囊泡的簡便制備方法及其在藥物緩/控釋中的應用技術

本發明專利技術提供了一種囊泡的簡便制備方法及其在藥物緩/控釋中的應用，屬于生物載體領域，制備過程簡化，制備成本低，并且能夠同時保持較好的藥物緩/控釋能力。本發明專利技術的囊泡的簡便制備方法，包括如下步驟，將兩親脂肽溶解在PBS緩沖液中，靜置，將靜置后的溶液通過注射器擠壓通過濾膜數次，即制得囊泡。采用本發明專利技術的制備方法制備得到的囊泡可通過藥物的包封用于藥物的緩/控釋。

A simple method for preparation of vesicles and its application in slow / controlled release of drugs

The invention provides a simple vesicle preparation method and drug application of slow / controlled release of biological carrier belongs to the field, the preparation process is simplified, low preparation cost, while maintaining a good drug slow / controlled release ability. The invention relates to a simple preparation method of a vesicle, comprising the following steps: dissolving two lipophilic peptides in PBS buffer solution, placing them statically, squeezing the solution after being pressed through a syringe and passing through the filter membrane several times, and then obtaining a vesicle. The vesicles prepared by the method of preparation of the invention can be used for the slow / controlled release of drugs by encapsulating them.

【技術實現步驟摘要】
囊泡的簡便制備方法及其在藥物緩/控釋中的應用
本專利技術涉及生物載體領域，尤其涉及一種囊泡的簡便制備方法及其在藥物緩/控釋中的應用。
技術介紹
囊泡有較強的增溶能力，其雙層膜具有較好的牢固性和穩定性，作為藥物載體給藥途徑較廣，載藥穩定性、藥物增溶量以及藥物生物利用度較高。近十多年來囊泡作為藥物載體已有注射劑、口服懸浮液或乳劑、滴眼液、滴鼻液及外用劑型等許多報道，大多仍處于動物試驗階段，也有一些臨床觀察報告。非離子表面活性劑囊泡是一種有效的藥物輸送載體，它能大大提高藥物療效，降低藥物毒副作用，又能緩慢緩慢釋放藥物，改變藥物的體內動力學，同時還具有靶向性能。目前，有關磁性囊泡的制備主要基于磁性納米顆粒的參雜，這種方法制備相對復雜，而且納米顆粒毒性未知，用于載藥存在潛在風險。現在FDA已經通過的作為藥物載體的囊泡一般都是由脂質體制備，脂質體制備囊泡一般方法較為復雜，需經過有機溶劑溶解、旋蒸成膜、超聲、凍融、擠壓等過程。復雜的過程使得囊泡的制備時間長,成本高,因此,提供一種簡便的囊泡制備方法同時保證囊泡的優異的藥物緩/控釋能力至關重要。
技術實現思路
本專利技術的目的在于提供一種囊泡的簡便制備方法及其在藥物緩/控釋中的應用,制備過程簡化，制備成本低，并且能夠同時保持較好的藥物緩/控釋能力。本專利技術的技術方案是：一種囊泡的簡便制備方法，包括如下步驟，將兩親脂肽溶解在PBS緩沖液中，靜置，將靜置后的溶液通過注射器擠壓通過濾膜數次，即制得囊泡。優選的，所述的兩親脂肽含有極性氨基酸作為頭基且含有長烷基鏈作為尾鏈。其中，所述極性氨基酸為絲氨酸、酪氨酸、蘇氨酸或天冬氨酸；所述長烷基鏈為油酸的烷基鏈。優選的，所述的兩親脂肽為油酸(OA)與絲氨酸(S)分子的化合物，分子式如式1所示，優選的，所述的兩親脂肽為如下化合物，分子是如式2、式3、式4所示：OATT式2；OAYY式3；OADD式4。優選的，將兩親脂肽溶解在PBS緩沖液中，兩親脂肽在PBS緩沖液中的濃度為1-4mg/ml。優選的，靜置的時間為24-48h。優選的，將溶液通過注射器擠壓通過的濾膜孔徑為100nm，經過濾膜反復擠壓40次，即制得囊泡。本專利技術另一方面還提供了上述制備方法制備得到的囊泡及其在藥物緩/控釋中的應用，所述的囊泡通過包封藥物進行藥物的緩/控釋。