一種橄欖油的鑒別方法技術(shù)

一種橄欖油的鑒別方法，涉及一種植物油的鑒別。將待測(cè)液體油樣品裝入核磁管中；在核磁管中加入氘代溶劑溶解樣品，混勻待測(cè)；通過(guò)高場(chǎng)核磁共振儀采集樣品的1H氫譜和13C碳譜數(shù)據(jù)；通過(guò)核磁譜圖化學(xué)位移信息和峰面積信息進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)算得到樣品中各種主要脂肪酸組成成份相對(duì)含量，通過(guò)多個(gè)指標(biāo)綜合判斷得到鑒定結(jié)果。采用的磁共振鑒別法操作簡(jiǎn)單，測(cè)量精確，重復(fù)性高，對(duì)樣品的無(wú)損檢測(cè)使得同一樣品可進(jìn)行多次測(cè)量或用于其它分析測(cè)試，測(cè)量結(jié)果不受操作員的技術(shù)和判斷所影響，適合用于橄欖油真?zhèn)蔚目焖贆z測(cè)。

【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
本專(zhuān)利技術(shù)涉及一種植物油的鑒別，尤其是涉及基于核磁共振波譜儀NMR的一種橄欖油的鑒別方法。
技術(shù)介紹
橄欖油在地中海沿岸國(guó)家有幾千年的歷史，在西方被譽(yù)為“液體黃金”、“物油皇后”、“地中海甘露”等。橄欖油含有80%以上的不飽和脂肪酸，其中單不飽和脂肪酸油酸含量超過(guò)70%。食用富含單不飽和脂肪酸的油對(duì)控制血脂有利。它能升高血液中的“好膽固醇”(HDL)，降低血液中的“壞膽固醇”(LDL)。隨著市民生活水平的提高，打著保健旗號(hào)、有著“液體黃金”之稱的橄欖油，雖然價(jià)格比普通食用油貴10余倍，但還是受老百姓的青睞。 橄欖油主要分布于地中海國(guó)家，希臘、意大利、突尼斯、西班牙為集中產(chǎn)地，我國(guó)甘肅隴南和四川廣元地區(qū)的自然條件也適合種植。目前市面上的橄欖油有三種，即一種是從地中海沿岸國(guó)家原裝進(jìn)口，一種是原裝進(jìn)口在中國(guó)分裝，還有一種是用豆油、菜油調(diào)配假冒橄欖油。食用油業(yè)內(nèi)人士爆料，國(guó)產(chǎn)橄欖油數(shù)量非常少，售價(jià)較進(jìn)口的橄欖油便宜三成左右。有部分橄欖油用豆油、菜油調(diào)配假冒，這樣成本可節(jié)約七八成，還有的用便宜的果渣橄欖油，假冒特級(jí)初榨橄欖油，以次充好，摻假的橄欖油進(jìn)入中國(guó)，還有相當(dāng)一部分被進(jìn)一步造假。目前，國(guó)內(nèi)橄欖油真?zhèn)螜z測(cè)的技術(shù)手段有薄層色譜、熒光光譜、頂空氣相色譜聯(lián)用質(zhì)譜(GC-MS)、電導(dǎo)、氣相色譜(GC)、液相色譜以及近紅外光譜法和拉曼光譜法。但是這些方法往往因?yàn)橘M(fèi)時(shí)，前處理復(fù)雜等原因沒(méi)有得到廣泛應(yīng)用。核磁共振譜能夠?qū)崿F(xiàn)無(wú)損檢測(cè)，核磁氫譜和碳譜反映分子的結(jié)構(gòu)特征，可以對(duì)實(shí)驗(yàn)樣品中所有的脂肪酸成分進(jìn)行準(zhǔn)確地識(shí)別，能快速無(wú)損地得到各種脂肪酸組成。核磁譜圖是一種指紋譜，通過(guò)自行開(kāi)發(fā)的軟件可以進(jìn)行植物油的快速鑒定，而且此類(lèi)方法不破壞樣品的組成，不需要樣品的前處理，沒(méi)有復(fù)雜的樣品制備過(guò)程。核磁譜圖可以實(shí)現(xiàn)物質(zhì)結(jié)構(gòu)成份和相對(duì)含量的鑒別，因此在質(zhì)量監(jiān)控、安全檢查等領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用前景。中國(guó)專(zhuān)利CN101470077A公開(kāi)一種用拉曼光譜特征峰信號(hào)強(qiáng)度比之的橄欖油快速檢測(cè)方法。它是用拉曼光譜儀掃描測(cè)試樣品；通過(guò)軟件獲得基線平坦的拉曼圖譜；以144Icm^1對(duì)應(yīng)的峰的強(qiáng)度為單位1，進(jìn)行譜圖歸一化；以1265CHT1峰對(duì)應(yīng)的強(qiáng)度比為橫坐標(biāo)，以1657CHT1峰和1441CHT1峰對(duì)應(yīng)的強(qiáng)度為縱坐標(biāo)做圖，標(biāo)定樣品的坐標(biāo)點(diǎn)；以縱坐標(biāo)O. 7線作為劃分真?zhèn)伍蠙煊偷慕缦?。