一種高效表達工程菌重組蛋白的方法及應(yīng)用技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)“一種高效表達工程菌重組蛋白的方法及應(yīng)用”，屬于生物制藥工程。該方法包括如下步驟：(1)重組突變質(zhì)粒轉(zhuǎn)染大腸桿菌pET系統(tǒng)工程菌中得到陽性單克隆菌落，(2)對陽性單克隆菌落進行增菌得到種子菌液，誘導(dǎo)所述種子菌液大量增菌生長，(3)分離含有表達的目的重組蛋白的菌體上清液，提純菌體上清液中的重組蛋白，其特征在于：所述大腸桿菌pET系統(tǒng)工程菌指E.coli?B834(DE3)。本發(fā)明專利技術(shù)還進一步對大量增菌培養(yǎng)基的成分及蛋白質(zhì)純化步驟進行了優(yōu)化，在蛋白質(zhì)產(chǎn)量和純度上都得到了明顯的提高。使本發(fā)明專利技術(shù)的方法適合于應(yīng)用在大腸桿菌工程菌表達重組蛋白的規(guī)模化生產(chǎn)中。

【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】

【技術(shù)保護點】
一種高效表達工程菌重組蛋白的方法，包括如下步驟：(1)重組突變質(zhì)粒轉(zhuǎn)染大腸桿菌pET系統(tǒng)工程菌中得到陽性單克隆菌落，(2)對陽性單克隆菌落進行增菌得到種子菌液，誘導(dǎo)所述種子菌液大量增菌生長，(3)分離含有表達的目的重組蛋白的菌體上清液，提純菌體上清液中的重組蛋白，其特征在于：所述大腸桿菌pET系統(tǒng)工程菌指E.coli?B834(DE3)。

【技術(shù)特征摘要】

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：丘小慶，
申請(專利權(quán))人：畿晉慶三聯(lián)北京生物技術(shù)有限公司，
類型：發(fā)明
國別省市：