用于治療性結合物的短且含D氨基酸的多肽及其使用制造技術

本發明專利技術涉及具有一個或多個D氨基酸（作為靶向部分）的短多肽（例如，在長度上，少于19個氨基酸）和較長多肽（例如，在長度上，具有19個或更多氨基酸）。當結合至試劑（例如，治療劑或運輸載體）時，這些多肽可將試劑運過BBB或運至特定細胞類型。具體地，短多肽可包括一個或多個D氨基酸。因此，這些化合物可特別用于治療神經系統疾病或與特定細胞類型、器官或組織相關的疾病。

【技術實現步驟摘要】
【國外來華專利技術】
本專利技術涉及(部分地)可用作靶向部分的短多肽。本專利技術還涉及包含連至治療劑或運輸載體的靶向部分的結合物及其使用。
技術介紹
大腦可通過兩種屏障系統屏蔽潛在的有毒物質:血-腦屏障(BBB)和血-腦脊液屏障(BCSFB)。由于BBB表面積比BCSFB表面積大了約5000倍，所以BBB被視為是吸收血清配體的主要途徑。大腦內皮(構成BBB)是針對許多中樞神經系統(CNS)疾病使用潛在藥物的主要障礙。一般規則而言，僅小的親脂性分子可通過BBB，即從循環系統的血液到大腦。雖然具有較大尺寸或較高疏水性的許多藥物針對治療CNS疾病在動物研究中顯示出可喜成果，但是其通常不能穿過(跨越)BBB。因此，由于大腦毛細血管內皮壁對這些藥物的可忽略不計的滲透性，肽和蛋白質的治療通常在血至大腦的運輸之外。由于其他的有效治療劑不能穿過BBB，通常會削弱大腦疾病的治療。因此，需要將試劑運輸至大腦的新策略。
技術實現思路
現在我們已開發出具有增強療效的能夠穿過血-腦屏障(BBB)或能夠進入特定細胞類型(例如，肝臟、眼睛、肺、腎、脾、肌肉或卵巢)的短多肽(即，在長度上，少于19個氨基酸)。我們還開發出具有一個或多個D氨基酸(例如，3D-An2或其片段)的短的(S卩，在長度上，6至18個氨基酸)和較長的(例如，在長度上，19或更多個氨基酸)多肽。這些多肽可用作靶向部分。當這些靶向部分與一個或多個試劑或運輸載體相連(例如，結合到其上)時，穿過BBB或進入特定細胞類型的運輸效率也同樣地增強。因此，本專利技術的特征在于可選擇地與一個或多個試劑(例如，一個或多個治療劑)或運輸載體(例如，納米顆粒或脂質體)結合的靶向部分，以及這些化合物在治療和診斷疾病中的使用。在第一個方面，本專利技術的特征在于純化的多肽，或其藥學上可接受的鹽，包括氨基酸序列 Lys-Arg-X3-X4-X5-Lys (式 Ia)，其中 X3 為 Asn 或 Gln ；X4 為 Asn 或 Gln,且 X5 為Phe、Tyr或Trp ;其中在長度上，所述多肽為少于200個氨基酸(例如，少于150、100、75、50、45、40、35、30、25、20、19、18、17、16、15、14、12、10、11、8 或 7 個氨基酸，或這些數值之間的任何范圍)；其中所述多肽可選擇地包括式Ia所述氨基酸的一個或多個D異構體(例如，Lys,Arg、X3、X4、X5或Lys的D異構體)；且其中所述多肽不為表2所示的多肽。在第二個方面，本專利技術的特征在于純化的多肽，或其藥學上可接受的鹽，包括氨基酸序列 Lys-Arg-X3-X4-X5-Lys (式 Ia)，其中 X3 為 Asn 或 Gln ；X4 為 Asn 或 Gln,且 X5 為Phe、Tyr或Trp ;其中在長度上，所述多肽少于19個氨基酸(例如，少于18、17、16、15、14、12、10、11、8或7個氨基酸，或這些數值之間的任何范圍)；并且其中所述多肽可選擇地包括式Ia所述氨基酸的一個或多個D異構體(例如，Lys, Arg、X3、X4、X5或Lys的D異構體)。在上述的任一多肽中，可以由氨基酸序列Lys-Arg-X3-X4-X5_Lys進行1、2、3、4或5個氨基酸(例如，I至3個氨基酸)的添加或缺失。