一種病毒凍干制劑的制備方法技術

本發明專利技術公開了一種病毒凍干制劑的制備方法。涉及領域為病毒凍干制劑及其制備方法。本發明專利技術的目的是提供一種病毒凍干制劑。本發明專利技術的技術方案是：一種病毒凍干制劑，包括新城疫病毒原液及冷凍干燥添加劑，所述冷凍干燥添加劑基本上由人血白蛋白和羥乙基淀粉組成。生產上述病毒凍干制劑的方法，包括以下步驟：(1)將病毒原液及冷凍干燥添加劑混勻，無菌過濾，分裝于西林瓶中；(2)將西林瓶放入冷凍干燥器內，分別在5℃、0℃、-6℃各平衡1小時；(3)快速凍結，將制品溫度降至-50℃維持3小時；(4)真空干燥；(5)加熱干燥，在制品溫度達到30℃條件下持續3小時；(6)加塞，封口。

【技術實現步驟摘要】

本專利技術涉及，特別是涉及一種新城疫病毒凍干制劑的制備方法。
技術介紹
新城疫病毒屬于動物副粘科病毒，目前生產新城疫病毒凍干制劑的方法是將新城疫病毒La Sota株、clone30株、HBi株、F株或N79株等標準病毒液，接種于10日齡的雞胚尿囊腔內，37°C孵化繁殖。定時收取合格的雞胚尿囊液，與適量冷凍干燥添加劑混合均勻，定量分裝于無菌西林瓶內，經預凍真空加熱干燥制成凍干制劑。用上述方法生產凍干制劑的過程中存在以下幾個問題1、凍干制劑保質期較短； 2、凍干制劑的生物活性不穩定。
技術實現思路
本專利技術的目的是提供一種保質期較長的新城疫病毒凍干制劑。，包括新城疫病毒原液及冷凍干燥添加劑，所述冷凍干燥添加劑基本上由人血白蛋白和羥乙基淀粉組成。為了更好地維持和保護原液生物的活性，所述冷凍干燥添加劑中還含有抗壞血酸鈉、精氨酸。所述冷凍干燥添加劑各組分的重量體積比為人血白蛋白 O. 5 ~ 2.0%精氨酸O. 5 ~ 2. 0%抗壞血酸鈉 9. 0~ 11. 0%羥乙基淀粉 5. 0~20. 0%所述的新城疫病毒原液與所述冷凍干燥添加劑的比例是新城疫病毒原液冷凍干燥添加劑=I : I 5 : I。一種生產病毒凍干制劑的方法，包括以下步驟(I)將新城疫病毒原液過O. 45 μ m濾芯，經過濃縮、純化后加入冷凍干燥添加劑混勻無菌過濾，分裝于西林瓶中，半加塞，其中，所述冷凍干燥添加劑基本上由人血白蛋白和羥乙基淀粉組成；(2)將西林瓶放入冷凍干燥器內，分別在4. 8 5. 2 °C、0. 2 O.8°C、-5. 8 -6. 2°C各平衡I小時；(3)快速凍結，將制品溫度降至-48 -52°c維持2. 5 3. 5小時；(4)真空干燥；(5)加熱干燥，在制品溫度達到25. 5 37. 5°C條件下持續2. 5 3. 5小時；(6)全部加塞，壓封鋁蓋。所述病毒原液是將新城疫病毒接種于10日齡雞胚尿囊腔內，36°C孵化繁殖，收取雞胚尿囊液。所述冷凍 干燥添加劑中還有抗壞血酸鈉、精氨酸。所述冷凍干燥添加劑各組分的重量體積比為人血白蛋白 O. 5 ~ 2.0%精氨酸O. 5 2. 0%抗壞血酸鈉 9. O ~ 11.0%羥乙基淀粉 5. 0~20. 0%所述病毒原液與所述冷凍干燥添加劑的比例是新城疫病毒原液冷凍干燥添加劑=I : I 5 : I。本專利技術由于采用了上述技術方案，因此具有以下優點I.在凍干制劑的減壓一升溫一干燥過程中，適宜的升溫程序對維持生物制品的生物活性、制劑的外觀形態是重要的。將升溫干燥的終點控制在30°C并持續3小時，使制品中的殘余水分以定量非共價鍵形式存在，以維持原液的形態、活性的穩定，減少成品凍干制劑在保存過程中的效價急速回落，并延長保存時間。2、本專利技術的冷凍干燥添加劑與新城疫病毒原液具有極佳的生物相容性。羥乙基淀粉是一種水溶性變性淀粉，屬于多糖，既能夠很好的保護病毒活性，又是一種很好的凍干賦形劑；精氨酸是一種很好的蛋白保護物質；抗壞血酸鈉是抗細胞膜氧化的維生素；特別是當加入人血白蛋白時，它們共同構成了適合于新城疫病毒原液的仿生體系，有利于原液的休眠與復蘇，本專利技術的凍干制劑在4°C條件下至少可以保存14個月。3、微生物在液體凍結過程中，即液體降溫一結冰一形成玻璃化晶態的過程中會發生從宏觀到微觀的適應性變形，以保持其生物活性。在凍干制劑生產的凍結過程中采用5°C、0°C、_6°C各平衡I小時，有利于原液對溫度的適應性變形，對維持凍干制劑的生物效價是必要的。下面結合具體實施例對本專利技術做進一步說明。具體實施例方式實施例I、生產本專利技術凍干制劑本專利技術新城疫病毒凍干制劑的生產包括以下步驟I、生產用種毒為clone30株；2、孵化取受精蛋，按照《中華人民共和國生物制品質量標準》(以下簡稱《標準》)中的方法37°C孵育10日。用生理鹽水稀釋種毒，使病毒效價為91og2，每雞胚尿囊腔接種該種毒O. 1ml，置36 °C孵育72小時；3、收獲原液棄去24小時前死亡的雞胚，剩余的雞胚置4°C冷藏過夜。在無菌條件下吸取尿囊液，混勻過濾，密閉保存；4、將收獲的原液用O. 45 μ m濾芯過濾，用超濾器濃縮，用層析柱純化；5、配制添加劑(I)取抗壞血酸鈉108. 7克、羥乙基淀粉198. 2克、精氨酸19. 6克，溶于600毫升蒸餾水中，加入20%人血白蛋白20ml，過濾，115°C消毒40分鐘；(2)將第(I)溶液，用10%無菌磷酸氫二鈉調節溶液的pH值至6. 8±0· 1，補加蒸餾水至1000毫升，混勻；6、配制凍干制劑液將效價調整為91og2的原液與添加劑溶液以I : I的比例混勻，注入西林瓶中，半加塞；7、凍結將分裝好的凍干制劑液放入冷凍干燥工作箱內，預置降溫程序，分別在5°C、0°C、-6°C各平衡I小時，啟動快速凍結程序，將物料溫度降至_50°C，維持3小時；8、真空干燥啟動真空工作程序，待冷凍干燥器內相對壓力降至5Pa，預設升溫程序，以每次升溫15°C維持30分鐘，持續減壓升溫至30°C并維持3小時；9、全部加塞，壓封鋁蓋。成品凍干制劑按《標準》所列方法檢定，合格。實施例2、本專利技術凍干制劑在2 8 °C保存條件下的保質期在2 8°C條件下分別測定了 3個批次用本專利技術方法制備的凍干制劑在不同時期的半數感染率(EID5tl)，結果如表I所示表I :凍干制劑在2 8°C保存條件下的EID50本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種病毒凍干制劑的制備方法，包括新城疫病毒原液及冷凍干燥添加劑，其特征在于：所述冷凍干燥添加劑基本上由人血白蛋白和羥乙基淀粉組成。

