抗原或藥物遞送復合物制造技術

本發明專利技術的目的是提供抗原遞送復合物或藥物遞送復合物，其特征是安全性和效價高，可以大規模生產和保存，并具有細胞或器官趨向性。本發明專利技術提供了抗原或藥物遞送復合物，其特征是含有抗原或藥物與陽離子型分子的復合物以及包合所述復合物的陰離子型分子，并具有細胞或器官趨向性。本發明專利技術的抗原或藥物遞送復合物可用作向特定細胞或器官遞送各種抗原或藥物的藥物遞送系統的主要組分。

【技術實現步驟摘要】
【國外來華專利技術】
本專利技術涉及新型抗原遞送復合物、疫苗、藥物遞送復合物等。
技術介紹
近年來，針對新發性和再發性感染性疾病，開發了失活疫苗和低毒性疫苗，獲得了高的預防效果。但是，日本對感染病疫苗的開發晚得多。為了撲滅發展中國家中的特定感染性疾病或者應對大流行病，需要研發能夠大量生產和長期保存，并且具有更高安全性和更強效價的疫苗。其中，DNA疫苗可以廉價地大量生產，其有效性受到期待，但從安全性或效價的觀點來看則尚未達到成功。此外，需要研發適用于激活全身免疫的靜脈注射、皮下/皮內注射的制劑，適用于粘膜免疫的經口、吸入或滴鼻給藥的制劑。 此外，針對人乳頭瘤病毒的疫苗作為宮頸癌疫苗已得到認可，據報道表現出較高的效果。但是，針對癌癥抗原的疫苗療法在世界范圍內尚未確立。雖然有使用多種多樣的抗原或DNA的疫苗的報道，但尚未獲得充分的免疫誘導效果，不能在臨床上應用。特別地，DNA疫苗可選擇性活化與癌癥相關的細胞免疫，期待其可增強抗癌免疫。此外，雖然由于可廉價地大規模生產而令人注目，但從安全性和效價的觀點來看還沒有成功的例子。DNA藥物根據堿基的組合變化，表現出不同的藥理作用，可以廉價的大量生產，因此其作為有效的醫藥制品受人期待。迄今為止，已開發了各種作為基因遞送載體的納米構建體，報道了它們的器官特異性或細胞特異性。但是，由于安全性和效率低下，還不能在臨床上應用。由于多數使用合成材料，尚未確定其安全性，而且醫療成本的負擔也大。需要開發安全性高、具有普遍適用性的器官特異性載體。使載體具有器官趨向性有多種方法，一種方法是使用易于在目標器官中積累的特定分子，還有使用其他抗體、適體等具有特異性結合能力的分子的方法。本專利技術人通過前者的方法，應用藥物遞送復合物(專利文獻I)的技術，進一步簡單地加入生物可降解的脂類，成功地構建了對脾和肺具有選擇性的新型靶向化系統。具體地，只需向包合有DNA的陽離子型核中加入磷脂酰絲氨酸(帶負電)，就可以提高納米顆粒的安全性，向小鼠靜脈注射后，實現僅在脾臟中的選擇性的基因表達。脾臟富含免疫細胞，借助向脾臟的選擇性基因表達，可以開發DNA疫苗。進一步地，通過添加N-月桂酰肌氨酸(帶負電)代替磷脂酰絲氨酸，同樣可以提高納米顆粒的安全性，向小鼠靜脈注射后，實現僅在肺中的選擇性基因表達(非專利文獻I)。現有技術文獻專利文獻專利文獻I :特開2010-059064號非專利文獻非專利文獻I :Journal of Controlled Release, 136，213-219 (2009)專利技術概述專利技術要解決的技術問題本專利技術的技術問題是提供安全、高效價，可以大量生產、保存的抗原遞送復合物、疫苗、藥物遞送復合物等。特別地，本專利技術的技術問題是提供以具有對細胞或器官的趨向性為特征的抗原或藥物遞送復合物。解決技術問題的手段本專利技術人為了解決上述技術問題進行了深入的研究，結果發現，通過將瘧疾抗原DNA與陽離子型分子的復合物用Y-聚谷氨酸、硫酸軟骨素、海藻酸中的任一種陰離子型分子包被而形成實質上不帶電荷或者具有負的表面電荷的復合物，細胞毒性低，不會引起紅細胞凝集，在各種細胞中表現出高的轉染效率，進一步通過在體內全身給藥，能夠高效地將抗原DNA遞送至脾臟。此外發現，通過多次給藥可以產生對瘧疾特異性的抗體，由此可以抑制瘧疾感染。進一步發現，在使用編碼作為癌抗原的惡性黑色素瘤表面抗原的PDNA的情況下，可以誘導 對惡性黑色素瘤特異性的細胞免疫，抑制惡性黑色素瘤的增殖和轉移。