交的美國臨時專利申請號61/313，050和2010年3月11日提交的61/313，047的權益，二者通過引用方式全文并入本文。
技術介紹
分泌的、酸性的、富含半胱氨酸的蛋白(SPARC)，也被稱作骨結合素(osteonectin)，是286個氨基酸的糖蛋白。SPARC具有針對多種配體的親和性，包括陽離子(例如Ca2+，Cu2+，Fe2+)，生長因子(例如血小板衍生的生長因子(PDGF)和血管內皮生長因子(VEGF))，細胞外基質(ECM)蛋白(例如膠原I-V和膠原IX，玻連蛋白和凝血酶敏感蛋白-1)，內皮細胞，血小板，白蛋白和羥磷灰石。SPARC的表達是發育調節的，并且主要在正常發育或響應于損傷而經歷重塑的組織中表達(見，例如Laneet a I.，FASEBJ.，8，163-173(1994))。在發育中的骨和牙齒中有高水平的SPARC蛋白表達。SPARC在數種攻擊性癌癥中上調，但是在大多數正常組織中不存在(Porter etal. , J. Histochem. Cytochem. , 43, 791 (1995)以及見下文)。在多種腫瘤(例如，膀胱、肝、卵巢、腎、腸和乳腺)中SPARC的表達被誘導。例如，在膀胱癌中，已經表明SPARC的表達與晚期癌相關。已經表明T2階段或更高階段的侵襲性膀胱腫瘤表達比Tl階段的膀胱腫瘤(或較低表面的腫瘤)更高水平的SPARC,并具有更差的預后(見,例如Yamanaka et al.，J.Urology, 166，2495-2499 (2001))。在腦膜瘤中，已經表明SPARC的表達僅與侵襲性腫瘤相關(見，例如 Rempel et al. , ClincalCancer Res.，5，237-241 (1999))。也已經在 74. 5% 的原位侵襲性乳腺癌損傷(見，例如 Bellahcene, et al. , Am. J. Pathol. , 146, 95-100 (1995))和54. 2% 的浸潤性乳腺導管癌(見，例如Kim et al.，J. Korean Med. Sci.，13，652-657(1998))中檢測到SPARC表達。也已經表明SPARC的表達與乳腺癌中的常見的微鈣化相關(見，例如Bellahcene et al.，見上文)，這說明SPARC的表達可能對于乳腺轉移酶對于骨的親和性起作用 ο 還已知 SPARC 結合白蛋白(見，例如 Schnitzer, J. Biol. Chem.，269，6072 (1994))。因此，利用SPARC在疾病中的作用、例如SPARC在一些癌癥中的作用的組合物和方法是需要的。特別地，利用SPARC的結構域特異性活性、例如SPARC羧基血管生成結構域的特異性活性的組合物和方法是需要的。
技術實現思路
本專利技術提供了分離的“SPARC血管生成結構域多肽”，所述多肽的用途，以及檢測和定量所述多肽的方法。此外，本專利技術提供了 “SPARC血管生成結構域多肽”的用途和檢測及定量包含該結構域的多肽的方法。本專利技術提供了使用治療法治療患有SPARC依賴性疾病的動物的方法，包括(a)定量所述動物的疾病位點處的SPARC血管生成結構域多肽的量，以及，任選地，定量包含SPARC血管生成結構域的全長SPARC的量；(b)在一個或多個患有相同的SPARC依賴性病況或疾病的、已知響應于所述治療法的其它動物的疾病位點處定量SPARC血管生成結構域多肽的量，以及，任選地，定量包含SPARC血管生成結構域的全長SPARC的量；(c)計算(b)中測定的SPARC血管生成結構域多肽的量的平均值，如果包括的話，計算(b)中測定的包含SPARC血管生成結構域的全長SPARC的量的平均值；(d)將(a)中測定的所述量與(c)中測定的所述平均值相比較；和(e)如果(a)中測定的所述量大于或等于(C)中測定的所述平均值，則施用所述治療法。"