中?guó)專(zhuān)利CN101995392A公開(kāi)一種用近紅外光譜法結(jié)合主成分分析-徑向基函數(shù)神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)方法進(jìn)行橄欖油摻偽檢測(cè)的方法。它是通過(guò)取樣于5_檢測(cè)池中，用近紅外投射光譜法進(jìn)行光譜采集；掃描范圍1200 3700CHT1，分辨率4CHT1，掃面次數(shù)32次，選擇光譜波段，對(duì)原始數(shù)據(jù)進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)預(yù)處理；用主成分分析法進(jìn)行主成分分析，建立好的模型進(jìn)行預(yù)測(cè)，可直觀區(qū)別橄欖油和摻假橄欖油
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
本專(zhuān)利技術(shù)的目的是提供一種橄欖油的鑒別方法。本專(zhuān)利技術(shù)包括以下步驟I)將待測(cè)液體油樣品裝入核磁管中；2)在核磁管中加入氘代溶劑溶解樣品，混勻待測(cè)；3)通過(guò)高場(chǎng)核磁共振儀采集樣品的1H氫譜和13C碳譜數(shù)據(jù)；4)通過(guò)核磁譜圖化學(xué)位移信息和峰面積信息進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)算得到樣品中各種主要脂肪酸組成成份相對(duì)含量，通過(guò)多個(gè)指標(biāo)綜合判斷得到鑒定結(jié)果。在步驟I)中，所述待測(cè)液體油樣品的量可為5 500 μ L ;所述核磁管可采用5_·的核磁管。在步驟2)中，所述氘代溶劑可選自氘代甲醇，氘代氯仿，氘代苯等中的一種；所述氘代溶劑的加入量按質(zhì)量比可為待測(cè)液體油樣品的I 10倍。在步驟3)中，所述高場(chǎng)核磁共振儀可采用300MHz及以上的高場(chǎng)核磁共振儀。在步驟4)中，所述通過(guò)SMART軟件計(jì)算出各種脂肪的組成、飽和度、相對(duì)氧化度、相對(duì)酸度，脂肪酸組成的計(jì)算方法如下單不飽和脂肪酸相對(duì)含量=Σ含有一個(gè)雙鍵的脂肪酸含量/ Σ所有脂肪酸 X 100%= (Cl6 1+C18 1+C18 :3)/所有脂肪酸的質(zhì)量 X 100%。亞油酸相對(duì)含量=Σ含有二個(gè)雙鍵的脂肪酸含量/ Σ所有脂肪酸X100%=(C18 2+C20 :2)/所有脂肪酸的質(zhì)量X 100%。亞麻酸相對(duì)含量=Σ含有三個(gè)雙鍵的脂肪酸含量/ Σ所有脂肪酸X 100%= (C18 3) /所有脂肪酸的質(zhì)量X 100%?？偛伙柡投?Σ不飽和脂肪酸含量/ Σ所有脂肪酸X 100%= (C16 1+C18 1+C18 2+C20 2+C18 :3)/所有脂肪酸的質(zhì)量X 100%。在步驟4)中，所述多個(gè)指標(biāo)綜合判斷得到鑒定結(jié)果是指(I)橄欖油中脂肪酸特征組成及比例不飽和脂肪酸含量高于85%，其中油酸含量在76% 82%，亞油酸含量4% 8%，亞麻酸少于1% ；(2)橄欖油中存在其它油脂中沒(méi)有的特征成分角鯊烯；( 3 )橄欖油1H氫譜特征指紋峰；(4)橄欖油13C碳譜特征指紋峰；從以上4個(gè)指標(biāo)對(duì)橄欖油進(jìn)行判斷，樣品是純橄欖油，或是橄欖油中摻混其它植物油。本專(zhuān)利技術(shù)采用的磁共振鑒別法操作簡(jiǎn)單，測(cè)量精確，重復(fù)性高，對(duì)樣品的無(wú)損檢測(cè)使得同一樣品可進(jìn)行多次測(cè)量或用于其它分析測(cè)試，測(cè)量結(jié)果不受操作員的技術(shù)和判斷所影響，適合用于橄欖油真?zhèn)蔚目焖贆z測(cè)。與現(xiàn)有的檢測(cè)方法相比，本專(zhuān)利技術(shù)的特點(diǎn)是I.快速，簡(jiǎn)捷，重復(fù)性好，精確度高，樣品測(cè)試只需幾分鐘時(shí)間。2.樣品無(wú)損，無(wú)需進(jìn)行前處理。3.可以在任何高場(chǎng)核磁共振儀上完成數(shù)據(jù)采集。4.通過(guò)數(shù)據(jù)導(dǎo)入軟件自動(dòng)進(jìn)行分析給出結(jié)果。5.整個(gè)數(shù)據(jù)采集及分析穩(wěn)定性好，不因使用儀器的不同而存在大差異。6. 一次測(cè)試可以得到所需的多項(xiàng)信息。