相比于現有技術，本專利技術的有益效果在于：1、本專利技術的簡便制備方法與傳統方法相比，省去了眾多復雜的步驟，不需要有機溶劑的溶解、旋蒸和凍融等過程就可以制備出尺寸較為均一的囊泡，步驟簡單，制備效率高；2、本專利技術的簡便制備方法能夠快速為藥物提供載體，同時囊泡的藥物緩/控釋能力比脂質體囊泡的緩/控釋能力更好，是潛在的替代脂質體囊泡的一類生物材料。附圖說明圖1為本專利技術實施例1制備的囊泡電鏡照片；圖2為本專利技術實施例1制備的囊泡與脂質體囊泡藥物釋放曲線。具體實施方式下面將對本專利技術實施例中的技術方案進行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實施例僅僅是本專利技術一部分實施例，而不是全部的實施例。基于本專利技術中的實施例，本領域普通技術人員在沒有做出創造性勞動前提下所獲得的所有其他實施例，都屬于本專利技術保護的范圍。本專利技術實施例提供了一種囊泡的簡便制備方法，包括如下步驟，將兩親脂肽溶解在PBS緩沖液中，靜置，將靜置后的溶液通過注射器擠壓通過濾膜數次，即制得囊泡。在上述步驟中，所述的脂肽含有脂質與氨基酸的化合物或復合體并且脂肽分子具有兩親性，兩親脂肽分子溶解在PBS緩沖液即磷酸緩沖鹽溶液中，溶解過程中，難以溶解時可采用超聲處理促進溶解，溶解后通過靜置使其充分組裝成為雙分子膜，然后即可擠囊泡，將靜置后的溶液通過注射器擠壓通過濾膜，經過濾膜反復擠壓數次上述靜置后的自組裝雙分子膜即可形成囊泡，通過控制擠壓的次數可以控制囊泡的尺寸。在本專利技術的一優選實施例中，所述的兩親脂肽含有極性氨基酸作為頭基且含有長烷基鏈作為尾鏈。其中，所述極性氨基酸為絲氨酸、酪氨酸、蘇氨酸或天冬氨酸；所述長烷基鏈為油酸的烷基鏈。作為優選的實施例，所述的兩親脂肽為油酸(OA)與絲氨酸(S)分子的化合物，分子式如式1所示，作為優選的實施例，所述的兩親脂肽為如下化合物，分子是如式2、式3、式4所示：兩親脂肽為油酸(OA)與蘇氨酸(T)的化合物：OATT式2；兩親脂肽為油酸(OA)與酪氨酸(Y)的化合物：OAYY式3；兩親脂肽為油酸(OA)與天冬氨酸(D)的化合物：OADD式4。在本專利技術的一優選實施例中，將兩親脂肽溶解在PBS緩沖液中，兩親脂肽在PBS緩沖液中的濃度為1-4mg/ml，具體的，濃度可以為1mg/ml，1.5mg/ml，2mg/ml，2.5mg/ml，3mg/ml，3.5mg/ml，4mg/ml。兩親脂肽PBS緩沖液中濃度低時形成的囊泡較小，作為最優選的實施例，濃度在4mg/ml時形成的囊泡數量多，大小均一。另外可以理解的是溶解過程中，為了促進溶解，可以采取本領域常見的促進溶解的措施，例如機械攪拌、超聲溶解等等。在本專利技術的一優選實施例中，靜置的時間為24-48h。靜置是為了促使兩親脂肽分子自組裝形成雙分子膜，靜置時間過短，雙分子膜形成不完全，靜置時間過長不利于雙分子膜形成囊泡。在本專利技術的一優選實施例中，將溶液通過注射器擠壓通過的濾膜孔徑為100nm，經過濾膜反復擠壓40次，即制得囊泡。可以理解的是，溶液也可通過其他孔徑的濾膜進行擠壓得到囊泡。在擠壓的次數上，次數少形成的囊泡數量少囊泡較大，擠壓次數多形成的囊泡數量多但是囊泡直徑比較小，具體的擠壓次數可以根據囊泡數量和囊泡直徑的需要進行調整。本專利技術一實施例還提供了上述簡便制備方法制備得到的囊泡及其在藥物緩/控釋中的應用。上述簡便制備方法能夠在簡化步驟的前提下，高效率低成本的制備囊泡，同時保證囊泡的高緩/控釋能力。為了更清楚詳細地介紹本專利技術實施例所提供的囊泡的簡便制備方法及其在藥物緩/控釋中的應用方法，以下將結合具體實施例進行說明。實施例1囊泡制備：首先稱取4mgOASS粉末溶于1mLPBS緩沖液中，超聲20分鐘使其充分溶解，將溶液靜置24-48h，使其自組裝形成雙分子膜；；使用注射器將靜置后的溶液擠壓通過100nm孔徑濾膜，溶液通過40次左右，可基本形成大量囊泡。(1)、囊泡低溫透射電子顯微鏡照片：Cryo-TEM測定方法為：采用低溫投射電子顯微鏡對溶液的形貌進行觀察，樣品的制備是在一個環境控制系統內(CEVS)，溫度為25℃。用鑷子夾住銅網插入到制樣系統內，用移液槍移取約5μL樣品溶液滴到銅網上，通過兩側的濾紙拍打幾秒吸去多余的溶液制得一層薄膜，隨后迅速插入到液氮冷卻的液態乙烷中。冷凍后的樣品儲存在液氮中，通過Gatan626樣品桿(通過液氮冷卻)傳輸到透射電鏡中(JEOLJEM-1400TEMPlus)觀察，操作電壓為120kV。整個操作都在液氮環境中進行。圖像通過GatanmultiscanCCD進行記錄。Cryo-TEM的結果參見圖1，圖1說明形成的囊泡數量多，且粒徑在150～300nm左右。(2)、囊泡藥物包封率：藥物包封方法：將4mgOASS溶于阿霉素(DOX)的pH4.0的PBS緩沖溶液1mL中制備囊泡，然后將pH調至7.4，制成DOX-囊泡溶液。包封率測定：使用紫外法測定藥物包封率，首先繪制藥物分子標準曲線，精確配制濃度分本文檔來自技高網...