SPARC依賴性疾病”意思是需要一定水平的SPARC以維持疾病或病況的疾病或病況。“一個或多個患有SPARC依賴性病況或疾病的、已知響應于所述治療法的其它動物”意思是至少一個動物，但是也包括產生與(a)中的動物相比的統計上的顯著性的任何數目。存在于疾病位點生物活組織檢查材料中的SPARC血管生成結構域和SPARC血管生成結構域多肽可以通過本領域普通技術人員已知的任何適宜的方式來檢測和定量，包括例如，用于常規免疫組織化學和基于溶液的測定法(例如ELISA)的針對SPARC血管生成結構域的抗體和質譜法。“疾病位點”意思是疾病為活性的解剖位置。本專利技術提供了分離的多肽，其包含缺失SEQ ID NO: I的連續氨基酸的全長SPARC 多肽，和分離的、羧基截短的SPARC多肽，其為全長SPARC多肽的羧基末端的酶消化產物并且其保留不超過5%的SEQID NO: I的血管生成活性。本專利技術提供了治療動物中的腫瘤的方法，包括施用治療有效量的本文公開的缺乏血管生成活性的任意一種或多種SPARC多肽，包括例如，分離的、羧基截短的SPARC多肽，其為全長SPARC多肽的羧基末端的酶消化產物并且其保留不超過5%的SEQ ID NO: I的血管生成活性、特別是SEQ ID NO:2。本專利技術提供了預測患有SPARC依賴性疾病的動物對于治療法的陽性應答的方法，包括Ca)定量疾病位點處的SPARC血管生成結構域多肽和包含SPARC血管生成結構域的全長SPARC多肽的量；(b)將SPARC的所述量與患有SPARC依賴性疾病的、已知對該治療法有應答的動物中存在的SPARC的量進行比較；和(0)如果包含SEQ ID NO: I的多肽的量高于或低于閾值水平，則預測對于該治療法的陽性應答。本專利技術提供了治療患有SPARC依賴性病況或疾病的動物的方法，包括使用免疫有效量的(即引發免疫應答的量的)包含SPARC血管生成結構域多肽的免疫原接種所述動物。本專利技術提供了治療患有SPARC依賴性病況或疾病的動物的方法，包括向所述動物施用治療有效量的多肽，所述多肽結合SPARC血管生成結構域、抑制SPARC血管生成結構域的活性并在疾病位點處聚集。合適的SPARC血管生成結構域結合性肽包括，例如，其中多肽綴合于化療、放射或生物試劑。合適的SPARC血管生成結構域結合性多肽包括抗體和抗體片段。附圖說明圖I是顯示在PC3模型中與Abraxane和Sutent —起施用的外源SPARC的效果的數據的示意圖。圖2圖示了 HUVEC 3-D管形成測定法的結果，其表征了 SPARC的血管生成活性。圖3圖示了 SDS-PAGE測定法的結果，其中野生型SPARC與SPARC_d (2種C末端截短的SPARC蛋白的混合物)并排跑膠。圖4是獲自HUVEC 3_D管形成測定法的數據的示意圖，其表征了野生型SPARC和SPARC-d。具體實施例方式人SPARC基因編碼303個氨基酸的SPARC蛋白(SEQ ID NO: I)。其主要翻譯產物是通過切割氨基末端信號序列而被加工的，產生SPARC的成熟形式即285個氨基酸的糖蛋白(統稱“全長SPARC”形式)。切割氨基末端信號序列之后，產生了 32-kD的分泌形式，本文檔來自技高網...

【技術保護點】

【技術特征摘要】
【國外來華專利技術】...

【專利技術屬性】
技術研發人員：V·特里魯，D·克瑙爾，N·德塞，
申請(專利權)人：阿布拉西斯生物科學有限責任公司，
類型：
國別省市：