(樣品各主要脂肪酸的含量，氧化物的相對(duì)含量，游離脂肪酸等等)。7.本方法能判斷出摻假的橄欖油，對(duì)未摻假的橄欖油也可通過(guò)其酸度、氧化度及不飽和度判斷其品質(zhì)好壞。附圖說(shuō)明圖I為正常橄欖油的1H氫譜特征指紋峰。在圖I中，橫坐標(biāo)為化學(xué)位移(ppm);化學(xué)位移O. 5 5. 5ppm區(qū)間的峰為特征指紋峰。圖2為正常橄欖油的13C碳譜。在圖2中，橫坐標(biāo)為化學(xué)位移(ppm);化學(xué)位移10.O 175. Oppm區(qū)間的峰為特征指紋峰。 圖3為正常橄欖油的1H氫譜指紋峰。在圖3中，橫坐標(biāo)為化學(xué)位移(ppm);化學(xué)位移5. O 5. 2ppm區(qū)間的峰為角鯊烯特征指紋峰。圖4為正常橄欖油與其它油脂1H氫譜指紋峰對(duì)比。在圖4中，橫坐標(biāo)為化學(xué)位移(ppm)；曲線a為橄欖油，曲線b為菜籽油，曲線c為山茶油，曲線d為花生油，曲線e為大豆油。圖5為正常橄欖油與其它油脂13C碳譜指紋峰對(duì)比。在圖5中，橫坐標(biāo)為化學(xué)位移(ppm);曲線a為橄欖油，曲線b為菜籽油，曲線c為山茶油，曲線d為花生油，曲線e為大豆油。具體實(shí)施例方式本專(zhuān)利技術(shù)應(yīng)采用高場(chǎng)核磁共振波譜法采集樣品的氫譜和碳譜，然后結(jié)合譜圖指紋峰確定樣品真?zhèn)?，并能?duì)樣品中間體脂肪酸成分進(jìn)行計(jì)算，進(jìn)一步確認(rèn)橄欖油成分。具體步驟如下I.樣品來(lái)源橄欖油樣品為市售的不同品牌的橄欖油樣,計(jì)34個(gè)橄欖油和橄欖調(diào)和油。樣品的詳細(xì)信息如表I所示。表I本文檔來(lái)自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
一種橄欖油的鑒別方法，其特征在于包括以下步驟：1）將待測(cè)液體油樣品裝入核磁管中；2）在核磁管中加入氘代溶劑溶解樣品，混勻待測(cè)；3）通過(guò)高場(chǎng)核磁共振儀采集樣品的1H氫譜和13C碳譜數(shù)據(jù)；4）通過(guò)核磁譜圖化學(xué)位移信息和峰面積信息進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)算得到樣品中各種主要脂肪酸組成成份相對(duì)含量，通過(guò)多個(gè)指標(biāo)綜合判斷得到鑒定結(jié)果。

【技術(shù)特征摘要】
1.一種橄欖油的鑒別方法，其特征在于包括以下步驟 1)將待測(cè)液體油樣品裝入核磁管中； 2)在核磁管中加入氘代溶劑溶解樣品，混勻待測(cè)； 3)通過(guò)高場(chǎng)核磁共振儀采集樣品的1H氫譜和13C碳譜數(shù)據(jù)； 4)通過(guò)核磁譜圖化學(xué)位移信息和峰面積信息進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)算得到樣品中各種主要脂肪酸組成成份相對(duì)含量，通過(guò)多個(gè)指標(biāo)綜合判斷得到鑒定結(jié)果。2.如權(quán)利要求I所述的一種橄欖油的鑒別方法，其特征在于在步驟I)中，所述待測(cè)液體油樣品的量為5 500 μ L03.如權(quán)利要求I所述的一種橄欖油的鑒別方法，其特征在于在步驟I)中，所述核磁管采用5mm的核磁管。4.如權(quán)利要求I所述的一種橄欖油的鑒別方法，其特征在于在步驟2)中，所述氘代溶劑選自氘代甲醇，氘代氯仿，氘代苯中的一種。5.如權(quán)利要求I所述的一種橄欖油的鑒別方法，其特征在于在步驟2)中，所述氘代溶劑的加入量按質(zhì)量比為待測(cè)液體油樣品的I 10倍。6.如權(quán)利要求I所述的一種橄欖油的鑒別方法，其特征在于在步驟3)中，所述高場(chǎng)核磁共振儀采用300MHz及以上的高場(chǎng)核磁共振儀。7.如權(quán)利要求I所述的一種橄欖油的鑒別方法，其特征在于在步驟4)中，所述通過(guò)SMART軟件計(jì)算出各種脂肪的組成、飽和度、相對(duì)氧化度、相對(duì)酸...

【專(zhuān)利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：黃慧英，蔡劍懷，
申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人：廈門(mén)大學(xué)，
類(lèi)型：發(fā)明
國(guó)別省市：