一種高F值復合低聚肽的制備方法技術

本發明專利技術提供一種高F值復合低聚肽的制備方法，采用氨基酸比例平衡及脂肪酸平衡的混合油料，進行粉碎、擠壓膨化預處理后，選擇兩步酶解法，提取油脂與低聚肽混合液，借助活性炭的吸附作用，再經透析、超濾、冷凍干燥得到高F值的低聚肽。采用混合油料，有利于得到一種氨基酸比例平衡的低聚肽；酶法的應用，不僅減少了溶劑的使用，降低了環境污染及廢水處理的能耗，而且保證了所提取的混合油料低聚肽的綠色制取，按照人類所需來剪切蛋白質得到具有高營養價值的天然植物低聚肽。

【技術實現步驟摘要】
一種高F值復合低聚肽的制備方法
本專利技術屬于植物深加工
，具體涉及到一種高F值復合低聚肽的制備方法。技術背景高F值低聚肽是一種具有高支鏈氨基酸含量和低芳香族氨基酸含量組成的平均分子量在30(T1000D左右的小肽體系。大量研究證明，高F值低聚肽具有獨特的氨基酸組成和生理功能，具有輔助治療或減輕肝性腦病、改善肝臟病人的蛋白質營養狀況、抗疲勞等功效。國內外關于高F值低聚肽的研究主要集中在從單一原料中制取，比如大豆蛋白、魚蛋白、酪蛋白、玉米蛋白、葵花蛋白等，但都有或多或少的缺點，如原料蛋白變性嚴重、必須氨基酸含量不平衡、F值低等。大豆蛋白中蛋氨酸、(半)胱氨酸、蘇氨酸等含硫氨基酸含量較少，而花生、亞麻籽和油茶籽彌補了這一不足，而且在酶的作用下，蛋白質水解得到的肽分子量較小，易于低聚肽的形成。本專利技術所使用的原料天然無公害，來源于植物的種子，經去殼粉碎后，按照一定比例進行混合，調質后采用擠壓膨化預處理方式，經兩步酶法處理，不僅將蛋白質多肽鏈切割成短肽，而且短肽末端是芳香族氨基酸，經活性炭吸附可去除，同時得到了脂肪酸比例平衡的混合油，可進一步經精煉制成食用調和油。
技術實現思路
本專利技術提供一種新型的高F值低聚肽制備技術，即首先將粉碎的大豆、花生、亞麻籽、油茶籽按一定的比例混合，調質后進行擠壓膨化預處理，進一步粉碎后進行兩步酶解， 一步酶解分離原料中的油脂，二步酶解使蛋白質多肽鏈剪切成所需要的短肽，然后經活性炭吸附去除芳香族氨基酸及游離脂肪酸，進一步的超濾、冷凍干燥即可得到高F值復合低聚肽。本專利技術的步驟如下步驟一將大豆、花生、亞麻籽、油茶籽分別進行去殼粉碎，粉碎后的物料按質量比為 1:1:1:1的比例進行混合，調節物料水分含量到14%，然后進行擠壓膨化預處理得到膨化物料；步驟二 對步驟一中的膨化物料粉碎后過80目篩，粉碎過篩后的膨化物料與水混合得到混合液，所述的加水量與物料質量比為5:1，向混合液中加入Alcalase2. 4L堿性蛋白酶進行酶解得到酶解液I，所述的加酶量為底物質量濃度的1_3%，酶解pH為7. 5-9. 5，酶解溫度為40-60°C，酶解時間為l_4h，然后將酶解液I加熱IOmin進行滅酶，滅酶后離心分離得到混合油、多肽液及殘渣；步驟三將步驟二中所得的多肽液，加入木瓜蛋白酶進行酶解得到酶解液II，所述的加酶量為底物質量濃度的O. 5-2%，酶解pH為5-9，酶解溫度為40-60°C，酶解時間為O. 5_2h，然后將酶解液II加熱5min進行滅酶，滅酶后離心分離得到上清液；步驟四將步驟三中所得的上清液加入活性炭除去芳香族氨基酸和游離氨基酸后分別經透析、超濾、冷凍干燥得到復合蛋白高F值低聚肽。所述步驟一中擠壓膨化條件為套筒溫度90°C，螺桿轉速lOOrpm，?？卓讖?5mm。所述步驟四中活性炭的添加量為底物質量的5-10倍。所述步驟四中透析所用透析袋截留分子量在3500Da以下。所述步驟四中超濾膜孔徑為O. 1-5微米，截留分子量在100-1000，操作壓差在O.5_3Mpa。所述步驟四中冷凍干燥條件為真空條件下-50°c干燥12h。本專利技術的有益點是本專利技術采用一種高F值復合低聚肽的制備方法，首先將粉碎的大豆、花生、亞麻籽、油茶籽按一定的比例混合，調質后進行擠壓膨化預處理，進一步粉碎后進行兩步酶解， 一步酶解分離原料中的油脂，二步酶解使蛋白質多肽鏈剪切成所需要的短肽，然后經活性炭吸附去除芳香族氨基酸及游離脂肪酸，進一步的超濾、冷凍干燥即可得到高F值低聚肽粉。原料來源天然，處理方式溫和無毒無公害，是一種綠色環保的制備方法。本專利技術所獲得的高F值低聚肽的F值可達到60-78，游離氨基酸含量為4 6%，芳香族氨基酸含量低于1%，它可用于營養療效食品、功能保健食品和運動員食品等多類特種食品。附圖說明附圖是本專利技術方法的工藝路線圖。具體實施例方式具體實施方式一本實施方式的步驟如下步驟一將大豆、花生、亞麻籽、油茶籽分別進行去殼粉碎，粉碎后的物料按質量比為1:1:1:1的比例進行混合，調節物料水分含量到14%，然后在套筒溫度90°C，螺桿轉速 IOOrpm，?？