本發(fā)明專利技術(shù)提供一種經(jīng)酸水解研究藍(lán)莓果化學(xué)組分的方法，屬藍(lán)莓果化學(xué)成分研究技術(shù)，包括下述步驟：1)制備藍(lán)莓果化學(xué)組分提取液，2)提取物水解，3)水解物衍生化，4)氣質(zhì)聯(lián)用儀測試衍生化溶液，5)獲得藍(lán)莓果化合物組分信息。本發(fā)明專利技術(shù)將藍(lán)莓果提取物水解后采用氣質(zhì)聯(lián)用儀柱前衍生化法研究其組分，為全面細(xì)致地研究藍(lán)莓果化學(xué)組分提供了工藝參數(shù)，為合理利用生物量豐富的藍(lán)莓資源提供指導(dǎo)。
【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)涉及一種藍(lán)莓果化學(xué)組分研究的方法，尤其是涉及一種藍(lán)莓果化學(xué)組分提取物經(jīng)水解后采用氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用(GC-MS)柱前衍生化法研究其組分的方法。
技術(shù)介紹
藍(lán)莓是世界糧農(nóng)組織推薦的五大健康水果之一，具有很強(qiáng)的抗氧化能力；能夠預(yù)防高血壓、高血脂及肥胖，特別是對眼睛的健康有特別的好處。藍(lán)莓中含有豐富的多酚類、黃酮類以及多糖類物質(zhì)，特別是其中的花青素具有促進(jìn)視力的功效，是提供藍(lán)莓保健功效的重要因子。對藍(lán)莓果的化學(xué)組分的研究是合理利用藍(lán)莓資源的基礎(chǔ)。近年來，藍(lán)莓果實(shí)中的化學(xué)組分的結(jié)構(gòu)鑒定引起了越來越多研究者的廣泛興趣。到目前為止，研究者多數(shù)使用液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀(HPLC-MS)為研究手段，少量研究者用核磁共振儀(NMR)研究其化學(xué)組分結(jié)構(gòu)。氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀(GC-MS)是另一種廣譜的化學(xué)組分研究手段，具有線性范圍寬、靈敏度高、使用成本低、應(yīng)用廣泛的特點(diǎn)，而迄今尚未有相關(guān)手段研究藍(lán)莓化學(xué)組分的報道。為了更全面細(xì)致地研究藍(lán)莓果化學(xué)組分，需嘗試開發(fā)一種GC-MS研究其化學(xué)組分的快捷、簡便、經(jīng)濟(jì)、實(shí)用的新方法。本研究以采用高效、快捷、簡便、經(jīng)濟(jì)的手段研究藍(lán)莓果化學(xué)組分為研究目標(biāo)，將藍(lán)莓果化學(xué)組分提取物經(jīng)水解后采用GC-MS柱前衍生化法研究其組分，為全面細(xì)致地研究藍(lán)莓果化學(xué)組分提供工藝參數(shù)，為合理利用生物量豐富的藍(lán)莓資源提供指導(dǎo)。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
本專利技術(shù)旨在以我國資源十分豐富的藍(lán)莓果為原料，開發(fā)一種將藍(lán)莓果化學(xué)組分提取物經(jīng)水解后采用GC-MS柱前衍生化法研究其組分的簡便、經(jīng)濟(jì)、實(shí)用的新方法。一種將藍(lán)莓果化學(xué)組分提取物經(jīng)水解后采用GC-MS柱前衍生化法研究其組分的方法，其流程示意圖見圖1，其特征在于；I)制備藍(lán)莓果化學(xué)組分提取液將藍(lán)莓鮮果用榨汁機(jī)研磨，得到藍(lán)莓果泥，準(zhǔn)確稱量藍(lán)莓果泥5g左右，用不同體系不同配比的有機(jī)溶液作為提取液浸沒果泥，室溫浸提2小時，1500rpm離心10分鐘,取上清液，該上清液為藍(lán)莓果化學(xué)組分提取液，其中所述不同體系不同配比的有機(jī)溶液的體積為100-200mL，所述的不同體系不同配比的有機(jī)溶液有四種，第一種為含甲酸的甲醇溶液，所述的甲醇溶液中含甲酸的體積百分比為O. 