【技術保護點】
囊泡的簡便制備方法，其特征在于，包括如下步驟，將兩親脂肽溶解在PBS緩沖液中，靜置，將靜置后的溶液通過注射器擠壓通過濾膜數次，即制得囊泡。

【技術特征摘要】
1.囊泡的簡便制備方法，其特征在于，包括如下步驟，將兩親脂肽溶解在PBS緩沖液中，靜置，將靜置后的溶液通過注射器擠壓通過濾膜數次，即制得囊泡。2.根據權利要求1所述的囊泡的簡便制備方法，其特征在于，所述的兩親脂肽含有極性氨基酸作為頭基且含有長烷基鏈作為尾鏈。3.根據權利要求2所述的囊泡的簡便制備方法，其特征在于，所述極性氨基酸為絲氨酸、酪氨酸、蘇氨酸或天冬氨酸；所述長烷基鏈為油酸的烷基鏈。4.根據權利要求3所述的囊泡的簡便制備方法，其特征在于，所述的兩親脂肽為油酸(OA)與絲氨酸(S)分子的化合物，分子式如式1所示，5.根據權利要求3所述的囊泡的簡便制備方法，其特征在于，所述的兩親脂肽為如下化...

【專利技術屬性】
技術研發人員：王棟，王繼乾，徐海，孫亞偉，曹月影，
申請(專利權)人：中國石油大學華東，
類型：發明
國別省市：山東,37