本發明專利技術涉及一種新土地桿菌屬的細菌,具體的說是一種降解卡拉膠的新菌及其發酵的方法和應用,其命名為卡拉膠降解菌13-Q,即Pedobacter?hainanensis?sp.13-Q,該菌株已在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心保藏,保藏單位名稱:中國普通微生物菌種保藏管理中心,保藏日期:2011年12月9日,其保藏編號為CGMCC?NO.5564。本發明專利技術還對該菌發展了一套培養技術,能從該菌穩定生產具有降解卡拉膠能力的酶。
【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及一種新土地桿菌屬的細菌,特別是一種卡拉膠降解菌及其發酵方法與應用。
技術介紹
卡拉膠是從某些的紅藻中提取酸性的線性多聚糖,屬于親水性的線性硫酸化半乳糖家族。它們主要由交替的3-連接的β-D-吡喃半乳糖(G-單元)和4-連接的α-D-吡喃半乳糖(D-單元)或4-連接的3,6-內醚-a -D-吡喃半乳糖(DA_單元),形成重復的二糖單元組成。卡拉膠因具有優良的熱可逆凝膠化、抗蛋白凝結、親水無毒等性能而廣泛應用于食品工業中。卡拉膠還用于醫藥行業,如作為微生物培養基、緩釋膠囊/片劑、藥膏基、魚肝油乳化劑等。卡拉膠寡糖是卡拉膠的降解產物,分子量較小,溶解性較好,同時因糖鏈上的活性基團充分暴露出來,使其活性較卡拉膠顯著提高,拓寬了醫藥上的應用領域。研究發現卡拉膠寡糖具有特殊的醫藥療效,它對許多重要病毒病原(如皰疹病毒、粘液病毒、HPV等) 具有廣譜抑制活性,有許多證據表明卡拉膠寡糖能夠在抗HIV上提供保護。卡拉膠寡糖還對免疫系統具有持續性作用,能有效的抗胃蛋白酶活、抗潰瘍、抗凝血、抗栓物質。目前降解卡拉膠的方法有物理法、化學法、酶解法。其中酶解法以其降解過程容易控制,反應條件溫 和,對環境沒有污染等優點而倍受青睞。雖然目前已在很多種微生物中發現卡拉膠酶,但由于酶活不高,產酶量小等缺點,不能滿足對卡拉膠寡糖日益增長的需求, 因此尋找具有能分泌降解卡拉膠能力酶的菌種是十分需要的。
技術實現思路
本專利技術的目的在于提供一種能分泌卡拉膠降解酶的新菌種,并提供該新菌種的分離培養方法和降解卡拉膠生成寡糖的方法。(以下部分與權利要求一致)本專利技術所述的卡拉膠降解菌(Pedobacter hainanensis sp. ) 13-Q菌株(CGMCC NO. 5564)分離自海南省海口市黎安鎮麒麟菜晾曬處的土壤中,經一系列形態學、生理生化、 16S rRNA、脂肪酸組分分析、醌型分析表明它屬于土地桿菌屬,但又區別于土地桿菌屬中的其它種,定名為卡拉膠降解菌(Pedobacter hainanensis sp. )13_Q。該菌分類位置比較獨立,申請人已針對該菌發展了一套培養技術,能從該菌穩定生產具有降解卡拉膠能力的酶。 該菌株已在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心保藏,保藏單位名稱中國普通微生物菌種保藏管理中心,保藏日期2011年12月9日,其保藏編號為CGMCC NO. 5564。所述卡拉膠降解菌菌株的生物化學特征為菌落形態特征為在卡拉膠固體培養基上生長良好,菌落黃色,圓形,表面略凸起,光滑,反光,不透明,邊緣整齊,直徑約為1. Omm ;菌體形態特征為細胞桿狀,O. 3^0. 5 μ mX1. 3^2. O μ m,單個或成對排列,革蘭氏染色陰性,不生孢,運動;主要生理生化特征在卡拉膠液體培養基中可產生卡拉膠降解酶;好氧;可以利用L-阿拉伯糖、D-木糖、半乳糖、葡萄糖、果糖、甘露醇、鼠李糖、α -甲基-D-葡萄糖苷、N-乙酰-葡萄糖胺、熊果苷、七葉靈、柳醇、纖維二糖、麥芽糖、乳糖、海藻糖、龍膽二糖、D-松二糖、葡萄糖酸鹽。但是葡萄糖和阿拉伯糖產酸。該菌的氧化酶、過氧化氫酶、堿性磷酸酶、酯酶(C4)、類脂酯酶 (CS)反應為陽性;不呈現脲酶、色氨酸脫氨酶、鳥氨酸脫羧酶活性;該菌不能水解淀粉、明膠、酪素、菊糖等;不生成吲哚和硫化氫;硝酸鹽還原呈陰性反應;在麥康凱培養基上不能生長。脂肪酸組分特征主要脂肪酸及比例為iso-C15:0 (40. 4%), Iso-C15 : 0 2-0Η and/or C16ll ω 7c (18. 