在第一和第二方面的一些實施方式中，所述的氨基酸序列為Zl-Lys-Arg-X3-X4-X5-Lys-Z2 (式 Ib)，其中 X3 為 Asn 或 Gln ；X4 為 Asn 或 Gln ；X5 為Phe、Tyr 或 Trp ；Z1 不存在，或為 Cys、Gly、Cys-Gly、Arg-Gly、Cys-Arg-Gly、Ser-Arg-Gly、Cys-Ser-Arg-Glyλ Gly-Ser_Arg_Gly、Cys-Gly-Ser-Arg-Gly、Gly-Gly-Ser-Arg-GlyΛCys-Gly-Gly-Ser-Arg-Glyλ Tyr-Gly-Gly-Ser-Arg-GlCys-Tyr-Gly-Gly-Ser-Arg-Gly、Phe-Tyr-Gly-Gly-Ser-Arg-Gly、 Cys-Phe-Tyr-Gly-Gly-Ser-Arg-Gly、Phe-Phe-Tyr-Gly-Gly-Ser-Arg-GlyλCys-Phe-Phe-Tyr-Gly-Gly-Ser-Arg-Gly、Thr-Phe-Phe-Tyr-Gly-Gly-Ser-Arg-Gly,或 Cys-Thr-Phe-Phe-Tyr-Gly-Gly-Ser-Arg-Gly ;且 Z2 不存在，或為 Cys、Tyrλ Tyr-Cys、Cys-TyrΛ Thr-Glu-Glu-Tyr,或 Thr-Glu-Glu-Tyr-Cys ;且其中所述多肽可選擇地包含式Ib、Zl或Z2所述氨基酸的一個或多個D異構體。在第一和第二方面的其他實施方式中，所述多肽具有一個或多個額外的Cys殘基(在多肽的N末端、多肽的C末端，或兩者上)。在其他實施方式中，所述多肽具有一個或多個額外的Tyr殘基(在多肽的N末端、多肽的C末端，或兩者上)。在又另外的實施方式中，所述多肽具有氨基酸序列Tyr-Cys和/或Cys-Tyr (在多肽的N末端、多肽的C末端或兩者上)。在第一和第二方面的某些實施方式中，所述氨基酸序列為Lys-Arg-Asn-Asn-Phe-Lys。在其他實施方式中，所述氨基酸序列為Lys-Arg-Asn-Asn-Phe-Lys-Tyr。在又其他實施方式中，所述氨基酸序列為Lys-Arg-Asn-Asn-Phe-Lys-Tyr-Cys0在第一和第二方面的特定實施方式中，所述氨基酸序列為Xl-X2-Asn-Asn-X5-X6(式 Ila)，其中 Xl 為 Lys 或 D-Lys ;X2 為 Arg 或 D-Arg ；X5 為 Phe 或 D-Phe ;且父6 為 Lys 或D-Lys ;且其中X1、X2、X5*X6中至少一個(例如，至少兩個、三個或四個)為D-氨基酸。在第一和第二方 面的其他實施方式中，所述的氨基酸序列為Xl-X2-Asn-Asn-X5-X6-X7(式 IIb)，其中 Xl 為 Lys 或 D-Lys ；X2 為 Arg 或 D-Arg ；X5 為 Phe或 D-Phe ；X6 為 Lys 或 D-Lys ;且乂7 為 Tyr 或 D-Tyr ;且其中 X1、X2、X5、X6 或 X7 中至少一個(例如，至少兩個、三個、四個或五個)為D-氨基酸。在第一和第二方面的一些實施方式中，所述氨基酸序列為Zl-Lys-Arg-X3-X4-X5-Lys-Z2 (式 He),其中 X3 為 Asn 或 Gln ；X4 為 Asn 或 Gln ；X5 為Phe、Tyr 或 Tip ；Z1 不存在，或為 Cys、Gly、Cys-Gly、Arg-Gly、Cys-Arg-Gly、Ser-Arg-Gly、Cys-Ser-Arg-Glyλ Gly-Ser_Arg_Gly、Cys-Gly-Ser-Arg-Gly、Gly-Gly-Ser-Arg-Gly、Cys-Gly-Gly-Ser-Arg-Glyλ Tyr-Gly-Gly-Ser_Arg_Gly、Cys-Tyr-Gly-Gly-Ser-Arg-GlyΛPhe本文檔來自技高網...

