本發明專利技術涉及一種天然橡膠再生劑的制備方法，本發明專利技術所述的氧化亞鐵硫桿菌的制備方法，其特征在于包括：取5g火山沉積物樣品溶于50mL無菌水，30℃，170r／min振蕩培養6h，然后靜置2h；吸取10mL上層水樣加入盛有100mL已滅菌的9K培養基中，30℃，170r／min搖床培養，直至培養基由淺綠色變成紅棕色，再進行5次富集培養，再用固體培養基涂布平板法分離、純化菌種。本發明專利技術制得的氧化亞鐵硫桿菌對天然橡膠具有一定的脫硫再生效果，經過氧化亞鐵硫桿菌作用后，天然橡膠的硫含量降低，硫被氧化生成S-O基團，表明氧化亞鐵硫桿菌對天然硫化膠粉的硫交聯鍵有轉化或斷裂作用。
【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及一種天然橡膠再生劑的制備方法。
技術介紹
1947年，Colmer和Hinkle從礦山酸性廢水中首次分離出氧化亞鐵硫桿菌(Thiobacillus ferrooxiidans, T.f)。T.f 為短桿菌，0.5 X1.0 μ m,具有圓純的末端，單生或對生，成短鏈者較少，嚴格好氧，利用氨作為氮源，利用硝酸鹽緩慢。該菌種廣泛存在于土壤、海水、淡水、垃圾、硫磺泉和沉積硫內，尤以金屬硫化礦和煤礦等酸性礦坑水(pH〈4)中最為常見。T.f化能自養，靠氧化Fe2+為Fe3+及將低價態硫氧化為硫酸鹽獲得能量進行生命活動，又因其較強的氧化Fe2+和氧化s的能力，廣泛應用于煙氣脫硫、煤炭脫硫、生物浸礦和生物淋濾等研究中。早在1945年,Thaysen等就認為可利用有氧化能力的微生物對廢橡膠進行脫硫；L0effler Μ.等利用氧化亞鐵硫桿菌對廢橡膠進行再生，認為氧化亞鐵硫桿菌對廢橡膠脫硫再生有一定的效果；Christiansson Μ.等利用氧化亞鐵硫桿菌處理廢輪胎膠(ground tire rubber, GTR),作用 10 d,脫硫率為 5.3%,而作用 20 d,脫硫率達 7.8% ；Romine等利用氧化亞鐵硫桿菌對GTR進行脫硫，作用10 d后，培養基中的硫酸根含量顯著提高。利用微生物脫硫對廢橡膠進行再生有明顯的優勢，它不需要高溫、高壓和催化劑，在常溫常壓脫硫，脫硫費用低，設備要求簡單。但這種再生技術還處在實驗室研究階段，存在微生物脫硫活性不高，脫硫率低，作用時間長，機理不明確等問題，商業化的道路還很長。目前國內沒有這方面的研究。 專利技術內容本專利技術旨在提供一種脫硫再生廢橡膠的。本專利技術所述的，其特征在于包括: 取5 g火山沉積物樣品溶于50 mL無菌水，30°C，170 r / min振蕩培養6 h，然后靜置2 h;吸取10 mL上層水樣加入盛有100 mL已滅菌的9K培養基中，30 °C, 170 r / min搖床培養，直至培養基由淺綠色變成紅棕色，再進行5次富集培養，再用固體培養基涂布平板法分離、純化菌種。優選地，9K培養基是用如下方法制得的:A 組分:(NH4)2SO4 3.0 g, KCl 0.1 g, K2HPO4 0.5 g, MgSO4.H2O 0.5 g, Ca (NO3) 2 0.01g，蒸懼水700 mL ；B 組分:FeS04.7H20 44.2 g，蒸餾水 300 mL, 10 mo I / L H2SO4 I mL ； 培養基中A組分于121 °C, 0.1 MPa下濕熱滅菌20分鐘，B組分加入I mL 10 mo I /L H2SO4在105°C下滅菌，將A組分和B組分混合，調pH2.5。更優選地，所述的固體培養基是向9K培養基中加入1.2%的瓊脂及0.03%酵母浸粉。本專利技術制得的氧化亞鐵硫桿菌對天然橡膠具有一定的脫硫再生效果，經過氧化亞鐵硫桿菌作用后，天然橡膠的硫含量降低，硫被氧化生成S-O基團，表明氧化亞鐵硫桿菌對天然硫化膠粉的硫交聯鍵有轉化或斷裂作用。具體實施例方式實施例一。