用于親和色譜法和用于延長治療劑的半衰期的化合物制造技術(shù)

本申請?zhí)峁┝擞糜谟H和色譜法的化合物，更具體地用于親和色譜法以純化血清白蛋白(尤其是人血清白蛋白(HSA)及其融合蛋白)的化合物。本申請還提供了延長治療劑(尤其是治療性肽試劑和小分子)的半衰期的方法，如通過將本文所述的化合物綴合至治療性肽或小分子(該治療性肽或小分子在給藥后結(jié)合至HAS)，從而提供治療劑的延長釋放。

【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】
【國外來華專利技術(shù)】
本專利技術(shù)涉及用于親和色譜法的化合物，更具體地涉及用于親和純化血清白蛋白(尤其是人血清白蛋白(HSA))的化合物。該化合物還用于延長治療劑(尤其是治療性肽試劑和小分子)的半衰期，如通過綴合至該治療性肽或小分子(該治療性肽或小分子在給藥后結(jié)合至HAS)，從而提供治療劑的延長釋放。
技術(shù)介紹
結(jié)合至人血清白蛋白的小分子已描述用于純化生物分子(如血清白蛋白，包括人血清白蛋白(HSA)，抗體和融合蛋白)(參見S.Subramanian，Dye-LigandAffinityChromatography:TheInteractionofCibacronBlueWithProteinsandEnzymes,CRCCriticalReviewsinBiochemistry(1984)vol16(2),pp.169–205；美國專利4,722,896；美國專利5,849,874；和PCT公開WO2012/020080A2)。類似地，結(jié)合至人血清白蛋白的小分子已描述用于延長通過注射給藥的治療劑的半衰期，尤其是治療性肽試劑(參見例如L.PollaroandC.Heinis,StrategoestoProlongthePlasmaResidenceTimeofPeptideDrugs,Med.Chem.Commun.(2010)1,319-324)。需要另外的改善的化合物，所述化合物可用于從存在于細胞裂解液(lysate)或其它液體混合物和溶液中的其它生物分子和化合物純化、分離和/或捕捉這些生物分子。同樣，需要可用于安全和有效增加現(xiàn)有治療性分子(尤其是治療性肽、多肽和小分子)的半衰期的另外的化合物，這些治療性分子當給藥于受試者后進入受試者的循環(huán)系統(tǒng)。
技術(shù)實現(xiàn)思路
本專利技術(shù)的實施方案的特征為新的化合物，其用作直接純化多種生物分子的親和試劑，所述生物分子如血漿蛋白質(zhì)，包括血清白蛋白，尤其是人血清白蛋白和HSA-融合蛋白。其它可純化的生物分子包括免疫球蛋白、纖維蛋白原、α1-酸糖蛋白等；酶，包括淀粉酶、纖維素酶、小牛腸堿性磷酸酶(CIAP)、乳酸脫氫酶(LDH)等；和人工蛋白質(zhì)或蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)域，包括親和標記的蛋白或結(jié)構(gòu)域(如具有6His、FLAG、GST等標記)、Fc-融合蛋白、域抗體等。此外，當綴合至治療劑特別是肽治療劑時，這些化合物可用于延長該治療劑在給藥后在血液中的半衰期。本專利技術(shù)的實施方案提供了新的化學類型，其對HAS(包括其片段和變體)具有高親和力和特異性，如當偶聯(lián)至瓊脂糖或另一底物時。而且，對于純化HAS和HSA-融合蛋白，該親和樹脂技術(shù)比可商購的配體具有顯著更高的選擇性。更高的選擇性通過本專利技術(shù)的化合物與白蛋白上的結(jié)合位點的特異性相互作用而實現(xiàn)。