1-1% ;第二種為甲醇溶液，所述的甲醇溶液的體積濃度(V/V)為30% -60% ;第三種為丙酮溶液，所述的丙酮溶液的體積濃度(V/V)為40% -70% ;第四種為乙醇溶液，所述的乙醇溶液的體積濃度(V/V)為30% -60% ;(2)提取物水解準(zhǔn)確量取上述藍(lán)莓果化學(xué)組分提取液O. 5mL,置于5mL磨口玻璃離心管中，加入O. 5mL三氟乙酸溶液，80-120°C保溫1_3小時，取出離心管，冷卻至室溫，IOOOrpm離心4分鐘，將上層清液移至IOOmL雞心瓶中，減壓蒸餾，得到透亮紫紅色的貼壁物，將此貼壁物用ImL甲醇溶解，得到水解物溶液，所述的三氟乙酸溶液的濃度為4moL/L，所述減壓蒸餾的水浴溫度45度，真空度為O. 09Mpa ；(3)水解物衍生化將ImL水解物溶液置于離心中，用氮吹儀吹干，再加入O.1-1mL BSTFA衍生化試齊U，放入烘箱中，60-100°C保溫lh，取出后冷卻至室溫，得到衍生化溶液；(4) GCMS儀測試衍生化溶液設(shè)置GCMS儀器條件，測試衍生化溶液，得到衍生化溶液總離子流圖、各峰所對應(yīng)的化合物質(zhì)譜圖等數(shù)據(jù)信息，所述的GCMS儀器條件為Rtx-5石英毛細(xì)管柱，進(jìn)樣口溫度280°C，分流比10 1，程序升溫，接口溫度250°C，進(jìn)樣量I微升，所述的程序升溫程序?yàn)橹鯗?00°C，升溫速率6°C /min,升至250°C，繼續(xù)升溫，速率15°C /min,升至280°C，保持時間 20min ；(5)獲得藍(lán)莓果化合物組分信息利用得到衍生化溶液數(shù)據(jù)信息，利用圖譜庫檢索和人工圖譜解析確定化合物結(jié)構(gòu)。附圖說明圖1.藍(lán)莓果化學(xué)組分提取物經(jīng)水解后采用GC-MS柱前衍生化法研究其組分的流程示意2. O.1 %甲酸的甲醇溶液提取物經(jīng)水解及衍生化后的GC-MS總離子流3. 30%甲醇溶液提取物經(jīng)水解衍生化后的GC-MS總離子流4.丙酮水乙酸溶液提取物經(jīng)水解衍生化后的GC-MS總離子流5. 50%乙醇溶液提取物經(jīng)水解衍生化后的GC-MS總離子流圖具體實(shí)施例方式以下，關(guān)于本專利技術(shù)的一種藍(lán)莓果化學(xué)組分研究的方法，基于實(shí)施方式進(jìn)行說明。一種將藍(lán)莓果化學(xué)組分提取物經(jīng)水解后采用GC-MS柱前衍生化法研究其組分的方法，其步驟為(I)制備藍(lán)莓果化學(xué)組分提取液將藍(lán)莓鮮果用榨汁機(jī)研磨，得到藍(lán)莓果泥；準(zhǔn)確稱量藍(lán)莓果泥5g左右，用不同體系不同配比的有機(jī)溶液作為提取液浸沒果泥，室溫浸提2小時，1500rpm離心10分鐘,取上清液，該上清液為藍(lán)莓果化學(xué)組分提取液，其中所述不同體系不同配比的有機(jī)溶液的體積為100-200mL，所述的不同體系不同配比的有機(jī)溶液有四種，第一種為含甲酸的甲醇溶液，所述的甲醇溶液中含甲酸的體積百分比為O. 1-1% ;第二種為甲醇溶液，所述的甲醇溶液的體積濃度(V/V)為30% -60% ;第三種為丙酮溶液，所述的丙酮溶液的體積濃度(V/V)為40% -70% ;第四種為乙醇溶液，所述的乙醇溶液的體積濃度(V/V)為30% -60% ;(2)提取物水解準(zhǔn)確量取上述藍(lán)莓果化學(xué)組分提取液O. 5mL，置于5mL磨口玻璃離心管中，加入O.5mL三氟乙酸溶液，80-120°C保溫1_3小時；取出離心管，冷卻至室溫，IOOOrpm離心4分鐘，將上層清液移至IOOmL雞心瓶中，減壓蒸餾，得到透亮紫紅色的貼壁物，將此貼壁物用ImL甲醇溶解，得到水解物溶液，所述的三氟乙酸溶液的濃度為4moL/L，所述減壓蒸餾的水浴溫度45°C，真空度為O. 09Mpa ；(3)水解物衍生化將ImL水解物溶液置于離心中，用氮吹儀吹干，再加入O.1-1mL BSTFA衍生化試齊U，放入烘箱中，60-100°C保溫lh，取出后冷卻至室溫，得到衍生化溶液；⑷GCMS儀測試衍生化溶液設(shè)置GCMS儀器條件，測試衍生化溶液，得到衍生化溶液總離子流圖、各峰所對應(yīng)的化合物質(zhì)譜圖等數(shù)據(jù)信息，所述的GCMS儀器條件為Rtx-5石英毛細(xì)管柱，進(jìn)樣口溫度280°C，分流比10 1，程序升溫，接口溫度250°C，進(jìn)樣量I微升，所述的程序升溫程序?yàn)橹鯗?00°C，升溫速率6°C /min,升至250°C，繼續(xù)升溫，速率15°C /min,升至280°C，保持時間 20min ；(5)獲得藍(lán)莓果化合物組分信息利用得到衍生化溶液數(shù)據(jù)信息，利用圖譜庫檢索和人工圖譜解析確定化合物結(jié)構(gòu)。