本發明專利技術公開了本發明專利技術的解磷菌株PAN?4已經于2012年9月11日保藏于中國科學院微生物研究所中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心（CGMCC），地址位于北京市朝陽區北辰西路1號院3號，保藏編號為CGMCC?NO.6546；分類命名為：?Pseudomonas?vancouverensis。本發明專利技術涉及的Pseudomonas?vancouverensis?Mohn?et?al??PAN?4新菌株，不僅解磷能力強，且高效促生核桃，改善根際微生物環境，促進植物生長，提高核桃苗光合生理特性和核桃苗磷素營養，具有促生優化根系微生態環境雙重功能。
【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及微生物領域，尤其涉及的是Pseudomonas vancouverensis Mohn et al解磷菌株PAN 4及其在核桃促生中的應用。
技術介紹
磷是植物生長發育所必需的營養元素，缺磷可導致農作物產量明顯降低。土壤全磷含量雖然較高，但多以難溶態存在于土壤中，難以被植物吸收利用。生產上通過施用磷肥來解決土壤缺磷問題，不僅會耗竭有限的磷礦資源，還可能造成環境污染，破壞生態平衡。解磷細菌(phosphate solubilizing bacteria)是一類能夠將土壤中植物難以吸收的磷轉化為可利用狀態磷的有益微生物，它通過活化土壤磷元素或影響植物根系分泌物的種類和數量，增加植物根系對周圍K、Ca > Mg, Fe、Zn等營養元素的吸收，從而促進植物的生 長發育。目前，在解磷微生物的研究中多以禾本科作物為接種對象，且對解磷微生物促生效應的研究僅集中在對植株株高和生物量的影響。前人的研究結果表明接種解磷菌劑對水稻、玉米、燕麥、綠豆、甘蔗等作物均具有明顯的促生效應。而以木本植物作為接種對象研究解磷菌劑的促生效應，國內外報道甚少。核桃廣泛分布于世界各地，是我國重要的經濟林木之一，因對水土保持的作用和其果實的營養保健功能，越來越受到重視。但是核桃植株生長對磷元素的需求量較大，磷是制約其生長的重要因子，目前未見Pseudomonas vancouverensis Mohn et al作為解憐菌劑在核桃上應用的報道。
技術實現思路
本專利技術的解磷菌株PAN 4菌株于2008年6月5采用稀釋平板法分離于四川南充核桃根際，經鑒定為Pseudomonas vancouverensis Mohn et a。已經于2012年9月11日保藏于中國科學院微生物研究所中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(CGMCC)，地址位于北京市朝陽區北辰西路I號院3號，保藏編號為CGMCC NO. 6546 ;分類命名為Pseudomonas vancouverensis。本專利技術涉及的Pseudomonasvancouverensis Mohn et al PAN 4新菌株，不僅解磷能力強，且高效促生核桃，改善根際微生物環境，促進植物生長，提高核桃苗光合生理特性和核桃苗磷素營養，具有促生優化根系微生態環境雙重功能。具體實施例方式以下結合具體實施例，對本專利技術進行詳細說明。實施例I Pseudomonas vancouverensis Mohn et al PAN 4 (CGMCC NO. 6546)液體制劑的發酵①一級斜面種子常規方法制作牛肉膏蛋白胨(蛋白胨10 g，牛肉膏3 g, NaCl 5g，瓊脂15 g，蒸餾水1000 mL, pH 7. O)斜面培養基，接種PAN4后在26_28°C下培養24小時制成一級種子。②二級液體種子解磷細菌培養基)經高壓滅菌后，按75mL液體盛于300mL三角瓶比例(通氧控制)裝瓶，在無菌狀態接種PAN4斜面種子，每瓶接種I支斜面種子，溫度26-28°C，初始pH值7. 5，120r/min振蕩培養36h，制成PAN4液體種子。③液體發酵葡萄糖20 g/L, (NH4Cl)L O g/L，初始pH值為7. 5，裝液量為75 mL，經高壓滅菌后，按75mL液體盛于300mL三角瓶比例(通氧控制)裝瓶，在無菌狀態接種PAN4液體種子，接種量4%，溫度26-28°C，120r/min振蕩培養72h，制成PAN4液體制劑。