本專利技術(shù)的實施方案為式I或式II的化合物或其鹽,其中R1為H、-Cl、-F、-Br、-I、-OH、-CN、-NO2、取代或未取代的C1-C6烷基、取代或未取代的C1-C6烯基、取代或未取代的環(huán)烷基、芳基或雜芳基；R3為–[(CH2)2E]n(CH2)2NR’R”且n為0至30的任意整數(shù),其中R’和R”各自獨立地為H、取代或未取代的C1-C6烷基、取代或未取代的C1-C6烯基、或取代或未取代的環(huán)烷基；芳基為任何取代或未取代的、完全或部分芳香的烴取代基或雜芳基取代基；Y1和Y3獨立地為C、O、N、NR2或S，其中R2為H、取代或未取代的C1-C6烷基、取代或未取代的C1-C6烯基、取代或未取代的環(huán)烷基、芳基或雜芳基；Y2為C或N；A和D獨立地為脒、硫代酰胺，或A和/或D不存在，其中R'為H、取代或未取代的C1-C6烷基、取代或未取代的C1-C6烯基、取代或未取代的環(huán)烷基、芳基或雜芳基；B為取代或未取代的C4-C9-環(huán)烷基、取代或未取代的包含N、O或S的C4-C9-雜環(huán)烷基、取代或未取代的包含N、O、S的雜芳基，或B不存在；C為以下任意一種：芳基、雜芳基、脒、硫代酰胺，或C不存在，其中R'和/或R”各自獨立地為H、取代或未取代的C1-C6烷基、取代或未取代的C1-C6烯基、取代或未取代的環(huán)烷基、芳基或雜芳基；E為CH2、O、NH或S，或E不存在；Z為取代或未取代的芳基、取代或未取代的包含N、O或S的雜烷基，或取代或未取代的包含N、O、S的雜芳基，或Z不存在。在另一方面，本專利技術(shù)提供了式III或式IV的化合物或其鹽，其中:各Z1、Z2、Z3和Z4獨立地選自N和CR1且Z1、Z2、Z3和Z4中的不超過兩個為N，且各R1獨立地選自H、-Cl、-F、-Br、-I、-OH、-CN、-NO2、取代或未取代的C1-C6烷基、取代或未取代的C1-C6烷氧基、取代或未取代的C1-C6烯基、取代或未取代的環(huán)烷基、芳基或雜芳基；R3為–[(CH2)2E]n(CH2)2NR’R”且n為0至30的任意整數(shù)，其中R’和R”各自獨立地為H、取代或未取代的C1-C6烷基、取代或未取代的C1-C6烯基、或取代或未取代的環(huán)烷基；芳基為任何取代或未取代的、完全或部分芳香的烴取代基或雜芳基取代基；Y1和Y3獨立地為C、CR2、O、N、NR2或S，其中R2為H、取代或未取代的C1-C6烷基、取代或未取代的C1-C6烯基、取代或未取代的環(huán)烷基、芳基或雜芳基；Y2為C；A和D獨立地為脒、硫代酰胺，或A和/或D不存在；B為取代或未取代的C4-C9-環(huán)烷基、取代或未取代的包含N、O或S的C4-C9-雜環(huán)烷基、取代或未取代的包含N、O、S的雜芳基，或B不存在；C為以下任意一種：芳基、雜芳基、脒、硫代酰胺；E為CH2、O、NH或S，或E不存在；且Z為取代或未取代的芳基、取代或未取代的包含N、O或S的雜烷基，或取代或未取代的包含N、O、S的雜芳基，或Z不存在。如本文所公開，式I、式II、式III和式IV的化合物可結(jié)合至固相以制備親和色譜的固相，其用于從包含蛋白質(zhì)和一種或多種雜質(zhì)的水溶液分離感興趣的蛋白質(zhì)。例如，該固相為瓊脂糖。感興趣的蛋白質(zhì)可包括，例如，人血清白蛋白。該水溶液可為：源自細胞裂解液，源自細胞收集物/肉湯(cellharvest/broth)，分離自體液(例如血液)，或源自其它混合物。例如，如本文所公開的親和瓊脂糖材料可用于從細胞裂解液和其它混合物純化、分離或捕捉多種生物分子。可從液體/水溶液混合物中的其它生物分子和雜質(zhì)純化、分離或捕捉的生物分子為這樣的生物分子，如血漿蛋白質(zhì)，包括血清白蛋白、免疫球蛋白、纖維蛋白原、α1-酸糖蛋白等；酶，包括淀粉酶、纖維素酶、小牛腸堿性磷酸酶(CIAP)、乳酸脫氫酶(LDH)等；和人工蛋白本文檔來自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護點】
