方法技術

在一個方面，本文提供一種精制植物油的方法，所述方法包括使所述油與酶接觸的步驟，所述酶能夠水解葉綠素或葉綠素衍生物，其中所述酶在存在至少0.1重量％磷脂的情況下與所述油接觸。

【技術實現步驟摘要】
【國外來華專利技術】
本專利技術涉及對植物性食品和飼料產品、尤其是植物油的工業加工。本專利技術可用于減少或消除由葉綠素和葉綠素衍生物產生的污染。
技術介紹
葉綠素是在整個植物界廣泛存在的一種綠色色素。葉綠素是光合作用所必需的，并且是地球上發現的最豐富的有機金屬化合物之一。因而許多來自植物的產品(包括食物和飼料)含有相當多的葉綠素。例如，來自含油種子(例如大豆、棕櫚種子或油菜籽(卡諾拉油菜)、棉籽)的植物 油和花生油通常含有一些葉綠素。然而，通常不期望植物油中存在高含量的葉綠素色素。這是因為葉綠素使油帶上難看的綠色，并且在儲存期間可引起油的氧化，從而導致油的變質。已采用各種以除去植物油中的葉綠素。在產油過程的多個階段，包括種子破碎、油萃取、脫膠、堿處理和漂白步驟，都可除去葉綠素。然而，漂白步驟通常對于將葉綠素殘留量降至可接受含量是最為有效的。在漂白期間，加熱油并使其通過吸附劑以除去葉綠素和影響成品油外觀和/或穩定性的其他有色化合物。用于漂白步驟的吸附劑通常為粘土。在可食用油加工行業中，采用上述步驟通常會將加工油中的葉綠素含量降至介于0.02至0.05 111之間。然而，漂白步驟由于漂白粘土的夾帶作用會增加加工成本和降低油產量。粘土的使用可能會將許多有用的化合物(例如類胡蘿卜素和生育酚)也從油中除去。另外粘土的使用也很昂貴，這尤其是因為用過的粘土(即廢料)的處理困難、危險(易于自燃)，因而處理成本高。因而已進行了用其他辦法從油中除去葉綠素的嘗試，例如使用葉綠素酶。在植物中，葉綠素酶(chlorophyllase或chlase)被認為參與葉綠素降解，并催化葉綠素中酯鍵的水解而生成脫植基葉綠素和葉綠醇。W02006009676描述了可降低組合物中葉綠素污染的一種工業，例如用葉綠素酶處理植物油。此中產生的水溶性脫植基葉綠素也是綠色，但是可通過水萃取法或二氧化硅處理除去。葉綠素通常在用于產油的種子中以及從種子提取油的過程中部分降解。一種常見的修飾為卟啉(二氫卟酚)環失去鎂離子形成稱為脫鎂葉綠素的衍生物(參見圖I)。卟啉環上高極性鎂離子的丟失導致脫鎂葉綠素與葉綠素相比在理化性質上顯著不同。通常在加工過程中，油中的脫鎂葉綠素比葉綠素含量更豐富。脫鎂葉綠素呈淡綠色，可通過與用于葉綠素類似的從油中除去，例如WO 2006009676中所述通過由具有脫鎂葉綠素酶活性的酶催化的酯酶反應。在某些條件下，一些葉綠素酶能夠水解脫鎂葉綠素以及葉綠素，因此適于除去這兩種污染物。脫鎂葉綠素水解的產物為紅色/褐色的脫鎂葉綠酸和葉綠醇。脫鎂葉綠酸也可由脫植基葉綠素(即葉綠素水解之后)失去鎂離子生成(參見圖I)。WO2006009676教導了通過與脫植基葉綠素類似的(例如通過水萃取法或二氧化硅吸附)除去脫鎂葉綠酸。脫鎂葉綠素還可通過含油種子收獲和儲存期間植物酶的活性或者通過精制油期間的加工條件(即熱)進一步降解為焦脫鎂葉綠素(參見“Behaviour of ChlorophyllDerivatives in Canola Oil Processing，，，JAOCS, Vol, no. 9 (Sept. 1993) pages837-841 ( “卡諾拉油加工過程中葉綠素衍生物的行為”，《美國油脂化學協會雜志》，第9卷，1993年9月，第837-841頁))。一種可能的機制是脫鎂葉綠素碳環上甲酯鍵的酶水解，然后不穩定中間體向焦脫鎂葉綠素的非酶轉化。據報道來自藜(Chenopodium album)的名為脫鎂葉綠酸酶的28-29kDa酶能夠催化脫鎂葉綠酸上類似的反應，以產生不含葉綠醇的焦脫鎂葉綠素衍生物，稱為焦脫鎂葉綠酸(參見圖26)。焦脫鎂葉綠酸比脫鎂葉綠酸極性低，導致焦脫鎂葉綠酸與脫鎂葉綠酸相比具有降低了的水溶解度和增加了的油溶解度。根椐加工條件，在加工期間植物油中焦脫鎂葉綠素可比脫鎂葉綠素和葉綠素含量更為豐富(參見 Table 9in volume 2· 2. ofBailey’ s Industrial Oil and FatProducts (2005), 6th edition,Ed. by Fereidoon Shahidi, John Wiley&Sons (由 Fereidoon Shahidi編輯、約翰威立父子出版公司于2005年出版的《貝雷工業油脂產品》，第6版，第2.2.卷的表9))。這部分地是由于在植物材料的收獲和儲存期間葉綠素中鎂的丟失。如果使用90°C或更高溫度下的延長熱處理，油中焦脫鎂葉綠素的量可能會增加并且可高于脫鎂葉綠素的量。也可通過在壓榨和萃取之前加熱含油種子以及精制過程中油脫膠和堿處理降低葉綠素含量。還觀察到油中的磷脂可與鎂絡合，從而降低葉綠素的量。因而在許多植物油中與焦脫鎂葉綠素(和脫鎂葉綠素)相比，葉綠素為相對微量的污染物。因此仍然需要改進以從植物油中除去葉綠素和葉綠素衍生物(諸如脫鎂葉綠素和焦脫鎂葉綠素)。尤其需要一種可提高除去葉綠素和葉綠素衍生物的效率同時降低油中其他所需化合物的損失的。
技術實現思路
在一個方面，本專利技術提供了一種精制植物油的，該包括使油與能夠水解葉綠素或葉綠素衍生物的酶相接觸的步驟，其中酶在存在至少O. I重量％磷脂的情況下與油接觸。在一些實施例中，按油的總重量計，在存在低于O. 2重量％溶血磷脂(例如低于O.15重量％、低于O. I重量％或低于O. 05重量％ )的情況下，使酶與油接觸。在一個實施例中，酶在油脫膠之前與油接觸。在另一個實施例中，酶在油脫膠的步驟期間與油接觸。脫膠步驟可包括，例如水化脫膠、酸法脫膠、酶法脫膠和/或全脫膠/中和(例如向油中加酸，然后用堿中和)。在一些特定的實施例中，對于酶在脫膠前與油接觸的情況，酶法脫膠步驟可包括使油與磷脂酶(例如磷脂酶Al、磷脂酶A2或磷脂酶C)或酰基轉移酶接觸。酰基轉移酶可包含，例如SEQ ID NO 23的氨基酸序列或與其具有至少80%序列同一性的序列。在另一個實施例中，該包括使油與該酶和在單個步驟中不產生溶血磷脂的磷脂酶(例如磷脂酶C)接觸。例如，該酶可在使用磷脂酶C的酶法脫膠步驟期間與油接觸，即同時使用該酶和磷脂酶C。在另一些實施例中，該酶在存在至少O. 5重量％、至少I重量％、至少I. 5重量％或至少2重量％磷脂的情況下與油接觸。在另一些實施例中，該酶在低于80°C、優選地低于70°C、優選地55°C至65°C、優選地58°C至62°C (例如約60°C )的溫度下與油接觸。優選地，該酶在存在I至5重量％水(例如約1%或約2重量％水)的情況下與油接觸。在一個實施例中，該酶在pH為6. O至6.8(例如6. 3至6. 5)時與油接觸。優選地，該不包括粘土處理步驟。該優選地還包括進行脫臭步驟以產生脫臭油和餾出液(例如含水餾出液或含氮餾出液)。通常，該與包括粘土處理步驟的相比在精制(脫臭或非脫臭)油和/或餾出夜中產生的類胡蘿卜素和/或生育酚水平提聞。 在一個實施例中，該酶包括葉綠素酶、脫鎂葉綠素酶、焦脫鎂葉綠素酶或脫鎂葉綠素脫鎂葉綠酸水解酶。例如，該酶可包含SEQ ID NO :1、2、4、6或8至15的任何之一中所定義的多肽序列，或其功能片段或變體。優選地，該酶包含與SEQ ID N0:l、2、4、6或8至15的任何之一在例如至少50本文檔來自技高網...

