一種皺木耳菌種的分離培養(yǎng)方法技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)公開了一種皺木耳菌種的分離培養(yǎng)方法，包括以下步驟：S1.干燥：采收新鮮皺木耳，清除耳片表面雜質(zhì)后置于通風(fēng)干燥處；S2.消毒：將干燥后的耳片放入酒精中浸泡；S3.接種培養(yǎng)：將消毒后的耳片剪碎放入培養(yǎng)基中培養(yǎng)，耳片上生長出菌絲體；S4.純化：用手術(shù)刀切取菌絲體最前端菌種，放入另一培養(yǎng)基中培養(yǎng)，選取菌絲體為白色、濃密、生長整齊、無雜菌的菌種，即為分離純化的皺木耳菌種。本發(fā)明專利技術(shù)選取皺木耳的耳片進(jìn)行干燥、消毒、接種培養(yǎng)和純化，采用本發(fā)明專利技術(shù)方法獲得的皺木耳菌種成活率高，可達(dá)92%以上，與新鮮耳片分離方法相比，本發(fā)明專利技術(shù)方法雜菌感染率低、耳片成活率高、操作簡單、成本低、適用于高成活率的皺木耳菌種分離培養(yǎng)。

【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】

本專利技術(shù)屬于微生物
，具體涉及一種皺木耳菌種的分離培養(yǎng)方法。
技術(shù)介紹
皺木耳(Auricularia delicata)別名脆木耳、多皺木耳、砂耳等，分類上屬于擔(dān)子菌門、傘菌綱、木耳目，木耳科、木耳屬。生長在闊葉樹的腐木上，具有提高機(jī)體免疫功能的作用，也具有補(bǔ)氣養(yǎng)血、潤肺止咳、止血、降壓的作用，還對冠心病和動脈粥樣硬化有良好的防治作用。因此，具有廣闊的市場利用價值。在皺木耳栽培技術(shù)中，優(yōu)良菌種的獲得是關(guān)鍵技術(shù)環(huán)節(jié)。皺木耳菌株的獲得通常是利用子實(shí)體或孢子進(jìn)行分離、純化，直接應(yīng)用于皺木耳的栽培或菌絲體生產(chǎn)。現(xiàn)有技術(shù)的不足在于其生物學(xué)特性目前仍處于試驗研究階段，生物轉(zhuǎn)化率較低，而且還要用熟料栽培，生產(chǎn)工藝及技術(shù)要素要求較高，因此制約了皺木耳商品經(jīng)濟(jì)的發(fā)展。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
本專利技術(shù)的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的缺點(diǎn)，提供一種方法簡單、成活率高、雜菌感染率低的皺木耳菌種的分離培養(yǎng)方法。本專利技術(shù)的目的通過以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)：一種皺木耳菌種的分離培養(yǎng)方法，它包括以下步驟：S1.干燥：采收新鮮皺木耳，清除耳片表面雜質(zhì)后置于通風(fēng)干燥處，干燥至耳片含水量為10～15％；S2.消毒：將干燥后的耳片放入質(zhì)量百分比濃度為70～75％酒精中浸泡10～15分鐘；S3.接種培養(yǎng)：將消毒后的耳片剪碎放入培養(yǎng)基中培養(yǎng)，耳片上生長出菌絲體；S4.純化：用手術(shù)刀切取菌絲體最前端菌種，放入另一培養(yǎng)基中培養(yǎng)，選取菌絲體為白色、濃密、生長整齊、無雜菌的菌種，即為分離純化的皺木耳菌種。進(jìn)一步地，所述培養(yǎng)基每1000ml含有下述重量的原料：酵母粉：5～6g、葡萄糖：18～20g、瓊脂：20～22g。進(jìn)一步地，步驟S3中是將消毒后的耳片剪碎成大小為0.2～0.5cm×0.2～0.5cm的碎耳片。