本發(fā)明專利技術(shù)提供了一種分離的蛋白質(zhì)復(fù)合物，其包含生長因子、生長因子結(jié)合蛋白和玻連蛋白。優(yōu)選地，所述分離的蛋白質(zhì)復(fù)合物包含胰島素樣生長因子I、胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白3或胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白5和玻連蛋白。本發(fā)明專利技術(shù)還提供了調(diào)節(jié)細胞增殖和/或遷移的方法，通過施用所述蛋白質(zhì)復(fù)合物進行創(chuàng)傷修復(fù)，皮膚修復(fù)和組織置換治療。相反，通過使用破壞生長因子蛋白質(zhì)復(fù)合物在體內(nèi)形成的藥劑，可抑制生長因子驅(qū)動的細胞增殖和/或遷移，以例如治療癌癥，牛皮癬，動脈硬化和有疤痕過度生長傾向的創(chuàng)傷。（*該技術(shù)在2021年保護過期，可自由使用*）
【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)涉及一種分離的蛋白質(zhì)復(fù)合物，其包含生長因子結(jié)合蛋白和玻連蛋白。特別地，本專利技術(shù)涉及一種分離的蛋白質(zhì)復(fù)合物，其包含一種胰島素樣生長因子、胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白和玻連蛋白。本專利技術(shù)還提供了生長因子復(fù)合物，其包含促進或增強生長因子復(fù)合物形成的不同生長因子和/或生長因子結(jié)合蛋白。本專利技術(shù)還提供了調(diào)節(jié)細胞增殖和/或遷移的方法，以進行創(chuàng)傷修復(fù)，皮膚修復(fù)，化妝用皮膚護理和組織修復(fù)治療。相反，通過破壞蛋白質(zhì)復(fù)合物在體內(nèi)形成，可抑制生長因子驅(qū)動的細胞增殖和/或遷移，以例如治療癌癥，牛皮癬，動脈硬化和有疤痕過度生長傾向的創(chuàng)傷。這些治療也許具有醫(yī)學(xué)和獸醫(yī)學(xué)應(yīng)用價值。
技術(shù)介紹
皮膚的生長，修復(fù)和愈合是一個復(fù)雜的生物控制機制，其通過陽性和陰性信號起作用。這種信號在控制細胞增殖，分化和遷移水平起作用，并典型地由生長因子多肽介導(dǎo)。在此方面，重要的生長因子包括表皮生長因子(EGF)和胰島素樣生長因子(IGF-I和-II)。已經(jīng)報道人IGF-I發(fā)揮廣泛的生物學(xué)活性，包括刺激細胞增殖，分化和遷移，保護蛋白質(zhì)免于降解和細胞程序死亡，以及調(diào)節(jié)內(nèi)分泌因子如生長激素。IGF-II與IGF-I具有相似性質(zhì)，但表現(xiàn)為與癌發(fā)生及胎兒與胚胎發(fā)育更相關(guān)，IGF-I在出生以后的發(fā)育中具有更大的作用。IGF-I和IGF-II均通過與I型IGF受體(IGFR)結(jié)合而發(fā)揮作用。這種相互作用所需的IGF的可利用性由胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白(IGFBP 1-6)調(diào)節(jié)。IGFBP已知可陽性和陰性調(diào)節(jié)IGF功能，以及呈現(xiàn)IGF-非依賴性活性。IGF途徑的另一種功能成分是II型IGFR，其還已知是陽離子非依賴性6_磷酸甘露糖受體(CI-MPR)。II型IGFR是一種多功能蛋白質(zhì)，其結(jié)合攜帶6-磷酸甘露糖組分的溶酶體酶，以及IGF-II，但還不清楚與IGF-II結(jié)合的功能意義(O’ Dell&Day, 1998，國際生物化學(xué)細胞生物學(xué)雜志 30767; Braulke, 1999，Horm. Metab. Res. 31 242; Nykjaer 等，1998，細胞生物學(xué)雜志141 815)。