用于B細胞淋巴瘤的聯合療法制造技術

本披露提供了用于使用抗CD19和抗CD20抗體的組合來治療B細胞淋巴瘤的方法。這類方法相比單一抗體療法提供了治療優點，包括延長的抗腫瘤活性和/或減少的劑量。

【技術實現步驟摘要】
【國外來華專利技術】用于B細胞淋巴瘤的聯合療法背景大多數人白血病和淋巴瘤，包括急性淋巴母細胞性白血病(ALL)、慢性淋巴細胞性白血病(CLL)以及非霍奇金淋巴瘤(NHL)，起源于B細胞。近年來，基于通過使用單克隆抗體(mAb)靶向B細胞限制性表面抗原的B細胞耗盡的治療方法已經獲得了越來越多的關注。具體而言，抗CD20 mAb利妥昔單抗已經在B細胞惡性腫瘤的治療中顯示出有希望的結果。(羅巴克(Robak)等人，癌癥治療評論(Cancer Treatment Reviews), 2007 ；33:710-728.)利妥昔單抗的活性大部分取決于該mAb通過參與活化效應細胞(如巨噬細胞和NK細胞)表面上的Fe Y受體而介導抗體依賴性的細胞毒性(ADCC)的能力。(戴斯杰拉斯(Desjarlais)等人，今日藥物發現(Drug Discovery Today), 2007 ；12:898-910.)雖然其他機制，如補體依賴性細胞毒性(CDC)和細胞凋亡的直接誘導也可以產生作用，但ADCC似乎是利妥昔單抗借以在體內介導惡性的以及正常的B細胞的消除的主導機制。(愛德華茲(Edwards)等人，免疫學自然評論(Nat Rev Immunol), 2006 ；6:394-403.)利妥昔單抗與化學療法的組合已經在患有濾泡淋巴瘤(FL)和CLL的患者中引起顯著的改進，并且可以導致持久的緩解。然而，此療法不是對所有的患者群體都有效。因此，仍然急需新穎且改進的治療選項。人分化(⑶)群抗原19是由早期前B細胞從重鏈重排時所表達的一種B細胞特異性表面抗原。CD19屬于跨膜受體的含免疫球蛋白結構域的超家族。當CD19表達被下調時，⑶19在B細胞上從祖B細胞至漿細胞階段的其整個譜系中受到表達。(納德勒(Nadler)等人，免疫學雜志(J Immunol.) 1983 ; 131:244-250.)作為一種B細胞特異性蛋白、和B細胞-受體(BCR)復合物的組分，CD19是調控B細胞活化和體液免疫的閾值的B細胞信號傳導的一種正調控因子。(佐藤(Sato)等人，國家科學院院刊(Proc Natl Acad Sci), 1995 ；92 =11558-62 ;佐藤等人，免疫學雜志1997 ；158:4662-9.) CD19不在造血干細胞上或在祖B細胞階段之前的B細胞上表達。(納德勒(Nadler)等人，免疫學雜志(J Immunol.) 1983 ；131:244-250 ;洛肯(Lok en)等人，血液(Blood)，1987 ；70:1316-1324.)。重要的是，⑶19的表達在B細胞的惡性轉化之后得以維持，并且⑶19在大多數B細胞惡性腫瘤(包括ALL、CLL以及NHL)上表達。(Uckun等人，血液，1988 ;71:13-29 ;D’Arena 等人，美國血液學雜志(Am J of Hematology), 2000 ;64:275-281 ;吉乃爾迪(Ginaldi)等人，臨床病理學雜志(J Clin Pathol)，1998 ；51:364-369 ;安德森(Anderson)等人，血液，1984 ；63:1424-1433.)⑶19在B細胞惡性腫瘤上的廣泛且相對穩定的表達使得此抗原成為基于mAb的療法的有吸引力的靶標。因此需要利用抗⑶19和抗⑶20抗體的優點的聯合療法來治療B細胞惡性腫瘤。專利技術概述在此提供用于治療B細胞淋巴瘤的方法，這些方法包括對有需要的患者給予一種聯合療法，該聯合療法包括抗CD19抗體和抗CD20抗體。