【技術保護點】

【技術特征摘要】
【國外來華專利技術】2010.07.02 US 61/361,305;2011.06.07 US 61/494,368;1.一種包含Lys-Arg-X3-X4-X5-Lys (式Ia)氨基酸序列的純化的多肽，或其藥學上可接受的鹽， 其中:X3為Asn或Gln ； X4為Asn或Gln ;且 X5 為 Phe, Tyr 或 Trp ； 其中所述多肽的長度少于50個氨基酸； 其中所述多肽可選擇地包含式Ia所述氨基酸的一個或多個D異構體；以及 其中所述多肽不為表2中的肽。2.一種包含Lys-Arg-X3-X4-X5-Lys (式Ia)氨基酸序列的純化的多肽，或其藥學上可接受的鹽， 其中:X3為Asn或Gln ； X4為Asn或Gln ;且 X5 為 Phe, Tyr 或 Trp ； 其中所述多肽的長度少于19個氨基酸；且 其中所述多肽可選擇地包含式Ia所述氨基酸的一個或多個D異構體。3.根據權利要求1至2中任一項所述的多肽，其中所述氨基酸序列為Zl-Lys-Arg-X3-X4-X5-Lys-Z2 (式 Ib)， 其中:X3為Asn或G ln;X4 為 Asn 或 Gln ；X5 為 Phe, Tyr 或 Trp ； Zl 不存在，或為 Cys、Gly、Cys-Gly、Arg-Gly、Cys-Arg-Gly> Ser-Arg-Gly>Cys-Ser-Arg-Gly> Gly-Ser-Arg-Gly> Cys-Gly-Ser-Arg-Gly、Gly-Gly-Ser-Arg-Gly、Cys-Gly-Gly-Ser-Arg-Gly> Tyr-Gly-Gly-Ser-Arg-Gly> Cys-Tyr-Gly-Gly-Ser-Arg-Gly>Phe-Tyr-Gly-Gly-Ser-Arg-Gly、 Cys-Phe-Tyr-Gly-Gly-Ser-Arg-Gly、Phe-Phe-Tyr-Gly-Gly-Ser-Arg-Gly>Cys-Phe-Phe-Tyr-Gly-Gly-Ser-Arg-Gly、Thr-Phe-Phe-Tyr-Gly-Gly-Ser-Arg-Gly 或 Cys-Thr-Phe-Phe-Tyr-Gly-Gly-Ser-Arg-Gly ;且 Z2 不存在，或為 Cys、Tyr> Tyr-Cys> Cys-Tyr> Thr-Glu-Glu-Tyr 或Thr-Glu-Glu-Tyr-Cys ；以及 其中所述多肽可選擇地包含式Ib、Zl或Z2所述氨基酸的一個或多個D異構體。4.根據權利要求1至2中任一項所述的多肽，其中所述氨基酸序列為Lys-Arg-Asn-Asn-Phe-Lys。5.根據權利要求1至2中任一項所述的多肽，其中所述氨基酸序列為Lys-Arg-Asn-Asn-Phe-Lys-Tyr06.根據權利要求1至2中任一項所述的多肽，其中所述氨基酸序列為Xl-X2-Asn-Asn-X5-X6 (式 Ila)， 其中:X1為Lys或D-Lys ；X2 為 Arg 或 D-Arg ；X5 為 Phe 或 D-Phe ;且X6 為 Lys 或 D-Lys ;且其中X1、X2、X5或X6中的至少一個為D氨基酸。7.根據權利要求1至2中任一項所述的多肽，其中所述氨基酸序列為Xl-X2-Asn-Asn-X5-X6-X7 (式 Ilb)， 其中:X1為Lys或D-Lys ;X2 為 Arg 或 D-Arg ；X5 為 Phe 或 D-Phe ；X6 為 Lys 或 D-Lys ;且X7 為 Tyr 或 D-Tyr ;且 其中X1、X2、X5、X6或X7中的至少一個為D氨基酸。