式I的化合物或其鹽，其中:R1為H、?Cl、?F、?Br、?I、?OH、?CN、?NO2、取代或未取代的C1?C6烷基、取代或未取代的C1?C6烯基、取代或未取代的環(huán)烷基、芳基或雜芳基；R3為–[(CH2)2E]n(CH2)2NR’R”且n為0至30的任意整數(shù),其中R’和R”各自獨立地為H、取代或未取代的C1?C6烷基、取代或未取代的C1?C6烯基、或取代或未取代的環(huán)烷基；芳基為任何取代或未取代的、完全或部分芳香的烴取代基或雜芳基取代基；Y1和Y3獨立地為C、O、N、NR2或S，其中R2為H、取代或未取代的C1?C6烷基、取代或未取代的C1?C6烯基、取代或未取代的環(huán)烷基、芳基或雜芳基；Y2為C或N；A和D獨立地為脒、硫代酰胺，或A和/或D不存在；B為取代或未取代的C4?C9?環(huán)烷基、取代或未取代的包含N、O或S的C4?C9?雜環(huán)烷基、取代或未取代的包含N、O、S的雜芳基，或B不存在；C為以下任意一種：芳基、雜芳基、脒、或硫代酰胺；E為CH2、O、NH或S，或E不存在；且Z為取代或未取代的芳基、取代或未取代的包含N、O或S的雜烷基，或取代或未取代的包含N、O、S的雜芳基，或Z不存在。

【技術(shù)特征摘要】
【國外來華專利技術(shù)】2013.10.01 US 61/885,146;2014.07.17 US 62/025,9941.式I的化合物
或其鹽，其中:
R1為H、-Cl、-F、-Br、-I、-OH、-CN、-NO2、取代或未取代的C1-C6烷基、取代或未取代的C1-
C6烯基、取代或未取代的環(huán)烷基、芳基或雜芳基；
R3為–[(CH2)2E]n(CH2)2NR’R”且n為0至30的任意整數(shù),
其中R’和R”各自獨立地為H、取代或未取代的C1-C6烷基、取代或未取代的C1-C6烯基、或
取代或未取代的環(huán)烷基；
芳基為任何取代或未取代的、完全或部分芳香的烴取代基或雜芳基取代基；
Y1和Y3獨立地為C、O、N、NR2或S，其中R2為H、取代或未取代的C1-C6烷基、取代或未取代的
C1-C6烯基、取代或未取代的環(huán)烷基、芳基或雜芳基；Y2為C或N；
A和D獨立地為脒、硫代酰胺，或A和/或D不存在；
B為取代或未取代的C4-C9-環(huán)烷基、取代或未取代的包含N、O或S的C4-C9-雜環(huán)烷基、取代
或未取代的包含N、O、S的雜芳基，或B不存在；
C為以下任意一種：
芳基、雜芳基、脒、或硫代酰胺；
E為CH2、O、NH或S，或E不存在；且
Z為取代或未取代的芳基、取代或未取代的包含N、O或S的雜烷基，或取代或未取代的包
含N、O、S的雜芳基，或Z不存在。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中
R1為H、-Cl、-F、-Br或-I；
R3為–[(CH2)2E]n(CH2)2NR’R”且n為0至12的任意整數(shù)，其中R’和R”各自獨立地為H、-
CH3、-CH2CH3、-CH(CH3)2、-CH2CH(CH3)2、-(CH)nCH3或–C(CH3)3，在-(CH)nCH3中n為1、2、3、4或5；
芳基為取代或未取代的苯基、甲苯基、二甲苯基、萘基、芐基、噻吩基、吲哚基、吡咯基、
吡啶基、嘧啶基、嘌呤基、吡喃基、呋喃基、噻吩基、噻唑基、咪唑基、硫代咪唑基、噁唑基、氮
雜基、硫雜基、硫氮雜基、喹啉基、氧雜基或噁二唑基；
Y1和Y3獨立地為C、O、N、NR2或S，其中R2為H、-CH3、-CH2CH3、-CH(CH3)2、-CH2CH(CH3)2、-
(CH)nCH3或–C(CH3)3，在-(CH)nCH3中n為1、2、3、4或5；
Y2為C或N；
A和D獨立地為脒、硫代酰胺，或A和/或D不存在；
B為取代或未取代的C4-C9-環(huán)烷基、取代或未取代的包含N的C4-C9-雜環(huán)烷基、取代或未
取代的包含N、S或O的雜芳基，或B不存在；