【技術特征摘要】
1.一種病毒凍干制劑的制備方法，包括新城疫病毒原液及冷凍干燥添加劑，其特征在于所述冷凍干燥添加劑基本上由人血白蛋白和羥乙基淀粉組成。2.根據權利要求I所述的病毒凍干制劑，其特征在于所述冷凍干燥添加劑中還含抗壞血酸鈉、精氨酸。3.根據權利要求2所述的病毒凍干制劑，其特征在于所述冷凍干燥添加劑各組分的重量體積比為人血白蛋白 O. 5 ~ 2.0%精氨酸O. 5 ~ 2. 0% 抗壞血酸鈉 9. O - 11. 0%羥乙基淀粉 5. 0~20. 0%4.根據權利要求I所述的病毒凍干制劑，其特征在于所述新城疫病毒原液與所述冷凍干燥添加劑的比例是新城疫病毒原液冷凍干燥添加劑=I I 5 I。5.一種生產病毒凍干制劑的方法，包括以下步驟 (1)將新城疫病毒原液過O.45 μ m濾芯，經過濃縮、純化后加入冷凍干燥添加劑混勻，無菌過濾，分裝于西林瓶中，半加塞，其中所述冷凍干燥添加劑基本上由人血白蛋白、羥乙基淀粉組成； (2)待西林瓶放入冷...

【專利技術屬性】
技術研發人員：沈麗麗，
申請(專利權)人：天津濟命生生物科技有限公司，
類型：發明
國別省市：