8.根據權利要求1至2中任一項所述的多肽，其中所述氨基酸序列為Zl-Xl-X2-Asn-Asn-X5-X6-X7-Z2 (式 He)， 其中:X1為Lys或D-Lys ;X2 為 Arg 或 D-Arg ；X5 為 Phe 或 D-Phe ；X6 為 Lys 或 D-Lys ；X7 為 Tyr 或 D-Tyr ； Zl 不存在，或為 Cys、Gly、Cys-Gly、Arg-Gly、Cys-Arg-Gly^ Ser-Arg-Gly^Cys-Ser-Arg-Gly^ Gly-Ser-Arg-Gly^ Cys-Gly-Ser-Arg-Gly^ Gly-Gly-Ser-Arg-Gly^Cys-Gly-Gly-Ser-Arg-Gly^ Tyr-Gly-Gly-Ser-Arg-Gly^ Cys-Tyr-Gly-Gly-Ser-Arg-Gly^Phe-Tyr-Gly-Gly-Ser-Arg-Gly、 Cys-Phe-Tyr-Gly-Gly-Ser-Arg-Gly、Phe-Phe-Tyr-Gly-Gly-Ser-Arg-Gly、Cys-Phe-Phe-Tyr-Gly-Gly-Ser-Arg-Gly^Thr-Phe-Phe-Tyr-Gly-Gly-Ser-Arg-Gly 或 Cys-Thr-Phe-Phe-Tyr-Gly-Gly-Ser-Arg-Gly ;且 Z2 不存在，或為 Cys、Tyr、Tyr-Cys、Cys-Tyr、Thr-Glu-Glu-Tyr 或Thr-Glu-Glu-Tyr-Cys ； 其中X1、X2、X5、X6或X7中的至少一個為D-氨基酸；且 其中所述多肽可選擇地包含Zl或Z2所述氨基酸的一個或多個D異構體。9.根據權利要求1至8中任一項所述的多肽，其中所述多肽的長度少于15個氨基酸。10.根據權利要求1至8中任一項所述的多肽，其中所述多肽的長度少于10個氨基酸。11.根據權利I至2中任一項所述的多肽，其中所述多肽選自由以下組成的組:Thr-Phe-Phe-Tyr-Gly-Gly-Ser-D-Arg-Gly-D-Lys-D-Arg-Asn-Asn-Phe-Lys-Thr-Glu-Glu-Tyr (3D_An2) ；Phe-Tyr-Gly-Gly-Ser-Arg-Gly-Lys-Arg-Asn-Asn-Phe-Lys-Thr-Glu-Glu-Tyr-Cys (Pl) ；Phe-Tyr-Gly-Gly-Ser-Arg-Gly-D-Lys-D-Arg-Asn-Asn-D-Phe-Lys-Thr-Glu-Glu-Tyr-Cys (Pla) ；Phe-Tyr-Gly-Gly-Ser-Arg-Gly-D-Lys-D-Arg-Asn-Asn-D-Phe-D-Lys-Thr-Glu-Glu-Tyr-Cys (Plb) ；Phe-Tyr-Gly-Gly-Ser-Arg-Gly-D-Lys-D-Arg-Asn-Asn-D-Phe-D-Lys-Thr-Glu-Glu-D-Tyr-Cys (Plc) ；D-Phe-D-Tyr-Gly-Gly-Ser-D-Arg-Gly-D-Lys-D-Arg-Asn-Asn-D-Phe-D-Lys-Thr-Glu-D-Glu-D-Tyr-Cys (Pld) ；Gly-Gly-Ser-Arg-Gly-Lys-Arg-Asn-Asn-Phe-Lys-Thr-Glu-Glu-Tyr-Cys (P2) ；Ser-Arg-Gly-Lys-Arg-Asn-Asn-Phe-Lys-Thr-Glu-Glu-Tyr-Cys (P3) ；Gly-Lys-Arg-Asn-Asn-Phe-Lys-Thr-Glu-Glu-Tyr-Cys (P4) ；Lys-Arg-Asn-Asn-Phe-Lys-Thr-Glu-Glu-Tyr-Cys (P5) ；D~Lys-D-Arg-Asn-Asn-D-Phe-Lys-Thr-Glu-Glu-Tyr-Cys (P5a) ；D-Lys-D-Arg-Asn-Asn-D-Phe-D-Lys-Thr-Glu-Glu-Tyr-Cys (P5b) ；D-Lys-D-Arg-Asn-Asn-D-Phe-D-Lys-Thr-Glu-Glu-D-Tyr-Cys(P5c) ；Lys-Arg-Asn-Asn-Phe-Lys-Tyr-Cys (P6) ；D-Lys-D-Arg-Asn-Asn-D-Phe-Lys-Tyr-Cys (P6a) ；D-Lys-D-Arg-Asn-Asn-D-Phe-D-Lys-Tyr-Cys (P6b)；以及 D-Lys-D-Arg-Asn-Asn-D-Phe-D-Lys-D-Tyr-Cys (P6c);或其片段。12.根據權利要求1至2中任一項所述的多肽，其中所述多肽包含具有與選自以下組成的組中的一個或多個序列相關的氨基酸的O至5個取代、缺失或添加的序列Ahr-Phe-Phe-Tyr-Gly-Gly-Ser-D-Arg-Gly-D-Lys-D-Arg-Asn-Asn-Phe-LyS-Thr-Glu-Glu-Tyr(3D_An2) ；Phe-Tyr-Gly-Gly-Ser-Arg-Gly-Lys-Arg-Asn-Asn-Phe-Lys-Thr-Glu-Glu-Tyr-Cys (Pl)；Phe-Tyr-Gly-Gly-Ser-Arg-Gly-D-Lys-D-Arg-Asn-Asn-D-Phe-Lys-Thr-Glu-GIu-Tyr-Cys (Pla) ；Phe-Tyr-Gly-Gly-Ser-Arg-Gly-D-Lys-D-Arg-Asn-Asn-D-Phe-D-Lys-Thr-Glu-Glu-Tyr-Cys (Plb) ；Phe-Tyr-Gly-Gly-Ser-Arg-Gly-D-Lys-D-Arg-Asn-Asn-D-Phe-D-Lys-Thr-Glu-Glu-D-Tyr-Cys (Plc) ；D-Phe-D-Tyr-Gly-Gly-Ser-D-Arg-Gly-D-Lys-D-Arg-Asn-Asn-D-Phe-D-Lys-Thr-Glu-D-Glu-D-Tyr-Cys (Pld)；Gly-Gly-Ser-Arg-Gly-Lys-Arg-Asn-Asn-Phe-Lys-Thr-Glu-Glu-Tyr-Cys (P2) ；Ser-Arg-Gly-Lys-Arg-Asn-Asn-Phe-Lys-Thr-Glu-Glu-Tyr-Cys (P3) ；Gly-Lys-Arg-Asn-Asn-Phe-Lys-Thr-Glu-Glu-Tyr-Cys (P4) ；Lys-Arg-Asn-Asn-Phe-Lys-Thr-Glu-Glu-Tyr-Cys (P5) ；D-Lys-D-Arg-Asn-Asn-D-Phe-Lys-Thr-Glu-Glu-Tyr-Cys (P5a) ；D-Lys-D-Arg-Asn-Asn-D-Phe-D-Lys-Thr-Glu-Glu-Tyr-Cys (P5b) ；D-Lys-D-Arg-Asn-Asn-D-Phe-D-Lys-Thr-Glu-Glu-D-Tyr-Cys(P5c) ；Lys-Arg-Asn-Asn-Phe-Lys-Tyr-Cys (P6) ；D-Lys-D-Arg-Asn-Asn-D-Phe-Lys-Tyr-Cys (P6a) ；D-Lys-D-Arg-Asn-Asn-D-Phe-D-Lys-Tyr-Cys (P6b)；以及 D-Lys-D-Arg-Asn-Asn-D-Phe-D-Ly s-D-Tyr-Cy s (P6c);或其片段。