【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
本專(zhuān)利技術(shù)涉及發(fā)酵豆柏中乳酸含量的測(cè)定方法。
技術(shù)介紹
目前，豆柏多用乳酸菌進(jìn)行發(fā)酵，因而發(fā)酵豆柏中含有大量的乳酸，同時(shí)含有少量的丙酸、丁酸等。常用的乳酸的測(cè)定方法主要有兩種中和滴定法和高效液相色譜法。研究發(fā)現(xiàn)，中和滴定法所測(cè)結(jié)果誤差較大，滴定的結(jié)果反映的是總酸的含量，不準(zhǔn)確；高效液相法雖然可以定性和定量，但是發(fā)·酵豆柏成分復(fù)雜，含有蛋白質(zhì)、寡糖、小肽、有機(jī)酸、異黃酮等，導(dǎo)致利用高效液相測(cè)定乳酸時(shí)，雜峰干擾大、主峰分離效果不夠理想，發(fā)酵豆柏中乳酸含量難以精確測(cè)定。目前尚未有報(bào)道發(fā)酵豆柏中乳酸含量的測(cè)定方法。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
為了解決上述的技術(shù)問(wèn)題，本專(zhuān)利技術(shù)的目的是提供一種發(fā)酵豆柏中乳酸的測(cè)定方法，該方法通過(guò)特定方式對(duì)樣品進(jìn)行預(yù)處理、采用合適的流動(dòng)相避免雜質(zhì)干擾，將發(fā)酵豆柏中乳酸含量精確測(cè)量出來(lái)。為了實(shí)現(xiàn)上述的目的，本專(zhuān)利技術(shù)采用了以下的技術(shù)方案 一種發(fā)酵豆柏中乳酸的測(cè)定方法，其特征在于該方法包括以下的步驟 O樣品預(yù)處理 準(zhǔn)確稱(chēng)取粉碎過(guò)篩的發(fā)酵豆柏5. 0000 g，置于100 mL容量瓶中，加入80%體積百分比濃度的乙醇溶液定容至100ml，超聲波50°C提取30 min，冷卻至室溫，樣品液用高速冷凍離心機(jī)離心，轉(zhuǎn)速12000rpm，4°C離心lOmin，上清液過(guò)O. 45um濾膜，濾液作為試樣溶液備用； 2)色譜條件 色譜儀=AgilentllOO高效液相色譜儀，UV213nm檢測(cè)器； 色譜柱Walts sunf ire C18,4.6X250 nm, 5 μ m ； 柱溫35°C ； 流動(dòng)相甲醇O. 01%體積百分比濃度的鹽酸溶液=5:...
【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
一種發(fā)酵豆粕中乳酸的測(cè)定方法，其特征在于該方法包括以下的步驟：1）?樣品預(yù)處理準(zhǔn)確稱(chēng)取粉碎過(guò)篩的發(fā)酵豆粕5.0000?g，置于100?mL容量瓶中，加入80%體積百分比濃度的乙醇溶液定容至100ml，超聲波50℃提取30?min，冷卻至室溫，樣品液用高速冷凍離心機(jī)離心，轉(zhuǎn)速12000rpm，4℃離心10min，上清液過(guò)0.45um濾膜，濾液作為試樣溶液備用；2）色譜條件色譜儀：Agilent1100高效液相色譜儀，UV213nm檢測(cè)器；色譜柱：Walts?sunfire?C18，4.6×250?nm，5?μm；柱溫：35℃；流動(dòng)相：甲醇:?0.01%體積百分比濃度的鹽酸溶液=5:95，比例為體積比；流速：1.0?mL/min；進(jìn)樣量：20?μL；3）校準(zhǔn)曲線的制備分別取乳酸標(biāo)準(zhǔn)液5ul、10ul、15ul、20ul、25ul，相當(dāng)于各乳酸含量25ug、50ug、75ug、100ug、125ug注入液相色譜儀，進(jìn)行高效液相色譜分析，測(cè)定色譜峰面積或峰高，以標(biāo)準(zhǔn)乳酸質(zhì)量對(duì)相應(yīng)的峰面積或峰高作標(biāo)準(zhǔn)曲線，或用最小二乘法求回歸方程；4）?樣品測(cè)定在相同的色譜分析條件下，取20ul步驟1）制備的試...
【技術(shù)特征摘要】
1.一種發(fā)酵豆柏中乳酸的測(cè)定方法，其特征在于該方法包括以下的步驟 1)樣品預(yù)處理 準(zhǔn)確稱(chēng)取粉碎過(guò)篩的發(fā)酵豆柏5. OOOO g，置于100 mL容量瓶中，加入80%體積百分比濃度的乙醇溶液定容至100ml，超聲波50°C提取30 min，冷卻至室溫，樣品液用高速冷凍離心機(jī)離心，轉(zhuǎn)速12000rpm，4°C離心lOmin，上清液過(guò)O. 45um濾膜，濾液作為試樣溶液備用； 2)色譜條件 色譜儀=AgilentllOO高效液相色譜儀，UV213nm檢測(cè)器；色譜柱Walts sunf ire C18,4. 6 X 250 nm, 5 μ m ； 柱溫35°C ； 流動(dòng)相甲醇O. 01%體積百分比濃...
【專(zhuān)利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：鐘學(xué)敏，羅富源，張健，龔音，
申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人：浙江德清博誠(chéng)生物科技有限公司，
類(lèi)型：發(fā)明
國(guó)別省市：
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