多肽C2ORF40MPF在制備抗腫瘤藥物中的應用制造技術

本發明專利技術公開了多肽C2ORF40MPF在制備抗腫瘤藥物中的應用；所述多肽C2ORF40MPF的氨基酸序列如SEQ?ID?NO.1所示。本發明專利技術通過對多肽C2ORF40MPF在腫瘤細胞增殖、遷移、侵襲和瘤體形成等方面的生物學功能進行研究。體外實驗表明C2ORF40MPF能夠明顯抑制乳腺癌和肺癌細胞的增殖能力，且對腫瘤細胞遷移和侵襲具有明顯的抑制作用；同時，體內實驗表明C2ORF40MPF在裸鼠異體移植瘤模型中能明顯抑制腫瘤生長。更重要的是，細胞周期實驗表明此多肽可能通過誘導有絲分裂期阻滯來發揮其抗腫瘤作用。

The application of polypeptide C2ORF40MPF in the preparation of antitumor drugs

The present invention discloses a polypeptide C2ORF40MPF application in preparing antitumor drugs; amino acid sequence of the polypeptide C2ORF40MPF as shown in SEQ ID NO.1. The present invention studies the biological functions of polypeptide C2ORF40MPF in tumor cell proliferation, migration, invasion and tumor formation. In vitro experiments indicated that C2ORF40MPF can inhibit the growth of breast cancer and lung cancer cell proliferation, and has obvious inhibitory effect on tumor cell migration and invasion; at the same time, the in vivo experiments showed that C2ORF40MPF could inhibit tumor growth in nude mice xenograft tumor model. Importantly, cell cycle experiments show that this peptide may exert its antitumor effect by inducing mitotic arrest.