比濁法測定菌體量(0D600值I. 100)，并同時接種I mL菌液于PKV液體培養基(葡萄糖10 g, (NH4)2SO4O. 5 g, NaCl O. 3 g, KCl O. 3 g, FeSO4 · 7H20 O. 03 g, MnSO4 · 4H20 O. 03 g, MgSO4 · 7H200.3 g, Ca3(PO4)2 10 g，蒸餾水1000 mlL,pH 7· 0 7· 5)，鑰銻抗比色法測定其解磷能力達200mg/L 以上。·(2)制劑保存瓶裝制劑常溫保存半年(1%甘油)或低溫(4度)I年半不影響促生效果。(3)田間施用核桃按100-200倍(體積比)稀釋度沿根系幅面灌根，每株200毫升，春、夏各一次，連續三年，可促進核桃生長(株高、生物量)、提高核桃苗光合生理特性和核桃苗磷素營養；改善核桃根際微生物環境。實施例2試驗于2009年3月起在四川農業大學林木種質圃進行，核桃苗生長期間進行常規管理，并定期輪換花盆的位置。試驗土壤采自四川省雅安市大興鎮林木育種基地，采樣深度為O 20 cm,砂壤土。土壤理化性質經測定為土壤pH 7. I,有機質含量10.43 g/kg,全氮含量0.80 g/kg,全磷含量0.34 g/kg,有效磷含量4.50 mg/kg。樣土風干后過I mm篩，并與過I mm篩的河沙以3:1 (V: V)混合后用于盆栽試驗。待核桃苗移栽成活后，分不同濃度在核桃根際周圍用無菌注射器注射上述實施例I中的液體菌劑50 mL，重復6次，以每盆注射滅菌后的培養基(不含菌)50 mL對照。進行以下測定①核桃植株根際土壤微生物區系及生長的測定2009年10月中旬苗木停止生長后對根際土壤細菌、真菌、放線菌數量進行測定。測定方法為稀釋平板法，細菌采用牛肉膏蛋白胨培養基；放線菌采用改良高氏一號合成培養基，臨用時在已融化的培養基中每300 mL培養基加3%重鉻酸鉀I mL ;真菌采用馬丁氏孟加拉紅培養基，臨用時每100 mL培養基加1%鏈霉素液O. 3 mL,結果以每克干土所含數量表示。每處理重復5次。2009年10月中旬苗木停止生長后，分別測定其植株高度，并且每個處理選取5株生長一致的正常植株，將其根、莖、葉分別在105 °C下殺青30 min, 75 °C下烘干至恒重后稱重，計算每株總生物量。結果見表I :表I解磷菌劑對核桃苗生長和根際微生物的影響權利要求1.解磷菌株PAN4菌株，保藏編號為CGMCC NO. 6546 ;分類命名為Pseudomonasvancouverensis。2.根據權利要求I所述的解磷菌株PAN4菌株在核桃促生中的應用，按100-200倍稀釋度沿根系幅面灌根，每株200毫升，春、夏各一次，連續三年，可促進核桃生長、提高核桃苗光合生理特性和核桃苗磷素營養；改善核桃根際微生物環境。全文摘要本專利技術公開了本專利技術的解磷菌株PAN 4已經于2012年9月11日保藏于中國科學院微生物研究所中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(CGMCC)，地址位于北京市朝陽區北辰西路1號院3號，保藏編號為CGMCC NO.6546；分類命名為 Pseudomonas vancouverensis。本專利技術涉及的Pseudomonas vancouverensis Mohn et al PAN 4新菌株，不僅解磷能力強，且高效促生核桃，改善根際微生物環境，促進植物生長，提高核桃苗光合生理特性和核桃苗磷素營養，具有促生優化根系微生態環境雙重功能。文檔編號A01G7/06GK102911895SQ20121036589公開日2013年2月6日 申請日期2012年9月27日 優先權日2012年9月27日專利技術者朱天輝, 李姝江, 余旋, 張麗娜, 譙天敏, 樸春根本文檔來自技高網...
【技術保護點】
解磷菌株PAN？4菌株，保藏編號為CGMCC？NO.6546；分類命名為：？Pseudomonas？vancouverensis。
【技術特征摘要】
【專利技術屬性】
技術研發人員：朱天輝，李姝江，余旋，張麗娜，譙天敏，樸春根，崔曉亮，
申請(專利權)人：四川農業大學，
類型：發明
國別省市：
還沒有人留言評論。發表了對其他瀏覽者有用的留言會獲得科技券。