卓讖?5mm的條件下進行擠壓膨化預處理得到膨化物料，然后將膨化物料進行粉碎后過80目；步驟二 將步驟一收集的過篩后的膨化物料放入酶解罐中，按照1:5的料液比加入蒸餾水，在40°C下，加2mol/L NaOH調節pH=7. 5，加入為底物質量濃度的2%的Alcalase2. 4L 堿性蛋白酶，恒溫反應3h，得到酶解液I，酶解液I加熱IOmin進行滅酶，離心分離得到混合油、多肽液及殘渣；步驟三將步驟二中的多肽液，調節PH值=5，溫度為40°C，按照加酶量為底物質量濃度的O. 5%的量加入木瓜蛋白酶，反應lh，得到酶解液II，將酶解液II加熱5min進行滅酶，高速離心分離出上清液；步驟四將步驟三中所得的上清液加入活性炭除去芳香族氨基酸和游離氨基酸，活性炭添加量1:5 (與底物的質量比)，經透析脫鹽、超濾純化、冷凍干燥得到高F值低聚肽粉。具體實施方法二 本實施方法與具體實施方法一不同點在于步驟二中將酶解溫度調節為50°C，pH值為8，酶添加量為2%，其它組成和步驟與具體實施方法一相同；具體實施方法三本實施方法與具體實施方法一不同點在于步驟三中，PH=6,酶解溫度為55°C，酶添加量為1%，反應時間2h。其它組成和步驟與具體實施方法一相同；具體實施方法四本實施方法與具體實施方法一不同點之一在于步驟二中將酶解溫度調節為50°C，pH值為8，酶添加量為2% ;本實施方 法與具體實施方法一不同點之二在于步驟三中酶解pH=6，溫度為55°C，酶添加量為1%，反應時間2h。其它組成和步驟與具體實施方法一相同。權利要求1.一種高F值復合低聚肽的制備方法，其特征在于，所述方法步驟如下 步驟一將大豆、花生、亞麻籽、油茶籽分別進行去殼粉碎，粉碎后的物料按質量比為1:1:1:1的比例進行混合，調節物料水分含量到14%，然后進行擠壓膨化預處理得到膨化物料； 步驟二 對步驟一中的膨化物料粉碎后過80目篩，粉碎過篩后的膨化物料與水混合得到混合液，所述的加水量與物料質量比為5:1，向混合液中加入Alcalase2. 4L堿性蛋白酶進行酶解得到酶解液I，所述的加酶量為底物質量濃度的1_3%，酶解pH為7. 5-9. 5，酶解溫度為40-60°C，酶解時間為l_4h，然后將酶解液I加熱IOmin進行滅酶，滅酶后離心分離得到混合油、多肽液及殘渣； 步驟三將步驟二中所得的多肽液，加入木瓜蛋白酶進行酶解得到酶解液II，所述的加酶量為底物質量濃度的0. 5-2%，酶解pH為5-9，酶解溫度為40-60°C，酶解時間為0. 5_2h，然后將酶解液II加熱5min進行滅酶，滅酶后離心分離得到上清液； 步驟四將步驟三中所得的上清液加入活性炭除去芳香族氨基酸和游離氨基酸后分別經透析、超濾、冷凍干燥得到復合蛋白高F值低聚肽。2.根據權利要求1所述的一種高F值復合低聚肽的制備方法，其特征在于所述步驟一中擠壓膨化條件為套筒溫度90°C，螺桿轉速IOOrpm，模孔孔徑15mm。3.根據權利要求1所述的一種高F值復合低聚肽的制備方法，其特征在于所述步驟四中活性炭的添加量為底物質量的5-10倍。4.根據權利本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種高F值復合低聚肽的制備方法，其特征在于，所述方法步驟如下：步驟一：將大豆、花生、亞麻籽、油茶籽分別進行去殼粉碎，粉碎后的物料按質量比為1:1:1:1的比例進行混合，調節物料水分含量到14%，然后進行擠壓膨化預處理得到膨化物料；步驟二：對步驟一中的膨化物料粉碎后過80目篩，粉碎過篩后的膨化物料與水混合得到混合液，所述的加水量與物料質量比為5:1，向混合液中加入Alcalase2.4L堿性蛋白酶進行酶解得到酶解液Ⅰ，所述的加酶量為底物質量濃度的1?3%，酶解pH?為7.5?9.5，酶解溫度為40?60℃，酶解時間為1?4h，然后將酶解液Ⅰ加熱10min進行滅酶，滅酶后離心分離得到混合油、多肽液及殘渣；步驟三：將步驟二中所得的多肽液，加入木瓜蛋白酶進行酶解得到酶解液Ⅱ，所述的加酶量為底物質量濃度的0.5?2%，酶解pH為5?9，酶解溫度為40?60℃，酶解時間為0.5?2h，然后將酶解液Ⅱ加熱5min進行滅酶，滅酶后離心分離得到上清液；步驟四：將步驟三中所得的上清液加入活性炭除去芳香族氨基酸和游離氨基酸后分別經透析、超濾、冷凍干燥得到復合蛋白高F值低聚肽。

【技術特征摘要】

【專利技術屬性】
技術研發人員：江連洲，李楊，齊寶坤，馮紅霞，王歡，曹亮，
申請(專利權)人：東北農業大學，
類型：發明
國別省市：