也已經(jīng)報道IGF結(jié)合另一組蛋白質(zhì)，稱為“IGFBP-相關(guān)蛋白質(zhì)”，這一組蛋白質(zhì)呈現(xiàn)結(jié)構(gòu)相似性并包括結(jié)締組織生長因子(CTGF)及由mac25，nOV和cyr61基因編碼的產(chǎn)物。與IGFBP相比，這些物質(zhì)結(jié)合IGF的親和性較低。最近，鑒別出玻連蛋白(VN)是一種胞外基質(zhì)蛋白，結(jié)構(gòu)與IGFBP和IGFBP-相關(guān)蛋白不相關(guān)，其結(jié)合IGF-II但不結(jié)合IGF-I (Upton等，1999，內(nèi)分泌學(xué)1402928)。玻連蛋白是一種75kD糖基化胞外基質(zhì)蛋白，其也在血液中發(fā)現(xiàn)，并與癌癥，骨疾病和病理失調(diào)包括血管發(fā)生相關(guān)聯(lián)(參見Schvartz等，1999，生物化學(xué)細胞生物學(xué)雜志31539)。玻連蛋白在如血管發(fā)生和致瘤發(fā)生等病癥中的作用，至少部分源于玻連蛋白結(jié)合整聯(lián)蛋白及與尿激酶纖溶酶原激活物系統(tǒng)成分(例如PAI-l，uPAR，纖溶酶原)相互作用的能力，從而促進細胞增殖，粘著，擴散和遷移。玻連蛋白更特異性參與應(yīng)答藥物治療而防止致瘤細胞程序死亡(Uhm等，1999，癌癥臨床研究5 1587)。玻連蛋白表現(xiàn)為在循環(huán)中是IGF-II的載體(McMurtry等，1996，內(nèi)分泌學(xué)雜志150 149)。專利技術(shù)目的本專利技術(shù)人令人驚奇地揭示了 IGFBP能結(jié)合玻連蛋白，而且當IGF-I與IGFBP結(jié)合時，其可以結(jié)合玻連蛋白。因此本專利技術(shù)的一個目的是提供一種分離的含有IGFBP和玻連蛋白的復(fù)合物。專利技術(shù)概述第一方面，本專利技術(shù)提供了一種分離的多肽復(fù)合物，其包含一種生長因子結(jié)合蛋白和玻連蛋白。優(yōu)選地，所述分離的多肽復(fù)合物還包含一種生長因子。一種優(yōu)選的生長因子是胰島素樣生長因子-I (IGF-I)。其它生長因子包括表皮生長因子(EGF)，成纖維細胞生長因子(FGF)，堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)，骨橋蛋白，血小板反應(yīng)蛋白-1，腱生蛋白-C，PAI-1，纖溶酶原，纖維蛋白原，纖維蛋白和運鐵蛋白。一種優(yōu)選的生長因子結(jié)合蛋白是選自IGFBPl, IGFBP2, IGFBP3, IGFBP4, IGFBP5和IGFBP6的一種胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白。一種更優(yōu)選的胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白是IGFBP2，IGFBP3, IGFBP4或IGFBP5。一種最優(yōu)選的胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白是IGFBP3或IGFBP5。 第二方面，本專利技術(shù)提供了一種分離的蛋白質(zhì)復(fù)合物，其包含一種IGFBP-相關(guān)蛋白和玻連蛋白。優(yōu)選地，所述分離的蛋白質(zhì)復(fù)合物還包含一種生長因子，優(yōu)選IGF-I。在一個實施方案中，IGFBP-相關(guān)蛋白選自結(jié)締組織生長因子(CTGF)，由mac25基因編碼的多肽，由nov基因編碼的多肽和由cyr61基因編碼的多肽。