一種羰基還原酶不對稱還原制備(-)-5-氮雜螺[2,4]庚烷-7-醇的方法技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)公開了一種羰基還原酶不對稱還原制備(

【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】
一種羰基還原酶不對稱還原制備(
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氮雜螺[2,4]庚烷
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醇的方法


[0001]本專利技術(shù)屬于有機(jī)合成
，具體涉及一種羰基還原酶不對稱還原制備(
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氮雜螺[2,4]庚烷
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醇的方法。

技術(shù)介紹

[0002]AL8326是一種由南京愛德程醫(yī)藥科技有限公司研制的具有自主知識產(chǎn)權(quán)的1.1類(全球未上市)抗腫瘤新藥，是通過抑制酪氨酸激酶FGF家族受體、VEGF家族受體以及Aurora激酶家族的Aurora
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B小分子口服片劑，其結(jié)構(gòu)全新、抗腫瘤作用明確且毒性反應(yīng)較小，具有廣譜的體內(nèi)外抗腫瘤活性，動物實驗證明其可有效抑制多種實體瘤。
[0003]目前臨床前研究中使用的AL8326是一種混旋化合物，即具有左旋和右旋兩種結(jié)構(gòu)，其進(jìn)入人體后僅有一種構(gòu)型能夠真正作用于病變部位，另一種構(gòu)型并無藥效而且還是導(dǎo)致藥物毒副作用的根本原因，經(jīng)臨床驗證左旋體(
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)AL8326能發(fā)揮更好的治療效果。(
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氮雜螺[2.4]庚烷
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醇作為制備左旋體(
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)AL8326的重要中間體，其合成將極大地推動手性藥物(
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)AL8326的研究進(jìn)展，使藥物AL8326有望分離為單一構(gòu)型的化合物，進(jìn)而使藥物AL8326瞄準(zhǔn)特定病變部位并且在病變部位積蓄或釋放有效成分，在病變部位局部形成相對較高的藥物分子濃度，在提高藥效的同時抑制毒副作用，也減少對正常組織細(xì)胞的傷害，從而發(fā)揮出更好的高效低毒作用。
[0004]目前，關(guān)于混旋的5
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氮雜螺[2,4]庚烷
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醇的拆分已有報道。中國專利技術(shù)專利申請，CN113072480A，給出了一種手性(
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氮雜螺[2.4]庚烷
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醇的制備方法，其合成路線如下式1所示：
[0005][0006]上述合成路線雖然能夠獲得合格的目標(biāo)產(chǎn)物手性(
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氮雜螺[2.4]庚烷
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醇，但是存在合成路線長，操作步驟繁瑣，合成效率低，且存在單次拆分中間體利用率低以及目標(biāo)產(chǎn)物總收率偏低的缺點。
[0007]本專利技術(shù)旨在提出一種羰基還原酶不對稱還原制備(
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氮雜螺[2,4]庚烷
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醇的方法，以期解決上述技術(shù)問題。