此外，本專利技術人將失活病毒或癌抗原與陽離子型分子的復合物用Y-聚谷氨酸、硫酸軟骨素、海藻酸中的任一種陰離子型分子包被，成功地制備了實質上不帶電荷的、或者具有負的表面電荷的復合物。進一步發現，所獲得的疫苗能夠順利地被遞送到樹突狀細胞內，在對實驗動物給藥時表現出高的免疫誘導效果。此外，本專利技術人應用專利文獻I記載的技術，成功的構建了使得細胞或器官特異性遞送成為可能的新型靶向化系統。具體地說，成功的開發了具有下述特征的抗原或藥物遞送復合物其含有抗原或藥物與陽離子型分子的復合物以及包合該復合物的陰離子型分子，并具有對細胞或器官的趨向性。此外，通過向抗原或藥物與陽離子型分子的復合物添加選自磷脂酰絲氨酸、N-月桂酰肌氨酸和甘草皂苷的陰離子型分子，成功的制備了被賦予對脾、肺或肝的選擇性(器官選擇性)的抗原或藥物遞送復合物。進一步發現，使用Y-聚谷氨酸作為陰離子型分子，可以制備出具有樹突狀細胞趨向性的復合物。這些復合物是抗原或藥物與陽離子型分子的復合物，以及陰離子型分子通過靜電結合而成的，因此已確定安全性極高，且沒有細胞毒性。此外，還通過向抗原或藥物與陽離子型分子的復合物添加選自適體、miRNA和抗體的陰離子型分子，成功地制備了被賦予更特異的細胞或器官選擇性的復合物。此外，在使用公知的成像用核素(成像探針)或診斷試劑作為抗原或藥物時，也成功地將上述復合物用作將成像用核素(成像探針)或診斷試劑遞送至特定細胞或器官的運輸載體。換言之，本專利技術提供了以下內容。抗原或藥物遞送復合物，其含有抗原或藥物與陽離子型分子的復合物、以及陰離子型分子，并且具有對細胞或器官的趨向性，所述陰離子型分子包合(內包)所述抗原或藥物與陽離子型分子的復合物。 記載的復合物，所述抗原或藥物是核酸、肽、蛋白質或失活的病毒。 或記載的復合物，其特征是所述陰離子型分子選自磷脂酰絲氨酸、月桂酰肌氨酸和甘草皂苷，具有對脾臟、肺或肝臟的趨向性。 記載的復合物，其特征是所述陰離子型分子是磷脂酰絲氨酸；抗原或藥物與陽離子型分子、磷脂酰絲氨酸的配比為1:2:4-1:8:8 ;且具有對脾臟的趨向性。 記載的復合物，其特征是所述陰離子型分子是月桂酰肌氨酸；陽離子型分子由陽離子型高分子和陽離子型脂類組成；抗原或藥物與陽離子型高分子、陽離子型脂類、月桂酰肌氨酸的配比為1:2:2:1-1:2:2:4 ;且具有對肺的趨向性。 記載的復合物，其特征是所述陰離子型分子是甘草皂苷；抗原或藥物與陽離子型分子、甘草皂苷的配比為1:2:8-1:8:16;且具有對肝臟的趨向性。 或記載的復合物，其特征是所述陰離子型分子是Y-聚谷氨酸，具有對樹突狀細胞或脾臟的趨向性。 記載的復合物，其特征是抗原或藥物與陽離子型分子、Y-聚谷氨酸的配比為1:2:8-1:8:16 ;且具有對樹突狀細胞或脾臟的趨向性。 或記載的復合物，所述陰離子型分子選自適體、miRNA和抗體。 記載的復合物，所述抗原或藥物與陽離子型分子、陰離子型分子的配比為1:2:8-1:8:16。 -的任一項記載的復合物，所述復合物由抗原或藥物；和選自聚賴氨酸、聚精氨酸、聚組氨酸、聚乙烯亞胺和陽離子型樹形化合物(dendrimer)的陽離子型高分子；或選自DOTMA、DOTAP、DC-Chol和苯扎氯銨的陽離子型脂類組成。 -的任一項記載的復合物，所述復合物由抗原或藥物；選自D0TMA、DOTAP和DC-Chol的陽離子型脂類；以及選自DOPE和膽固醇的脂類組成的脂質體或膠粒組成。用于成像的、包含權利要求1-12的任一項記載的復合物的成像用核素的載體。 記載的載體，其特征是抗原或藥物是由成像用核素、陽離子型樹形化合物(dendrimer)和螯合劑組成的復合物；陽離子型分子是聚乙烯亞胺；陰離子型分子是Y-聚谷氨酸；本文檔來自技高網...

【技術保護點】

【技術特征摘要】
【國外來華專利技術】...

【專利技術屬性】
技術研發人員：佐佐木均，黑崎友亮，北原隆志，藤秀人，由井克之，平山謙二，森田公一，向高弘，間賀田泰寬，小川美香子，佐野纮平，
申請(專利權)人：國立大學法人長崎大學，國立大學法人九州大學，國立大學法人浜松醫科大學，
類型：
國別省市：