第三方面，本專利技術(shù)提供了一種分離的蛋白質(zhì)復(fù)合物，其包含玻連蛋白，一種變體生長因子(a variant growth factor)和/或一種變體生長因子結(jié)合蛋白。在一個實施方案中，這方面的分離的蛋白質(zhì)復(fù)合物包含玻連蛋白和一種工程化包含肝素結(jié)合結(jié)構(gòu)域(HBD)的變體生長因子。在另一個實施方案中，這方面的分離的蛋白質(zhì)復(fù)合物包含玻連蛋白和一種非糖基化生長因子結(jié)合蛋白。在另一個實施方案中，這方面的分離的蛋白質(zhì)復(fù)合物包含玻連蛋白和選自des (1-6) IGF-II 和 des (1-3) IGF-I 的一種變體生長因子。第一、第二和第三方面還涵蓋了本專利技術(shù)的分離的蛋白質(zhì)復(fù)合物另外可以包括一種酸不穩(wěn)定亞單位，這是能與IGFBP復(fù)合的一種多肽，后文稱為ALS。根據(jù)第一，第二和第三方面，本專利技術(shù)還涵蓋了分離的蛋白質(zhì)復(fù)合物，其包含變體生長因子和其生物活性片段，生長因子結(jié)合蛋白，IGFBP-相關(guān)的蛋白質(zhì)和玻連蛋白，本專利技術(shù)還涵蓋了這種復(fù)合物的應(yīng)用。生物活性片段和變異體包括所述生長因子的類似物，突變體，興奮劑和拮抗劑，生長因子結(jié)合蛋白，IGFBP-相關(guān)的蛋白質(zhì)和玻連蛋白。第四方面，本專利技術(shù)提供了一種藥物組合物，其包含本專利技術(shù)第一，第二和第三方面的一或多種分離的蛋白質(zhì)復(fù)合物，和一種藥物適當?shù)妮d體或稀釋劑。第五方面，本專利技術(shù)提供了一種藥物組合物，其包含一種表達構(gòu)建體和一種可藥用載體或稀釋劑，所述表達構(gòu)建體包含編碼本專利技術(shù)第一，第二和第三方面的分離的蛋白質(zhì)復(fù)合物的一或多種核酸。第六方面，本專利技術(shù)提供了一種能表達重組的本專利技術(shù)第一，第二和第三方面的蛋白質(zhì)復(fù)合物或能形成所述復(fù)合物的重組蛋白的轉(zhuǎn)化細胞。第七方面，本專利技術(shù)提供了一種調(diào)節(jié)細胞增殖和/或遷移的方法，包括給予動物或其分離的細胞本專利技術(shù)第一，第二和第三方面的一種分離的蛋白質(zhì)復(fù)合物的步驟。優(yōu)選地，所述分離的蛋白質(zhì)復(fù)合物包含一種IGFBP和玻連蛋白。 優(yōu)選地，所述分離的蛋白質(zhì)復(fù)合物還包含IGF-I。第八方面，本專利技術(shù)提供了一種調(diào)節(jié)細胞增殖和/或遷移的方法，包括給予動物或其分離的細胞一種制劑，其防止或破壞本專利技術(shù)第一，第二和第三方面的一種分離的蛋白質(zhì)復(fù)合物的形成的步驟。優(yōu)選地，所述制劑防止或破壞IGFBP和玻連蛋白之間的相互作用。更優(yōu)選地，所述制劑防止或破壞IGFBP和玻連蛋白之間的相互作用，其中所述蛋白質(zhì)復(fù)合物包含IGF-I。所述制劑例如可以是IGFBP和玻連蛋白之間或IGFBP相關(guān)蛋白和玻連蛋白本文檔來自技高網(wǎng)...
【技術(shù)保護點】
分離的蛋白質(zhì)復(fù)合物，其包含生長因子結(jié)合蛋白和玻連蛋白。
【技術(shù)特征摘要】
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【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：齊·厄普頓，珍妮弗·安·克里克爾，
申請(專利權(quán))人：昆士蘭技術(shù)大學(xué)，
類型：發(fā)明
國別省市：
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