進(jìn)一步地，所述培養(yǎng)的條件為：培養(yǎng)溫度20～25℃，培養(yǎng)時間10～15天。本專利技術(shù)具有以下優(yōu)點(diǎn)：本專利技術(shù)選取皺木耳的耳片進(jìn)行干燥、消毒、接種培養(yǎng)和純化，采用本專利技術(shù)方法獲得的皺木耳菌種成活率高，可達(dá)92％以上，與新鮮耳片分離方法相比，本專利技術(shù)方法雜菌感染率低、耳片成活率高、操作簡單、成本低、適用于高成活率的皺木耳菌種分離培養(yǎng)。附圖說明圖1為皺木耳耳片；圖2為培養(yǎng)的母種；圖3為培養(yǎng)分離的原種。具體實(shí)施方式下面結(jié)合附圖及實(shí)施例對本專利技術(shù)做進(jìn)一步的描述，本專利技術(shù)的保護(hù)范圍不局限于以下所述。實(shí)施例1：一種皺木耳菌種的分離培養(yǎng)方法，它包括以下步驟：S1.干燥：采收新鮮皺木耳，清除耳片表面雜質(zhì)后置于通風(fēng)干燥處，干燥至耳片含水量為10％，皺木耳耳片如圖1所示；S2.消毒：將干燥后的耳片放入質(zhì)量百分比濃度為70％酒精中浸泡10分鐘；S3.接種培養(yǎng)：將消毒后的耳片剪碎放入培養(yǎng)基中培養(yǎng)，碎耳片的大小為：0.2cm×0.5cm，耳片上生長出菌絲體，圖如2所示；S4.純化：用手術(shù)刀切取菌絲體最前端菌種，放入另一培養(yǎng)基中培養(yǎng)，選取菌絲體為白色、濃密、生長整齊、無雜菌的菌種，即為分離純化的皺木耳菌種，如圖3所示。其中，所述培養(yǎng)基成分如下：酵母粉：5g、葡萄糖：18g、瓊脂：20g，加水至1000ml；所述培養(yǎng)的條件為：培養(yǎng)溫度20℃，培養(yǎng)時間10天。實(shí)施例2：一種皺木耳菌種的分離培養(yǎng)方法，它包括以下步驟：S1.干燥：采收新鮮皺木耳，清除耳片表面雜質(zhì)后置于通風(fēng)干燥處，干燥至耳片含水量為15％，皺木耳耳片如圖1所示；S2.消毒：將干燥后的耳片放入質(zhì)量百分比濃度為75％酒精中浸泡15分鐘；S3.接種培養(yǎng)：將消毒后的耳片剪碎放入培養(yǎng)基中培養(yǎng)，碎耳片的大小為：0.5cm×0.5cm，耳片上生長出菌絲體，圖如2所示；S4.純化：用手術(shù)刀切取菌絲體最前端菌種，放入另一培養(yǎng)基中培養(yǎng)，選取菌絲體為白色、濃密、生長整齊、無雜菌的菌種，即為分離純化的皺木耳菌種，如圖3所示。其中，所述培養(yǎng)基成分如下：酵母粉：6g、葡萄糖：20g、瓊脂：22g，加水至1000ml；所述培養(yǎng)的條件為：培養(yǎng)溫度25℃，培養(yǎng)時間15天。實(shí)施例3：一種皺木耳菌種的分離培養(yǎng)方法，它包括以下步驟：S1.干燥：采收新鮮皺木耳，清除耳片表面雜質(zhì)后置于通風(fēng)干燥處，干燥至耳片含水量為11％，皺木耳耳片如圖1所示；S2.消毒：將干燥后的耳片放入質(zhì)量百分比濃度為71％酒精中浸泡11分鐘；S3.接種培養(yǎng)：將消毒后的耳片剪碎放入培養(yǎng)基中培養(yǎng)，碎耳片的大小為：0.3cm×0.3cm，耳片上生長出菌絲體，圖如2所示；S4.純化：用手術(shù)刀切取菌絲體最前端菌種，放入另一培養(yǎng)基中培養(yǎng)，選取菌絲體為白色、濃密、生長整齊、無雜菌的菌種，即為分離純化的皺木耳菌種，如圖3所示。其中，所述培養(yǎng)基成分如下：酵母粉：5.2g、葡萄糖：19g、瓊脂：21g，加水至1000ml；所述培養(yǎng)的條件為：培養(yǎng)溫度21℃，培養(yǎng)時間11天。實(shí)施例4：一種皺木耳菌種的分離培養(yǎng)方法，它包括以下步驟：S1.干燥：采收新鮮皺木耳，清除耳片表面雜質(zhì)后置于通風(fēng)干燥處，干燥至耳片含水量為12％，皺木耳耳片如圖1所示；S2.