一種阿力甜標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)制備方法技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)公開(kāi)了一種阿力甜標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)制備方法，包括以下各步驟：(1)供試品溶液的制備；(2)液相色譜制備；(3)收集。本發(fā)明專利技術(shù)采用半制備型液相色譜系統(tǒng)，制備分離出的阿力甜標(biāo)準(zhǔn)樣品，純度高，工藝簡(jiǎn)單，制備速度快，產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定，均勻性好，能夠獲得高純度(99％以上)，所涉及的溶劑無(wú)污染，可實(shí)現(xiàn)清潔生產(chǎn)。

【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】

本專利技術(shù)涉及阿力甜標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)制備方法，屬于化合物提取純化領(lǐng)域。
技術(shù)介紹
甜味劑是食品工業(yè)的重要原料,也是制藥工業(yè)的輔料。蔗糖、葡萄糖是常用的天然甜味劑。然而,由于糖分所蘊(yùn)含的熱量較高,易使食者發(fā)胖,容易誘發(fā)許多疾病,如心血管病和糖尿??；也易發(fā)酵產(chǎn)酸,損壞牙齒,故不論是兒童、成年人或老年人均不宜多吃。為此,各種合成甜味劑便得以開(kāi)發(fā),主要針對(duì)低熱量、高甜度、對(duì)人體安全、穩(wěn)定性好、便于食品加工等特點(diǎn),更已成為人們生活中不可缺少的食品添加劑。阿力甜是一種二肽類甜味劑，甜度為蔗糖的2000倍以上，在酸、熱等條件下均十分穩(wěn)定，甜味清爽、耐熱耐酸耐堿(在酸、熱等條件下均十分穩(wěn)定)，具有優(yōu)越的貯存和加工穩(wěn)定性，可廣泛用于食品工業(yè)。目前國(guó)內(nèi)尚沒(méi)有該化合物的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，為了滿足相關(guān)產(chǎn)品的分析檢測(cè)、質(zhì)量控制工作的需求，保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性、可比性和溯源性，急需制備阿力甜標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。阿力甜(Alitame)是一種以L-天冬氨酸與D-丙氨酸化合物組成的二肽酰胺。其化學(xué)名稱為L(zhǎng)-α-天冬氨酸-N-(2,2,4,4-四甲基-3硫化三亞甲基)-D-丙氨酰胺，屬新一代高強(qiáng)度低熱量甜味劑。它具有蔗糖的甜味和風(fēng)味,還具有甜度高、穩(wěn)定性好、熱量低、溶解度高、物理性能好和安全性高的特點(diǎn)。從物理方面來(lái)看,它是一種白色、無(wú)臭的結(jié)晶性粉末,帶有強(qiáng)力甜味。其熔融點(diǎn)為100℃(慢速加熱),再凝固點(diǎn)為102℃,熔融分解溫度則是136-137℃；而且溶解性高,易溶于水(l3％w/v)、乙醇(61％w/v)、5％水溶液,其PH值約為5.6。截至目前，國(guó)內(nèi)尚未有研究機(jī)構(gòu)能夠提供阿力甜標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)及其制備方法，而進(jìn)口國(guó)外生產(chǎn)的阿力甜標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)存在費(fèi)用高昂、手續(xù)繁瑣、到貨周期長(zhǎng)等問(wèn)題，因此為阿力甜含量測(cè)定制備相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)尤為必要。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