技術(shù)實現(xiàn)思路

[0008]本專利技術(shù)的目的在于，克服現(xiàn)有技術(shù)中存在的缺陷，提供一種羰基還原酶不對稱還原制備(
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氮雜螺[2,4]庚烷
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醇的方法，反應(yīng)路線短，操作簡單，具有原料便宜易得、利用率高、反應(yīng)時間快、反應(yīng)條件溫和、產(chǎn)物手性純度高、環(huán)境污染少等優(yōu)點；本專利技術(shù)方法制備的(
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氮雜螺[2,4]庚烷
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醇的收率在85％以上(以5
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氮雜螺[2,4]庚烷
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酮計)、目標(biāo)產(chǎn)物ee值為100％。
[0009]為實現(xiàn)上述目的，本專利技術(shù)的技術(shù)方案是設(shè)計一種羰基還原酶不對稱還原制備(
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氮雜螺[2,4]庚烷
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醇的方法，包括如下步驟：
[0010]S1：羰基還原酶凍干粉的制備，將ATCC 7330菌株接種到Luria
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Bertani液體培養(yǎng)基上，接種量為1％，培養(yǎng)基中氯霉素含量為100μg/mL，培養(yǎng)溫度為25℃，220rpm培養(yǎng)24h，當(dāng)測得OD
600
濃度為0.6時加入異丙基
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β
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D
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硫代半乳糖苷并使其濃度為0.4mM，25℃誘導(dǎo)16h，誘導(dǎo)結(jié)束后，離心收集菌體，經(jīng)洗菌、重懸、超聲破碎后凍干，獲得羰基還原酶凍干粉；
[0011]S2：將步驟S1制備的羰基還原酶凍干粉、輔酶、輔酶循環(huán)酶、緩沖液和溶劑混合制備成反應(yīng)體系溶液，將5
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氮雜螺[2,4]庚烷
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酮加入反應(yīng)體系溶液中，在羰基還原酶的催化下，5
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氮雜螺[2,4]庚烷
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酮進(jìn)行不對稱還原反應(yīng)生成(
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氮雜螺[2,4]庚烷
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醇。
[0012]優(yōu)選的技術(shù)方案是，所述的步驟S2中，溶劑為甲醇、乙醇、正丙醇、丁醇、異丙醇、二
甲基亞砜、水中的一種或幾種。
[0013]進(jìn)一步優(yōu)選的技術(shù)方案還有，所述的步驟S2中，緩沖液為甲酸鹽緩沖液，其溶質(zhì)摩爾濃度為0.05mol/L。
[0014]進(jìn)一步優(yōu)選的技術(shù)方案還有，所述的步驟S2中，甲酸鹽緩沖液為HCOOH
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HCOONa水溶液，其中溶劑與甲酸鹽緩沖液的體積投料比為1:1～30。
[0015]進(jìn)一步優(yōu)選的技術(shù)方案還有，所述的步驟S2中，溶劑為水，水與甲酸鹽緩沖液的體積投料比為1:6。
[0016]優(yōu)選的技術(shù)方案還有，所述的步驟S2中，5
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氮雜螺[2,4]庚烷
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酮和羰基還原酶在反應(yīng)體系溶液中的質(zhì)量濃度比為1:0.1～1，其中5
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氮雜螺[2,4]庚烷
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酮質(zhì)量濃度為3.5％。
[0017]優(yōu)選的技術(shù)方案還有，所述的步驟S2中，輔酶為NADPH或NADH，輔酶與羰基還原酶凍干粉的質(zhì)量投料比為1:20～100；所述的輔酶循環(huán)酶為甲酸脫氫酶，甲酸脫氫酶與羰基還原酶凍干粉的質(zhì)量投料比為1:1.25。
[0018]進(jìn)一步優(yōu)選的技術(shù)方案還有，所述的步驟S2中，輔酶為NADPH，輔酶與羰基還原酶凍干粉的質(zhì)量投料比為1:50。
[0019]優(yōu)選的技術(shù)方案還有，所述的步驟S2中，羰基還原酶的催化反應(yīng)溫度為10～50℃，反應(yīng)時間為1～2h，反應(yīng)體系溶液的pH為6.5～8.0。
[0020]進(jìn)一步優(yōu)選的技術(shù)方案還有，所述的步驟S2中，羰基還原酶的催化反應(yīng)溫度為20～30℃。
[0021]本專利技術(shù)的優(yōu)點和有益效果在于：
[0022]1、本專利技術(shù)的一種羰基還原酶不對稱還原制備(
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醇的方法，反應(yīng)路線短，操作簡單，具有原料便宜易得、利用率高、反應(yīng)時間快、反應(yīng)條件溫和、產(chǎn)物手性純度高、環(huán)境污染少等優(yōu)點。
[0023]2、本專利技術(shù)的一種羰基還原酶不對稱還原制備(
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氮雜螺[2,4]庚烷
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醇的方法，制備的(
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)本文檔來自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護(hù)點】

【技術(shù)特征摘要】
1.一種羰基還原酶不對稱還原制備(
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氮雜螺[2,4]庚烷
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醇的方法，其特征在于，包括如下步驟：S1：羰基還原酶凍干粉的制備，將ATCC 7330菌株接種到Luria
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Bertani液體培養(yǎng)基上，接種量為1％，培養(yǎng)基中氯霉素含量為100μg/mL，培養(yǎng)溫度為25℃，220rpm培養(yǎng)24h，當(dāng)測得OD
600
濃度為0.6時加入異丙基
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β
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D
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硫代半乳糖苷并使其濃度為0.4mM，25℃誘導(dǎo)16h，誘導(dǎo)結(jié)束后，離心收集菌體，經(jīng)洗菌、重懸、超聲破碎后凍干，獲得羰基還原酶凍干粉；S2：將步驟S1制備的羰基還原酶凍干粉、輔酶、輔酶循環(huán)酶、緩沖液和溶劑混合制備成反應(yīng)體系溶液，將5
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氮雜螺[2,4]庚烷
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酮加入反應(yīng)體系溶液中，在羰基還原酶的催化下，5
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酮進(jìn)行不對稱還原反應(yīng)生成(
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氮雜螺[2,4]庚烷
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醇。2.如權(quán)利要求1所述的羰基還原酶不對稱還原制備(
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氮雜螺[2,4]庚烷
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醇的方法，其特征在于，所述的步驟S2中，溶劑為甲醇、乙醇、正丙醇、丁醇、異丙醇、二甲基亞砜、水中的一種或幾種。3.如權(quán)利要求2所述的羰基還原酶不對稱還原制備(
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氮雜螺[2,4]庚烷
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醇的方法，其特征在于，所述的步驟S2中，緩沖液為甲酸鹽緩沖液，其溶質(zhì)摩爾濃度為0.05mol/L。4.如權(quán)利要求3所述的羰基還原酶不對稱還原制備(
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氮雜螺[2,4]庚烷
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醇的方法，其特征在于，所述的步驟S2中，甲酸鹽緩沖液為HCOOH
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HCOONa水溶...

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：張文超，呂列超，于佳，張林，
申請(專利權(quán))人：常州佳德醫(yī)藥科技有限公司，
類型：發(fā)明
國別省市：