C為以下任意一種：
芳基、雜芳基、脒、硫代酰胺，或C不存在；
E為CH2、O、NH或S，或E不存在；且
Z為取代或未取代的芳基或取代或未取代的包含N、O或S的雜芳基，或Z不存在；
或其鹽。
3.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其為如下所示的式Ia,
或其鹽，其中：
R1為H、-Cl、-F、-Br、-I、-OH、-CN、-NO2、取代或未取代的C1-C6烷基、取代或未取代的C1-
C6烯基、取代或未取代的環(huán)烷基、芳基或雜芳基；
R3為–[(CH2)2E]n(CH2)2NR’R”且n為0至30的任意整數(shù),
其中R’和R”各自獨立地為H、取代或未取代的C1-C6烷基、取代或未取代的C1-C6烯基、或
取代或未取代的環(huán)烷基；
R4為H、-Cl、-F、-Br、-I、-OH、-CN、-NO2、取代或未取代的C1-C6烷基、取代或未取代的C1-
C6烯基、取代或未取代的環(huán)烷基、芳基或雜芳基；
Y1和Y3獨立地為C、O、N、NR2或S，其中R2為H、取代或未取代的C1-C6烷基、取代或未取代的
C1-C6烯基、取代或未取代的環(huán)烷基、芳基或雜芳基；
Y2為C或N；
A和D獨立地為脒、硫代酰胺，或A和/或D不存在；
B為取代或未取代的C4-C9-環(huán)烷基、取代或未取代的包含N的C4-C9-雜環(huán)烷基、取代或未
取代的包含N、S或O的雜芳基，或B不存在；
E為CH2、O、NH或S，或E不存在；且
Z為取代或未取代的芳基或取代或未取代的包含N、O或S的雜芳基，或Z不存在。
4.根據(jù)權(quán)利要求3的化合物,
其中
R1為H、-Cl、-F、-Br或-I；
R3為–[(CH2)2E]n(CH2)2NR’R”且n為0至12的任意整數(shù)；
Y1和Y3獨立地為C、O、N、NR2或S，其中R2為H、-CH3、-CH2CH3、-CH(CH3)2、-CH2CH(CH3)2、-
(CH)nCH3或–C(CH3)3，在-(CH)nCH3中n為1、2、3、4或5；
Y2為C；
E為CH2、O、NH或S，或E不存在；
或其鹽。
5.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其為如下所示的式Ib,
其中R1為H、-Cl、-F、-Br、-I、-OH、-CN、-NO2、取代或未取代的C1-C6烷基、取代或未取代的
C1-C6烯基、取代或未取代的環(huán)烷基、芳基或雜芳基；
R3為–[(CH2)2E]n(CH2)2NR’R”且n為0至30的任意整數(shù),
其中R’和R”各自獨立地為H、取代或未取代的C1-C6烷基、取代或未取代的C1-C6烯基、或
取代或未取代的環(huán)烷基，且E為CH2、O、NH或S，或E不存在；
R4為H、-Cl、-F、-Br、-I、-OH、-CN、-NO2、取代或未取代的C1-C6烷基、取代或未取代的C1-
C6烯基、取代或未取代的環(huán)烷基、芳基或雜芳基；
Y1和Y3獨立地為C、O、N、NR2或S，其中R2為H、取代或未取代的C1-C6烷基、取代或未取代的
C1-C6烯基、取代或未取代的環(huán)烷基、芳基或雜芳基；且
Y2為C或N；或其鹽。
6.根據(jù)權(quán)利要求5的化合物
其中
R1為H、-Cl、-F、-Br或–I、-OH、-CN、-NO2、取代或未取代的C1-C6烷基；
R3為–[(CH2)2E]n(CH2)2NR’R”且n為0至12的任意整數(shù)；
R4為H、-Cl、-F、-Br、-I、-OH、-CN、-NO2、取代或未取代的C1-C6烷基；
Y1和Y3獨立地為C、O、N、NR2或S，其中R2為H、-CH3、-CH2CH3、-CH(CH3)2、-CH2CH(CH3)2、-
(CH)nCH3或–C(CH3)3，在-(CH)nCH3中n為1、2、3、4或5；