【技術保護點】

【技術特征摘要】
【國外來華專利技術】2010.03.12 EP 10156412.8;2010.03.12 US 61/3131941.精制植物油的方法，所述方法包括使所述油接觸酶的步驟，所述酶能夠水解葉綠素或葉綠素衍生物，其中所述酶在存在至少O. I重量％磷脂的情況下與所述油接觸。2.根據權利要求I所述的方法，其中所述酶在存在少于O.2重量％溶血磷脂的情況下與所述油接觸。3.根據權利要求I或權利要求2所述的方法，其中所述酶在所述油脫膠步驟之前或期間與所述油接觸。4.根據權利要求3所述的方法，其中所述方法包括(a)使所述酶與所述油接觸，然后，(b)使用磷脂酶或酰基轉移酶使所述油脫膠。5.根據權利要求3所述的方法，其中所述方法包括使所述油與所述酶和磷脂酶C在單個步驟中接觸。6.根據前述任一項權利要求所述的方法，其中所述酶在存在至少I重量％磷脂的情況下與所述油接觸。7.根據前述任一項權利要求所述的方法，其中所述酶在低于70°C的溫度下與所述油接觸。8.根據前述任一項權利要求所述的方法，其中所述酶在存在I至5重量％水的情況下與所述油接觸。9.根據權利要求3至8中任一項所述的方法，其中所述脫膠步驟包括水化脫膠。10.根據權利要求3至9中任一項所述的方法，其中所述脫膠步驟包括向所述油中加入酸，然后用堿中和。11.根據前述任一項權利要求所述的方法，其中所述...

【專利技術屬性】
技術研發人員：R米科森，T喬根森，JB索伊，
申請(專利權)人：杜邦營養生物科學有限公司，
類型：
國別省市：