本專利技術(shù)要解決的技術(shù)問(wèn)題是克服現(xiàn)有的缺陷，提供了一種阿力甜標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)制備方法，制備工藝簡(jiǎn)單、制備速度快、能夠獲得高純度。為了解決上述技術(shù)問(wèn)題，本專利技術(shù)提供了如下的技術(shù)方案：一種阿力甜標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)制備方法，其特征在于：包括以下各步驟：(1)供試品溶液的制備：將阿力甜原料溶于水并采用超聲溶解，然后經(jīng)0.22μm或0.45μm濾膜過(guò)濾，得供試品溶液；(2)液相色譜制備：將供試品溶液注入制備色譜分離純餾分，其中色譜條件：色譜柱為PREP-ODS(H)·KIT(250mm×20mm,5μm)，或WatersXTerraRP18(250mm×20mm,5μm)；流動(dòng)相：40％(v/v)甲醇水溶液；流速：5～15mL/min；柱溫：30℃；運(yùn)行時(shí)間：15min；檢測(cè)波長(zhǎng)：210nm，進(jìn)樣量0.1～1mL，收集4.5～9min的餾分；(3)收集：餾分接收于預(yù)先氮?dú)馓畛涞耐獗诎a箔紙的棕色瓶中，然后加入少量鹽酸中和至pH7，干燥后得阿力甜標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。優(yōu)選地，步驟(1)中所述阿力甜原料為工業(yè)級(jí)阿力甜染料。更優(yōu)選地，步驟(2)中流速：10mL/min，進(jìn)樣量0.1-1mL，收集7.5～9min的餾分。更優(yōu)選地，步驟(3)中的干燥為采用減壓蒸餾的方法吹去全部液態(tài)水，然后置于凍干機(jī)-60～-40℃中凍干20～30小時(shí)，凍干后的阿力甜固體碾磨粉碎后，再次凍干20～30小時(shí)，得阿力甜標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。更優(yōu)選地，步驟(3)中的干燥為采用減壓蒸餾的方法吹去全部液態(tài)水，然后置于凍干機(jī)-50℃中凍干24小時(shí)，凍干后的阿力甜固體碾磨粉碎后，再次凍干24小時(shí)，得阿力甜標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。更優(yōu)選地，阿力甜固體采用棕色樣品瓶進(jìn)行分裝，用帶有聚四氟乙烯內(nèi)襯的黑色瓶蓋加封，并采用塑料袋獨(dú)立真空塑封，放在-18℃冰箱中保存。有效期為1年。阿力甜標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)可用于食品中非法色素添加的定性定量檢測(cè)。本專利技術(shù)的有益效果：本專利技術(shù)旨在提供一種經(jīng)濟(jì)、快速、有效的阿力甜標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)制備方法，能夠彌補(bǔ)我國(guó)在阿力甜標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研制方面的技術(shù)空白；同時(shí)本專利技術(shù)將解決進(jìn)行食品中阿力甜定量檢測(cè)研究時(shí)缺少標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的難題。本專利技術(shù)采用半制備型液相色譜系統(tǒng)，制備分離出的阿力甜標(biāo)準(zhǔn)樣品，純度高，工藝簡(jiǎn)單，制備速度快，產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定，均勻性好，能夠獲得高純度(99％以上)，明顯優(yōu)于現(xiàn)有技術(shù)中采用重結(jié)晶獲得產(chǎn)物的純度為95％，所涉及的溶劑無(wú)污染，可實(shí)現(xiàn)清潔生產(chǎn)。附圖說(shuō)明圖1為阿力甜的紅外光譜圖；圖2為阿力甜正離子模式下質(zhì)譜圖；圖3為阿力甜負(fù)離子模式下質(zhì)譜圖；圖4為阿力甜紫外光譜圖；圖5為阿力甜的1H-NMR圖譜；圖6為阿力甜的13C-NMR圖譜。具體實(shí)施方式以下對(duì)本專利技術(shù)的優(yōu)選實(shí)施例進(jìn)行說(shuō)明，應(yīng)當(dāng)理解，此處所描述的優(yōu)選實(shí)施例僅用于說(shuō)明和解釋本專利技術(shù)，并不用于限定本專利技術(shù)。實(shí)施例1一種阿力甜標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)制備方法，包括以下各步驟：(1)阿力甜溶液的制備：制備阿力甜標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的原料為工業(yè)級(jí)阿力甜，將阿力甜原料溶于水并采用超聲溶解，然后經(jīng)0.22μm濾膜過(guò)濾，得阿力甜溶液；(2)液相色譜制備：將阿力甜溶液注入制備色譜分離純餾分，其色譜條件為色譜柱為PREP-ODS(H)·KIT(250mm×20mm,5μm)；流動(dòng)相：40％(v/v)甲醇水溶液；流速：10mL/min；柱溫：30℃；運(yùn)行時(shí)間：15min；檢測(cè)波長(zhǎng)：210nm，進(jìn)樣量0.2mL，收集7.5-9min之內(nèi)的餾分；(3)餾分收集：餾分接收于預(yù)先氮?dú)馓畛涞耐獗诎a箔紙的棕色瓶中,然后加入少量鹽酸中和至pH7；(4)干燥：餾分置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀采用減壓蒸餾的方法于55℃-75℃下，然后置于凍干機(jī)-50℃中凍干24小時(shí)，凍干后的阿力甜固體碾磨粉碎后，再次凍干24小時(shí)已盡量去除游離水，得阿力甜標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)；經(jīng)測(cè)定，該標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)純度為99.4％。