1、制備9K培養基:A 組分:(NH4)2SO4 3.0 g, KCl 0.1 g, K2HPO4 0.5 g, MgSO4.H2O 0.5 g, Ca (NO3) 2 0.01g，蒸懼水700 mL ；B 組分:FeS04.7H20 44.2 g，蒸餾水 300 mL, 10 mo I / L H2SO4 I mL ； 培養基中A組分于121 °C, 0.1 MPa下濕熱滅菌20分鐘，B組分加入I mL 10 mo I /L H2SO4在105°C下滅菌，將A組分和B組分混合，調pH2.5，待用。2、制備固體培養基 向9K培養基中加入1.2%的瓊脂及0.03%酵母浸粉，待用。3、制備氧化亞鐵硫桿菌 取5 g火山沉積物樣品溶于50 mL無菌水，30°C，170 r / min振蕩培養6 h，然后靜置2 h;吸取10 mL上層水樣加入盛有100 mL已滅菌的9K培養基中，30 °C, 170 r / min搖床培養，直至培養基由淺綠色變成紅棕色，再進行5次富集培養，再用固體培養基涂布平板法分離、純化菌種。平板上的菌落為白色小圓點，略黃，直徑約I mm，凸起，邊緣整齊，較干。經透射電鏡觀察，該菌為圓頭短桿狀，大小為0.5 / μπιΧΙ.Ομπι，能運動，革蘭氏染色陰性。經16SrDNA序列分析，16S rDNA的測序結果在NCBI中blast分析，與氧化亞鐵硫桿菌菌株afl、DXH, TSK-U H-4的同源性達100%，證實為氧化亞鐵硫桿菌。 實施例二。取生長24 h菌液(10 7個/ mL)作為種子液，按10%接種量接入100 mL脫硫再生培養基后于30°C，170 r / min下培養，24 h后加入2.5 g天然橡膠粉，5份、2份硫天然膠片(natural rubber, NR)各一片(0.5 cmX0.5 cm),繼續培養10 d后測定橡膠的基團變化、硫含量變化及橡膠表面形態。其中不論是5份硫還是2份硫，NR膠片在I 010-1 070 cnT1處出現吸收峰。I010-1 070 cnT1處是S = O的吸收峰，說明T.f I能對橡膠中的烴類產生代謝裂變作用，使橡膠中交聯的硫被氧化，產生了亞砜，硫交聯鍵被打斷。NR經T.f I脫硫再生后能量色散X射線光譜(EDS)分析表明，s元素的含量顯著降低，脫硫率達52.6%。未處理NR表面比較平整， 處理后的NR膠片的表面結構由原來的致密狀變為疏松狀，產生許多空洞。說明T.f的作用使橡膠的交聯鍵斷裂以致橡膠表面出現空洞。本文檔來自技高網...
【技術保護點】
氧化亞鐵硫桿菌的制備方法，其特征在于包括：取5?g火山沉積物樣品溶于50?mL無菌水，30℃，170?r／min振蕩培養6?h，然后靜置2?h；吸取10?mL上層水樣加入盛有100?mL已滅菌的9K培養基中，30?℃，170?r／min搖床培養，直至培養基由淺綠色變成紅棕色，再進行5次富集培養，再用固體培養基涂布平板法分離、純化菌種。
【技術特征摘要】
1.氧化亞鐵硫桿菌的制備方法，其特征在于包括: 取5 g火山沉積物樣品溶于50 mL無菌水，30°C，170 r / min振蕩培養6 h，然后靜置2 h;吸取10 mL上層水樣加入盛有100 mL已滅菌的9K培養基中，30 °C, 170 r / min搖床培養，直至培養基由淺綠色變成紅棕色，再進行5次富集培養，再用固體培養基涂布平板法分離、純化菌種。2.如權利要求1所述的氧化亞鐵硫桿菌的制備方法，其特征在于9K培養基是用如下方法制得的:A 組分:(NH4)2SO4 3.0 g, KCl 0.1 g, K2HPO4 0....
【專利技術屬性】
技術研發人員：周莉英，
申請(專利權)人：陜西宣和通科技發展有限責任公司，
類型：發明
國別省市：
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