這類聯合療法相比以相當的給藥時程表單獨給予的所述抗CD19抗體或所述抗CD20抗體而言，賦予持續更長的持續時間的抗腫瘤活性。還提供了用于利用減少劑量的抗⑶19和/或抗⑶20抗體來治療B細胞淋巴瘤的方法。具體而言，這類方法包括對有需要的患者給予一種聯合療法，該聯合療法包括抗CD19抗體和抗CD20抗體，其中所述聯合療法的劑量相比劑量是該聯合療法的劑量至少兩倍高的所述抗CD19抗體的劑量而言，具有更大的抗腫瘤活性。附圖簡要說明附圖說明圖1顯示了未巖藻糖基化的抗CD19 mAb 16C4 (16C4_afuc)和抗CD20 mAb(利妥昔單抗)針對多種B細胞白血病和淋巴瘤細胞系的ADCC活性。顯示了使用四種細胞系的體外ADCC測定的結果，這些結果是通過一組15種白血病和淋巴瘤細胞系所觀察到的活性概況的代表。包括巖藻糖基化的⑶19 mAb 16C4以用于對比。當針對Karpas-1106P細胞進行測試時，16C4_afuc和利妥昔單抗的ADCC活性是相當的(圖1A);使用細胞系Farage、Raji以及MeC2獲得類似的結果。JVM2(圖1B)是在體外針對其利妥昔單抗比16C4_afuc更有效的細胞系的代表；使用細胞系Granta-519、DB、以及JVM-13獲得類似的結果。0ci_LY19 (圖1C)和Daudi (圖1D)是針對其16C4-afuc比利妥昔單抗更具效力的細胞系的代表；使用Toledo、Karpas-422、Nalm-6、RL、以及Namalwa細胞獲得類似的結果。在測試的所有細胞系的情況下，16C4-afuc比16C4的巖藻糖基化版本更具效力。顯示的結果是三份重復樣品的平均值+/_標準差。圖1F-H顯示了⑶19和⑶20的相對表達(表示為MFI，參見實例2中的表I)，該相對表達 是針對觀察到的％最大細胞殺傷(CD19，圖1F ；CD20,圖1G)并且針對對于16C4-afuc和利妥昔單抗而測定的EC50值(⑶19，圖1H KD20，圖1I)而繪制的。排除其EC50不能被測定的細胞系/mAb組合(也參見實例2中的表I)。遍及細胞系的這個多樣性的組，不能測定到EC50或最大細胞殺傷與抗原表達的顯著相關性。圖2圖解了患者衍生的慢性淋巴細胞性白血病(CLL)細胞在體外對16C4_afuc介導的ADCC敏感的情況。在圖2A中，患者CLL細胞顯示了⑶19和⑶20的可變的細胞表面表達。CLL細胞上的CD19和CD20抗原位點的數目如下文在材料和方法中所描述的來測定。在圖2B-C中，顯示了使用基于FACS的測定、用患者衍生的CLL細胞進行的16C4_afuc和利妥昔單抗的體外ADCC測定結果。使用KC1333NK細胞作為效應細胞，E: T比例是2.5: I。顯示了總共測試的六種樣品中的三個代表性患者樣品的結果。在測試的所有樣品的情況下，在耗盡來自患者PBMC樣品的CLL B細胞方面，16C4-afuc比利妥昔單抗更有效。所有的ADCC測定重復進行三次，并且呈現平均值(+/_標準差)。顯示了抗原表達與16C4-afuc (圖2E)和利妥昔單抗(圖2F)對于測試的所有六種CLL患者樣品的體外ADCC活性的關系。CD19和CD20的抗原位點的數目相比分別使用16C4和利妥昔單抗獲得的最大細胞殺傷百分比進行繪制。圖3顯示，患者衍生的急性淋巴母細胞性白血病(ALL)細胞對16C4_afuc介導的ADCC敏感。圖3A圖解了患者ALL細胞上的⑶19和⑶20的表達。對于三種單獨的ALL樣品，測定CD19和CD20的抗原位點的數目。為了對比，顯示來自四位單獨供體的正常人外周血B細胞上的抗原位點的數目。如在圖3B、3C、3D、以及3E本文檔來自技高網...

【技術保護點】

【技術特征摘要】
【國外來華專利技術】...

【專利技術屬性】
技術研發人員：R·赫伯斯特，E·K·沃德，K·P·麥基弗，
申請(專利權)人：米迪繆尼有限公司，
類型：
國別省市：