消毒：將干燥后的耳片放入質(zhì)量百分比濃度為72％酒精中浸泡13分鐘；S3.接種培養(yǎng)：將消毒后的耳片剪碎放入培養(yǎng)基中培養(yǎng)，碎耳片的大小為：0.4cm×0.2cm，耳片上生長出菌絲體，圖如2所示；S4.純化：用手術(shù)刀切取菌絲體最前端菌種，放入另一培養(yǎng)基中培養(yǎng)，選取菌絲體為白色、濃密、生長整齊、無雜菌的菌種，即為分離純化的皺木耳菌種，如圖3所示。其中，所述培養(yǎng)基成分如下：酵母粉：5.5g、葡萄糖：18.5g、瓊脂：21.5g，加水至1000ml；所述培養(yǎng)的條件為：培養(yǎng)溫度22℃，培養(yǎng)時間13天。實(shí)施例5：一種皺木耳菌種的分離培養(yǎng)方法，它包括以下步驟：S1.干燥：采收新鮮皺木耳，清除耳片表面雜質(zhì)后置于通風(fēng)干燥處，干燥至耳片含水量為14％，皺木耳耳片如圖1所示；S2.消毒：將干燥后的耳片放入質(zhì)量百分比濃度為74％酒精中浸泡14分鐘；S3.接種培養(yǎng)：將消毒后的耳片剪碎放入培養(yǎng)基中培養(yǎng)，碎耳片的大小為：0.3cm×0.2cm，耳片上生長出菌絲體，圖如2所示；S4.純化：用手術(shù)刀切取菌絲體最前端菌種，放入另一培養(yǎng)基中培養(yǎng)，選取菌絲體為白色、濃密、生長整齊、無雜菌的菌種，即為分離純化的皺木耳菌種，如圖3所示。其中，所述培養(yǎng)基成分如下：酵母粉：5.8g、葡萄糖：18.4g、瓊脂：21.5g，加水至1000ml；所述培養(yǎng)的條件為：培養(yǎng)溫度24℃，培養(yǎng)時間14天。采用實(shí)施例3的方法進(jìn)行分離培養(yǎng)皺木耳菌種，對照組采用干耳片，其余同實(shí)施例3的方法進(jìn)行，試驗結(jié)果如表1所示：表1：實(shí)驗結(jié)果分離方法分離數(shù)量成活數(shù)量成活率新鮮耳片5036％干耳片504692％本文檔來自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
一種皺木耳菌種的分離培養(yǎng)方法，其特征在于，它包括以下步驟：S1.?干燥：采收新鮮皺木耳，清除耳片表面雜質(zhì)后置于通風(fēng)干燥處，干燥至耳片含水量為10～15%；S2.?消毒：將干燥后的耳片放入質(zhì)量百分比濃度為70～75%酒精中浸泡10～15分鐘；S3.?接種培養(yǎng)：將消毒后的耳片剪碎放入培養(yǎng)基中培養(yǎng)，耳片上生長出菌絲體；S4.?純化：用手術(shù)刀切取菌絲體最前端菌種，放入另一培養(yǎng)基中培養(yǎng)，選取菌絲體為白色、濃密、生長整齊、無雜菌的菌種，即為分離純化的皺木耳菌種。

【技術(shù)特征摘要】
1.一種皺木耳菌種的分離培養(yǎng)方法，其特征在于，它包括以下步驟：S1. 干燥：采收新鮮皺木耳，清除耳片表面雜質(zhì)后置于通風(fēng)干燥處，干燥至耳片含水量為10～15%；S2. 消毒：將干燥后的耳片放入質(zhì)量百分比濃度為70～75%酒精中浸泡10～15分鐘；S3. 接種培養(yǎng)：將消毒后的耳片剪碎放入培養(yǎng)基中培養(yǎng)，耳片上生長出菌絲體；S4. 純化：用手術(shù)刀切取菌絲體最前端菌種，放入另一培養(yǎng)基中培養(yǎng)，選取菌絲體為白色、濃密、生長整齊、無雜菌的菌種，即為分離純化的皺木...

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：王波，黃忠乾，甘炳成，鮮靈，
申請(專利權(quán))人：四川省農(nóng)業(yè)科學(xué)院土壤肥料研究所，
類型：發(fā)明
國別省市：四川;51