9%) and iso-C17:。3_0Η(18·4%)。醌型特征主要優勢醌為甲基萘醌Κ7 (ΜΚ-7),含量大約為92.9%。DNA G+C mol% 含量特征DNA G+C mol% 含量為 42. 7%。 遺傳學特征所述卡拉膠降解菌(Pedobacterhainanensis sp. )13_Q 菌株的 16S rRNA 全基因序列。菌株16S rRNA全基因序列(139lbp) (Genbank登錄號為JQ083404)為I gtcgaggggc agcggggact ttcgggttcg ccggcgaccg gcgcacgggt gcgtaacgcg61 tatgcaacct acctttatca gggggatagc ccggagaaat ccggattaac accgcataaa121atcacagtaccgcatggtataatgatcaaatatttataggataaagatgggcatgcgtgt181cattagctagttggagaggtaacggctcaccaaggcgacgatgactaggggatctgagag241gatgaccccccacactggtactgagacacggaccagactcctacgggaggcagcagtaag301gaatattggtcaatggagggaactctgaaccagccatgccgcgtgcaggaagactgccct361atgggttgtaaactgcttttgtatgggaataaaccctggtatgtataccaggctgaatgt421accataagaataaggatcggctaactccgtgccagcagccgcggtaatacggaggatcca481agcgttatccggatttattgggtttaaagggagcgtaggcggcctgttaagtcaggggtg541aaagacggtggctcaaccatcgcagtgcctttgatactgataggcttgaatatagttgag601gtaggcggaatgtgacaagtagcggtgaaatgcatagatatgtcacagaacaccgattgc661gaaggcagctatattgacgctgaggctcgaaagcgtggggatcaaacagg721attagataccctggtagtccacgccctaaacgatgataactcgatgttagcgatatacag781ttagcgtccaagcgaaagcgttaagttatccacctggggagtacgcccgcaagggtgaaa841ctcaaaggaattgacgggggcccgcacaagcggaggagcatgtggtttaattcgatgata901cgcgaggaaccttacccgggcttgaaagttactgcattactcagagatgagtaagacctt961cgggacaggaaactaggtgctgcatggctgtcgtcagctcgtgccgtgaggtgttgggtt1021 aagtcccgca acgagcgcaa cccctatgtt tagttgccag catttaaggt ggggactcta1081 aacagactgc ctgcgcaagc agagaggaag gatgggacga cgtcaagtca tcatggccct1141 tacgtccggg gctacacacg tgctacaatg gtcggtacag agggccgcta cccagcgatg1201 ggatgccaat ctcaaa本文檔來自技高網...
【技術保護點】
一種卡拉膠降解菌,其特征在于:命名為卡拉膠降解菌13?Q,即Pedobacter?hainanensis?sp.13?Q,該菌株已在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心保藏,保藏單位名稱:中國普通微生物菌種保藏管理中心,保藏日期:2011年12月9日,其保藏編號為CGMCC?NO.5564。
【技術特征摘要】
【專利技術屬性】
技術研發人員:杜昱光,孟彥羽,傅赟彬,趙勇,尹恒,王文霞,拓亞琴,
申請(專利權)人:中國科學院大連化學物理研究所,
類型:發明
國別省市:
還沒有人留言評論。發表了對其他瀏覽者有用的留言會獲得科技券。