這種藍(lán)莓果化學(xué)組分研究方法，能夠得到豐富的藍(lán)莓果組分結(jié)構(gòu)信息，主要包括醇類、酸類、酯類、小分子糖類、酮類、酸類等化合物。實(shí)施例1將愛國者藍(lán)莓鮮果用榨汁機(jī)研磨,準(zhǔn)確稱量果泥5g，用含甲酸O. 1%的甲醇溶液IOOmL浸沒果泥，室溫浸提2小時，1500rpm離心10分鐘，取上清液；準(zhǔn)確量取上清液O. 5mL,置于5mL磨口玻璃離心管中，加入O. 5mL濃度為4moL/L的三氟乙酸溶液，80°C保溫2小時；取出離心管，冷卻至室溫，IOOOrpm離心4分鐘，將上層清液移至IOOmL雞心瓶中，減壓蒸餾，得到透亮紫紅色的貼壁物，將此貼壁物用ImL甲醇溶解后置于離心管中，用氮吹儀吹干，力口入O. 5mL BST本文檔來自技高網(wǎng)...
【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
一種將藍(lán)莓果化學(xué)組分提取物經(jīng)水解后采用GC?MS柱前衍生化法研究其組分的方法，其特征在于：1)制備藍(lán)莓果化學(xué)組分提取液將藍(lán)莓鮮果用榨汁機(jī)研磨，得到藍(lán)莓果泥，準(zhǔn)確稱量藍(lán)莓果泥5g左右，用不同體系不同配比的有機(jī)溶液作為提取液浸沒果泥，室溫浸提2小時，1500rpm離心10分鐘，取上清液，該上清液為藍(lán)莓果化學(xué)組分提取液，其中所述不同體系不同配比的有機(jī)溶液的體積為100?200mL，所述的不同體系不同配比的有機(jī)溶液有四種，第一種為含甲酸的甲醇溶液，所述的甲醇溶液中含甲酸的體積百分比為0.1?1％；第二種為甲醇溶液，所述的甲醇溶液的體積濃度(V/V)為30％?60％；第三種為丙酮溶液，所述的丙酮溶液的體積濃度(V/V)為40％?70％；第四種為乙醇溶液，所述的乙醇溶液的體積濃度(V/V)為30％?60％；(2)提取物水解準(zhǔn)確量取上述藍(lán)莓果化學(xué)組分提取液0.5mL，置于5mL磨口玻璃離心管中，加入0.5mL三氟乙酸溶液，80?120℃保溫1?3小時，取出離心管，冷卻至室溫，1000rpm離心4分鐘，將上層清液移至100mL雞心瓶中，減壓蒸餾，得到透亮紫紅色的貼壁物，將此貼壁物用1mL甲醇溶解，得到水解物溶液，所述的三氟乙酸溶液的濃度為4moL/L，所述減壓蒸餾的水浴溫度45度，真空度為0.09Mpa；(3)水解物衍生化將1mL水解物溶液置于離心中，用氮吹儀吹干，再加入0.1?1mL?BSTFA衍生化試劑，放入烘箱中，60?100℃保溫1h，取出后冷卻至室溫，得到衍生化溶液；(4)GCMS儀測試衍生化溶液設(shè)置GCMS儀器條件，測試衍生化溶液，得到衍生化溶液總離子流圖、各峰所對應(yīng)的化合物質(zhì)譜圖等數(shù)據(jù)信息，所述的GCMS儀器條件為Rtx?5石英毛細(xì)管柱，進(jìn)樣口溫度280℃，分流比10∶1，程序升溫，接口溫度250℃，進(jìn)樣量1微升，所述的程序升溫程序?yàn)橹鯗?00℃，升溫速率6℃/min，升至250℃，繼續(xù)升溫，速率15℃/min，升至280℃，保持時間20min；(5)獲得藍(lán)莓果化合物組分信息利用得到衍生化溶液數(shù)據(jù)信息，利用圖譜庫檢索和人工圖譜解析確定化合物結(jié)構(gòu)。...
【技術(shù)特征摘要】
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：呂兆林，張柏林，侯智霞，潘月，雷美玲，任璇，郭弘璇，林西，
申請(專利權(quán))人：北京林業(yè)大學(xué)，
類型：發(fā)明
國別省市：
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