(5)保存：在相對(duì)獨(dú)立和潔凈手套箱內(nèi)對(duì)制備的純阿力甜固體采用2mL棕色樣品瓶進(jìn)行分裝，用帶有聚四氟乙烯內(nèi)襯的黑色瓶蓋加封，并采用塑料袋獨(dú)立真空塑封。本實(shí)施例制備的阿力甜紅外光譜見(jiàn)圖1，正離子模式下質(zhì)譜見(jiàn)圖2，負(fù)離子模式下質(zhì)譜見(jiàn)圖3，紫外光譜見(jiàn)圖4，1H-NMR圖譜見(jiàn)圖5，13C-NMR圖譜見(jiàn)圖6.實(shí)施例2一種阿力甜標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)制備方法，包括以下各步驟：(1)供試品溶液的制備：制備阿力甜標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的原料為工業(yè)級(jí)阿力甜，將阿力甜原料溶于水并采用超聲溶解，然后經(jīng)0.22μm濾膜過(guò)濾，得供試品溶液；(2)液相色譜制備：將阿力甜初提液注入制備色譜分離純餾分，其色譜條件為色譜柱為WatersXTerraRP18(250mm×20mm,5μm)；流動(dòng)相：40％(v/v)甲醇水溶液；流速：10mL/min；柱溫：30℃；運(yùn)行時(shí)間：15m本文檔來(lái)自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
一種阿力甜標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)制備方法，其特征在于：包括以下各步驟：(1)供試品溶液的制備：將阿力甜原料溶于水并采用超聲溶解，然后經(jīng)0.22μm或0.45μm濾膜過(guò)濾，得供試品溶液；(2)液相色譜制備：將供試品溶液注入制備色譜分離純餾分，其中色譜條件：色譜柱為PREP?ODS(H)·KIT(250mm×20mm,5μm)，或WatersXTerraRP18(250mm×20mm,5μm)；流動(dòng)相：40％(v/v)甲醇水溶液；流速：5～15mL/min；柱溫：30℃；運(yùn)行時(shí)間：15min；檢測(cè)波長(zhǎng)：210nm，進(jìn)樣量0.1～1mL?mL，收集4.5～16.5min的餾分；(3)收集：餾分接收于預(yù)先氮?dú)馓畛涞耐獗诎a箔紙的棕色瓶中，然后加入少量鹽酸中和至pH7，干燥后得阿力甜標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。

【技術(shù)特征摘要】
1.一種阿力甜標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)制備方法，其特征在于：包括以下各步驟：
(1)供試品溶液的制備：將阿力甜原料溶于水并采用超聲溶解，然后經(jīng)0.22μm或
0.45μm濾膜過(guò)濾，得供試品溶液；
(2)液相色譜制備：將供試品溶液注入制備色譜分離純餾分，其中色譜條件：色譜
柱為PREP-ODS(H)·KIT(250mm×20mm,5μm)，或WatersXTerraRP18(250mm×20mm,
5μm)；流動(dòng)相：40％(v/v)甲醇水溶液；流速：5～15mL/min；柱溫：30℃；運(yùn)行時(shí)間：
15min；檢測(cè)波長(zhǎng)：210nm，進(jìn)樣量0.1～1mLmL，收集4.5～16.5min的餾分；
(3)收集：餾分接收于預(yù)先氮?dú)馓畛涞耐獗诎a箔紙的棕色瓶中，然后加入少量
鹽酸中和至pH7，干燥后得阿力甜標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于：步驟(1)中所述阿力甜原料為工
業(yè)級(jí)阿力甜染料。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方...

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：席興軍，劉文，唐飛，初僑，蘭韜，董跟來(lái)，楊麗，燕艷華，
申請(qǐng)(專利權(quán))人：中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)化研究院，
類型：發(fā)明
國(guó)別省市：北京;11