13.根據權利要求1至2中任一項所述的多肽，其中所述多肽選自由以下組成的組:Phe-Tyr-Gly-Gly-Ser-Arg-Gly-Ly s-Ar g-Asn-Asn-Phe-Ly s-Thr-Glu-Glu ;Gly-Gly_Ser_Arg-Gly-Lys-Arg-Asn-Asn-Phe-Lys-Thr-Glu-Glu ；Ser-Arg-Gly-Lys-Arg-Asn-Asn-Phe-Lys-Thr-Glu-Glu ；Gly-Lys-Arg-Asn-Asn-Phe-Lys-Thr-Glu-Glu ；Lys-Arg-Asn-Asn-Phe-Lys-Thr-Glu-Glu ;以及 Lys- Arg-Asn-Asn-Phe-Lys，或其片段。14.根據權利要求1至2中任一項所述的多肽，其中所述多肽為Thr-Phe-Phe-Tyr-Gly-Gly-Ser-D-Arg-Gly-D-Lys-D-Arg-Asn-Asn-Phe-Lys-Thr-Glu-Glu-Tyr (3D_An2);Phe_Tyr-Gly-Gly-Ser-Arg-Gly-Lys-Arg-Asn-Asn-Phe-Lys-Thr-Glu-Glu-Tyr-Cys (Pl) ;Phe_Tyr-Gly-Gly-Ser-Arg-Gly-D-Lys-D-Arg-Asn-Asn-D-Phe-Lys-Thr-Glu-Glu-Tyr-Cys (Pla)；Phe-Tyr-Gly-Gly-Ser-Arg-Gly-D-Lys-D-Arg-Asn-Asn-D-Phe-D-Lys-Thr-Glu-Glu-Tyr-Cys (Plb)；Phe-Tyr-Gly-Gly-Ser-Arg-Gly-D-Lys-D-Arg-Asn-Asn-D-Phe-D-Lys-Thr-Glu-Glu-D-Tyr-Cys (Plc) ；D-Phe-D-Tyr-Gly-Gly-Ser-D-Arg-Gly-D-Lys-D-Arg-Asn-Asn-D-Phe-D-Lys-Thr-Glu-D-Glu-D-Tyr-Cys (Pld);或其片段。15.根據權利要求14所述的多肽，其中所述片段在Pl，Pla,Plb, Plc或Pld的N末端缺失I至7個氨基酸；在Pl，Pla，Plb, Plc或Pld的C末端缺失I至5個氨基酸；或在P1，Pla, Plb, Plc或Pld的N末端缺失I至7個氨基酸并在Pl，Pla, Plb, Plc或Pld的C末端缺失I至5個氨基酸。16.根據權利要求1至15中任一項所述的多肽，其中所述C末端被酰胺化。17.根據權利要求1至16中任一項所述的多肽，其中所述多肽被有效地運過血腦屏障。18.根據權利要求17所述的多肽，其中與Angiopep-2相比較，所述多肽被更有效地運過血腦屏障。19.一種治療性多肽,包含 由權利要求1至18中任一項的多肽組成的靶向部分和 治療性肽劑，其中將所述靶向部分連至所述治療性肽劑。20.根據權利要求19所述的治療性多肽，其中通過共價鍵將所述靶向部分...

【專利技術屬性】
技術研發人員：讓保羅·卡斯泰恩，米歇爾·德默勒，克里斯蒂安·切，卡里納·蒂奧特，勞倫斯·佩斯爾赫爾布，
申請(專利權)人：安吉奧開米公司，
類型：
國別省市：