【技術實現步驟摘要】
多肽C2ORF40MPF在制備抗腫瘤藥物中的應用
本專利技術涉及生物醫藥
，具體涉及多肽C2ORF40MPF在制備抗腫瘤藥物中的應用。
技術介紹
在中國，每年有超過160萬人被診斷為癌癥，約120萬人因癌癥而死亡。自從上世紀90年代以來，中國的乳腺癌發病率增長速度是全球的兩倍多，城市地區尤為顯著。目前，乳腺癌是中國女性發病率最高的腫瘤，其死亡率在腫瘤性惡性疾病中位居第六，已成為危害人類健康的主要疾病。因此，加強乳腺癌治療的研究，探索新的治療靶點具有非常重要的意義。肺癌可分為小細胞肺癌和非小細胞肺癌，是世界上發病率和死亡率最高的惡性腫瘤之一，由于診斷和治療方面沒有根本的改善，5年生存率沒有明顯的變化，主要原因是肺癌缺乏早期癥狀，發病比較隱匿，確診時已是中晚期，肺癌目前的治療方案主要是放、化療和手術，雖然可增加患者的存活率，但放、化療毒副作用明顯，耐受性差，目前治療的新技術是分子靶向性治療，尋找新的診斷和治療方法仍是肺癌治療的關鍵。多肽類藥物是生物醫藥領域目前最具成長潛力的嶄新領域，其適用于腫瘤、免疫性疾病和傳染性疾病等的預防和治療。近年來生物技術及多肽合成技術不斷進步，多肽藥物具有純度高、毒副作用低且幾乎無免疫原性等優點，已成為研究熱點。同時其合成成本較低，利于規模化生產，具有廣闊的應用前景。目前，已有超過60多種多肽藥物被批準上市，多肽藥物適應癥廣泛且療效明顯，世界范圍內還有大量的多肽藥物已進入或完成臨床研究，未來治療類多肽藥物會有更廣泛的應用前景。C2ORF40MPF為一段含有16個氨基酸的多肽，有研究報道以神經膠質瘤細胞作為實驗對象，上述氨基酸組成的多肽具有促炎作用。但由于不同種類的腫瘤的發病機理、治療靶點和作用機制不同，目前尚未有關于多肽C2ORF40MPF在治療乳腺癌和肺癌中的報道。
技術實現思路
針對上述現有技術，本專利技術的目的提供多肽C2ORF40MPF在制備抗腫瘤藥物中的應用。本專利技術通過對多肽C2ORF40MPF在腫瘤細胞增殖、遷移、侵襲和瘤體形成等方面的生物學功能進行研究。體外實驗表明C2ORF40MPF能夠明顯抑制乳腺癌和肺癌細胞的增殖能力，且對腫瘤細胞遷移和侵襲具有明顯的抑制作用；同時，體內實驗表明C2ORF40MPF在裸鼠異體移植瘤模型中能明顯抑制腫瘤生長。更重要的是，細胞周期實驗表明此多肽可能通過誘導有絲分裂期阻滯來發揮其抗腫瘤作用。由此提出了下述
技術實現思路
：多肽C2ORF40MPF在制備抗腫瘤藥物中的應用；所述多肽C2ORF40MPF的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示。優選的，所述腫瘤為乳腺癌或肺癌。本專利技術還提供了多肽C2ORF40MPF在制備抑制腫瘤細胞增殖、遷移和/或侵襲的藥物中的用途。優選的，所述腫瘤細胞為乳腺癌細胞或肺癌細胞。本專利技術還提供了多肽C2ORF40MPF在制備抑制腫瘤瘤體生長的藥物中的用途優選的，所述腫瘤瘤體為乳腺癌或肺癌瘤體。本專利技術還提供了多肽C2ORF40MPF在制備誘導腫瘤細胞有絲分裂期阻滯的藥物中的用途。優選的，所述誘導腫瘤細胞有絲分裂期阻滯是將細胞周期阻滯在M期。優選的，所述腫瘤細胞為乳腺癌細胞或肺癌細胞。本專利技術的有益效果：本專利技術的多肽C2ORF40MPF為一段模擬抑癌基因C2ORF40作用的具有抑癌作用的多肽，其氨基酸序列來源于人體固有的蛋白質，去除了免疫排除反應的可能性。并且該多肽可以體外合成。本專利技術首次發現，多肽C2ORF40MPF能夠明顯抑制乳腺癌和肺癌細胞的增殖能力，且對腫瘤細胞遷移和侵襲具有明顯的抑制作用，并能通過誘導有絲分裂期阻滯來發揮其抗腫瘤作用。因此，本專利技術所提供的小分子多肽為腫瘤臨床治療提供了新的有效途徑，具有重要的應用前景。附圖說明構成本申請的一部分的說明書附圖用來提供對本申請的進一步理解，本申請的示意性實施例及其說明用于解釋本申請，并不構成對本申請的不當限定。圖1是細胞增殖實驗(MTT)結果：其中，分別為MTT檢測不同濃度C2ORF40MPF對(A)BT549和(B)MDAMB231細胞增殖的影響；其中(C)和(D)為MTT檢測75μmol/l的ScrC2ORF40和C2ORF40MPF對細胞增殖影響，是為了比較C2ORF40MPF相對于ScrambledC2ORF40mimicpeptide對細胞增殖影響的特異性；(E)和(F)分別為BT549和MDAMB231細胞的IC50值；(G)和(H)為MTT檢測不同濃度C2ORF40MPF對A549和H1299細胞增殖的影響。C2ORF40MPF和ScrC2ORF40:C2ORF40mimicpeptide和ScrambledC2ORF40mimicpeptide；*P<0.05and**P<0.01基于t-檢驗。圖2是克隆形成實驗結果：其中，分別為克隆形成實驗檢測C2ORF40MPF對于(A)BT549和(B)MDAMB231細胞增殖的影響。C2ORF40MPF和ScrC2ORF40:C2ORF40mimicpeptide和ScrambledC2ORF40mimicpeptide；*P<0.05and**P<0.01基于t-檢驗。圖3是細胞遷移和侵襲實驗結果：其中，分別為Transwell細胞遷移實驗檢測C2ORF40MPF對于(A)BT549和(B)MDAMB231細胞遷移能力的影響；Matrigel細胞侵襲實驗檢測C2ORF40MPF對于(C)BT549和(D)MDAMB231細胞侵襲能力的影響。C2ORF40MPF和ScrC2ORF40:C2ORF40mimicpeptide和ScrambledC2ORF40mimicpeptide；圖中的標尺＝200μm；*P<0.05and**P<0.01基于t-檢驗。圖4是流式細胞術檢測C2ORF40MPF多肽對有絲分裂期的影響：其中，(A)BT549和(B)MDAMB231細胞分別在Control或100μMScrC2ORF40或100μMC2ORF40MPF條件下培養48小時，然后經流式細胞術檢測并分析細胞周期的變化：(C)將流式分析細胞周期和細胞同步化處理結合，同步化處理的MDAMB231細胞釋放一定的時間后，經流式細胞術檢測C2ORF40MPF對于細胞周期的影響。C2ORF40MPF和ScrC2ORF40:C2ORF40mimicpeptide和ScrambledC2ORF40mimicpeptide；*P<0.05and**P<0.01基于t-檢驗。圖5是裸鼠移植瘤實驗結果：裸鼠腋下接種MDAMB231細胞后，待瘤體達到一定體積，給予多肽治療，(A)和(B)治療第23天，麻醉處死后取瘤體；(C)瘤體稱重后，統計分析；(D)瘤體體積增長情況。C2ORF40MPF和ScrC2ORF40:C2ORF40mimicpeptide和ScrambledC2ORF40mimicpeptide；*P<0.05and**P<0.01基于t-檢驗。具體實施方式應該指出，以下詳細說明都是例示性的，旨在對本申請提供進一步的說明。除非另有指明，本文使用的所有技術和科學術語具有與本申請所屬
的普通技術人員通常理解的相同含義。需要注意的是，這里所使用的術語僅是為了描述具體實施方本文檔來自技高網...

【技術保護點】
多肽C2ORF40MPF在制備抗腫瘤藥物中的應用；所述多肽C2ORF40MPF的氨基酸序列如SEQ?ID?NO.1所示。

【技術特征摘要】
1.多肽C2ORF40MPF在制備抗腫瘤藥物中的應用；所述多肽C2ORF40MPF的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示。2.如權利要求1所述的應用，其特征在于，所述腫瘤為乳腺癌或肺癌。3.多肽C2ORF40MPF在制備抑制腫瘤細胞增殖、遷移和/或侵襲的藥物中的用途；所述多肽C2ORF40MPF的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示。4.如權利要求3所述的用途，其特征在于，所述腫瘤細胞為乳腺癌細胞或肺癌細胞。5.多肽C2ORF40MPF在制備抑制腫瘤瘤體生長的藥物...

【專利技術屬性】
技術研發人員：魏光偉，毛建華，李超陽，
申請(專利權)人：山東大學，
類型：發明
國別省市：山東,37