Y3為C；或其鹽。
7.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其為如下所示的式Ic
其中
R1為H、-Cl、-F、-Br、-I、-OH、-CN、-NO2、取代或未取代的C1-C6烷基、取代或未取代的C1-
C6烯基、取代或未取代的環(huán)烷基、芳基或雜芳基；
R3為–[(CH2)2E]n(CH2)2NR’R”且n為0至30的任意整數(shù),
其中R’和R”各自獨立地為H、取代或未取代的C1-C6烷基、取代或未取代的C1-C6烯基、或
取代或未取代的環(huán)烷基，且E為CH2、O、NH或S，或E不存在；
R4為H、-Cl、-F、-Br、-I、-OH、-CN、-NO2、取代或未取代的C1-C6烷基、取代或未取代的C1-
C6烯基、取代或未取代的環(huán)烷基、芳基或雜芳基；
Y1和Y3獨立地為C、O、N、NR2或S，其中R2為H、取代或未取代的C1-C6烷基、取代或未取代的
C1-C6烯基、取代或未取代的環(huán)烷基、芳基或雜芳基；
Y2為C或N；
或其鹽。
8.根據(jù)權(quán)利要求7的化合物,
其中
R1為H、-Cl、-F、-Br或-I；
R3為–[(CH2)2E]n(CH2)2NR’R”且n為0至12的任意整數(shù)；
Y1和Y3獨立地為C、O、N、NR2或S，其中R2為H、-CH3、-CH2CH3、-CH(CH3)2、-CH2CH(CH3)2、-
(CH)nCH3或–C(CH3)3，在-(CH)nCH3中n為1、2、3、4或5；
Y2為C或N；
或其鹽。
9.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其選自,
或其鹽。
10.式II的化合物
或其鹽，其中:
R1為H、-Cl、-F、-Br、-I、-OH、-CN、-NO2、取代或未取代的C1-C6烷基、取代或未取代的C1-
C6烯基、取代或未取代的環(huán)烷基、芳基或雜芳基；
R3為–[(CH2)2E]n(CH2)2NR’R”且n為0至30的任意整數(shù),
其中R’和R”各自獨立地為H、取代或未取代的C1-C6烷基、取代或未取代的C1-C6烯基、或
取代或未取代的環(huán)烷基；
芳基為任何取代或未取代的、完全或部分芳香的烴取代基或雜芳基取代基；
Y1和Y3獨立地為C、O、N、NR2或S，其中R2為H、取代或未取代的C1-C6烷基、取代或未取代的
C1-C6烯基、取代或未取代的環(huán)烷基、芳基或雜芳基；
Y2為C或N；
A和D獨立地為脒、硫代酰胺，或A和/或D不存在；
B為取代或未取代的C4-C9-環(huán)烷基、取代或未取代的包含N、O或S的C4-C9-雜環(huán)烷基、取代
或未取代的包含N、O、S的雜芳基，或B不存在；
C為以下任意一種：
芳基、雜芳基、脒、硫代酰胺，或C不存在；
E為CH2、O、NH或S，或E不存在；且
Z為取代或未取代的芳基、取代或未取代的包含N、O或S的雜烷基，或取代或未取代的包
含N、O、S的雜芳基，或Z不存在。
11.根據(jù)權(quán)利要求10的化合物，其中
R1為H、-Cl、-F、-Br或-I；
R3為–[(CH2)2E]n(CH2)2NR’R”且n為0至12的任意整數(shù)，其中R’和R”各自獨立地為H、-
CH3、-CH2CH3、-CH(CH3)2、-CH2CH(CH3)2、-(CH)nCH3或–C(CH3)3，在-(CH)nCH3中n為1、...

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：P庫姆帕魯姆，O舍恩，CP多納休，G埃文達，DI伊斯雷爾，D保萊拉，L蒯，NV普拉布，
申請(專利權(quán))人：葛蘭素史密斯克萊知識產(chǎn)權(quán)發(fā)展有限公司，
類型：發(fā)明
國別省市：英國;GB